胆固醇修饰的s-BLM对ss-DNA的电化学响应研究

胆固醇修饰的s-BLM对ss-DNA的电化学响应研究

论文摘要

具有生物膜结构和生物相容性的双分子层膜(BLMs)易于修饰,将适当的活性分子包埋进脂双分子层中应当能够赋予BLMs以相应的功能特征;胆固醇能调节BLMs的流动性和增加BLMs 的稳定性,所以胆固醇在BLMs 的含量对于基于有支撑的脂双分子层膜(supported BLM,s-BLM)的生物传感器十分重要。因此通过实验,研究了不同量的胆固醇对s-BLM 稳定性的影响,提出了一种新的形成有胆固醇修饰的s-BLM 的方法,并利用这种方法研究了一种生物膜电化学技术,基于表面稳定的由鸡蛋卵磷脂组成的BLMs,它对寡聚单链脱氧核糖核酸(ss-DNA),即胸腺嘧啶脱氧核糖核酸二十核苷(Oligo d(T20))具有良好的响应。本文就是在研究不同量的胆固醇修饰s-BLM 的基础之上,通过其对ss-DNA 响应的分析,希望可能构建一种基于整合有ss-DNA 的s-BLM 生物传感器装置。本文的主要研究工作和结论如下: (1)研究了不同量的胆固醇对s-BLM稳定性的影响: 本文利用循环伏安法(CV)对比研究了不同量的胆固醇修饰成膜,对膜的稳定性的影响;结果表明,胆固醇与磷脂的摩尔比为1 ∶1 时,s-BLM的稳定性最好。(2)研究了s-BLM对连接有四氯荧光素(tetrachloro-fluorescein,TET)的Oligo d(T20)的响应: 将连接有TET的ss-DNA加入电解质溶液中,观察s-BLM对连接有TET的Oligo d(T20)的响应,结果发现,s-BLM对连接有TET的Oligo d(T20)的响应在大约14分钟出现,首先峰电流突然升高,然后逐步下降,最后趋于平稳。(3)研究了s-BLM 对连接有嵌二萘(pyrene)的Oligo d(T20)的响应: 将连接有pyrene 的ss-DNA 加入电解质溶液中,观察s-BLM 对连接有pyrene的Oligo d(T20)的响应,结果发现,s-BLM 对连接有pyrene 的Oligo d(T20)的响应在大约9 分钟出现,首先峰电流突然升高,然后逐步下降,最后趋于平稳。从s-BLM 对连接有pyrene 和TET 的Oligo d(T20)的响应比较来看,前者的响应时间比后者要快,峰电流值的变化要大。另外,研究发现,ss-DNA 修饰s-BLM,形成整合有ss-DNA 的s-BLM,s-BLM稳定性显著提高。(4)构建基于s-BLM 的微阵列传感器模型: 提出一个基于s-BLM 的微型阵列生物传感器模型,将s-BLM 与微电子技术和微加工技术相结合,可以实现对多目标进行同时检测。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 1 绪论
  • 1.1 论文的选题及其研究意义
  • 1.1.1 论文的选题
  • 1.1.2 研究的目的和意义
  • 1.2 国内外研究的现状
  • 1.2.1 生物传感器的研究和发展
  • 1.2.2 BLMs 的研究进展
  • 1.3 本文研究的内容
  • 1.4 本章小结
  • 2 空针及未用胆固醇修饰的成膜
  • 2.1 支撑BLM 的形成
  • 2.1.1 主要的实验仪器设备及材料
  • 2.1.2 支撑BLM 的制作
  • 2.2 双分子层膜的循环伏安法(CV)
  • 2.3 空针的CV 曲线图
  • 2.4 未修饰膜的CV 曲线图
  • 2.4.1 未修饰的s-BLM 的CV 典型曲线图
  • 2.4.2 支撑BLM 的成膜过程
  • 2.4.3 未修饰s-BLM 的CV 曲线图
  • 2.4.4 未修饰s-BLM 的CV 曲线分析
  • 2.5 本章小结
  • 3 胆固醇对支撑双分子层膜稳定性的影响
  • 3.1 s-BLM 的稳定性
  • 3.1.1 胆固醇增加s-BLM 稳定性的作用机理
  • 3.1.2 海藻糖增加s-BLM 稳定性的作用机理
  • 3.2 用不同量的胆固醇修饰成膜的CV 曲线
  • 3.3 支撑BLM 的稳定性分析
  • 3.3.1 用不同量的胆固醇修饰成膜的CV 曲线分析
  • 3.3.2 用不同量的胆固醇修饰成膜的电导曲线
  • 3.3.3 不同量的胆固醇修饰成膜的电导曲线分析
  • 3.4 本章小结
  • 4 s-BLM 对ss-DNA 的响应研究
  • 4.1 引言
  • 4.2 s-BLM 对连接有TET 的Oligo d(T20) 的响应
  • 4.2.1 s-BLM 对连接有TET 的Oligo d(T20) 响应的CV 曲线
  • 4.2.2 加入连接有TET 的Oligo d(T20)后的峰电流变化图
  • 4.2.3 连接有TET 的Oligo d(T20)前与后的电导曲线比较分析
  • 4.3 s-BLM 对连接有pyrene 的Oligo d(T20) 的响应
  • 4.3.1 s-BLM 对连接有pyrene 的Oligo d(T20) 响应的CV 曲线
  • 4.3.2 加入连接有pyrene 的Oligo d(T20)后的峰电流变化
  • 4.3.3 连接有pyrene 的Oligo d(T20)前与后的电导曲线比较分析
  • 4.4 s-BLM 对连接有TET 和pyrene 的Oligo d(T20) 的响应分析和比较
  • 4.5 本章小结
  • 5 基于s-BLM 的微型阵列传感器模型的建立
  • 5.1 引言
  • 5.2 基于s-BLM 的微型阵列生物传感器模型
  • 5.3 本章小结
  • 6 结论与展望
  • 6.1 论文的主要工作和结论
  • 6.2 后续研究工作的展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录
  • 独创性声明
  • 学位论文版权使用授权书
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