苯丙胺对大鼠肝脏毒性损害的实验研究

论文摘要

目的：本研究通过苯丙胺(amphetamine，AP)诱导的大鼠中毒模型，以其对机体肝脏的毒性损害为切入点，观察在不同时间和不同剂量下，大鼠肝组织和细胞的形态学变化以及脂肪酸合成酶的活性表达，探讨AP对机体脏器损害的毒理作用。方法：SD大鼠65只，体重200±20g，随机分成对照组(Z组，n=5)和实验组(A、B、C，n=20)，饲养及光照节律正常。A组为AP小剂量组，0.5mg／kg；B组为中剂量组，2.5mg／kg；C组为大剂量组，5mg／kg；Z组为生理盐水组，0.5mg／kg；给药方式为左后肢肌肉注射。每天上午给药一次。各组分别在用药14d、28d和42d处死，取肝并经石蜡包埋、切片。1．应用HE染色学方法，观察大鼠肝小叶结构及肝细胞脂肪变性、空泡样变性、肝细胞核固缩现象；2．应用免疫组织化学方法定性和定位大鼠肝脂肪酸合成酶阳性细胞变化；3．应用Western Blot方法定量检测大鼠肝脂肪酸合成酶量的变化。结果：1．HE染色后，光镜下观察到，大鼠肝内肝窦变窄、消失，肝索解离、结构消失；肝细胞肿胀、浑浊、细胞浆出现脂滴，较大的脂滴将细胞核挤压变形；肝细胞呈现局部、部分或弥漫性脂肪变性；严重时可见肝细胞气球样变，边界不清，可见核固缩。毒性损害严重程度随着时间的延长和剂量的增加而加重，呈正相关性。2．免疫组化结果显示：大鼠肝内脂肪酸合成酶阳性细胞胞浆呈黄染，阳性细胞数随时间和剂量的增加而减少，呈负相关。3．Western Blot结果表明大鼠肝内脂肪酸合成酶的含量随着时间和剂量的增加而减少。结论：AP对肝脏有明显的毒性作用，主要表现为肝细胞的脂肪变性和细胞水肿；同时，经免疫组化和蛋白印迹方法证明，脂肪酸合成酶的细胞数目和含量随着AP的使用时间和剂量的增加而减少。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 前言
• 1 ATS 的概况
• 2 ATS 的研究进展
• 3 存在的问题及本课题研究目的和意义
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 观察指标
• 2 结果
• 2.1 HE 染色大鼠肝脏组织病理学变化
• 2.2 免疫组织化学检测大鼠肝脏脂肪酸合成酶阳性细胞
• 2.3 Western-blot 检测大鼠肝脏脂肪酸合成酶含量
• 3 讨论
• 3.1 AP 导致载脂蛋白的减少，甘油三脂的转运障碍
• 3.2 AP 导致肝细胞脂肪酸代谢过程异常
• +-K⁺泵功能因而发生障碍导致大鼠肝细胞水肿'>3.3 细胞膜 Na⁺-K⁺泵功能因而发生障碍导致大鼠肝细胞水肿
• 结论
• 参考文献
• 附图及说明
• 英文缩略词表
• 致谢