观赏铁线莲离体培养研究

论文摘要

(2)‘Warszawska Nike’最佳诱导和芽分化培养基都是MS+1mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA，诱导率和出芽率分别达81%和83.3%。最佳增殖培养基为MS+1mg·L-16-BA+0.01mg·L-1NAA，增殖倍数达2.8，在继代培养时增殖率和丛生芽率都不高，最高的也只有36.4%和46.7%。（3）‘Hagley Hybrid’最佳诱导培养基为MS+2mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA，诱导率达83.9%，最佳芽分化培养基为MS+1mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA，出芽率达86.7%。最佳增殖培养基为MS+2mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA，增殖倍数达2，继代增殖率和丛生芽率较低，出现了对照优于处理的现象，还需进一步加以研究。（4）MS+3mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+1.5mg·L-1KT是‘Marie Boisselot’、‘Niobe’、‘Ville de Lyon’、‘Viticella GˋMme Julia Correvonˊ’和‘Westerplatte’五个品种的最佳增殖培养基，‘Marie Boisselot’和‘Niobe’增殖倍数分别达2.4和2.9，接种后第5d都出现丛生芽的萌动，继代增殖率高达115.4%和103.8%，在增殖中既出现丛生芽萌发又有愈伤组织增殖；‘Ville de Lyon’和‘Viticella GˋMme JuliaCorrevonˊ’增殖倍数分别是1.9和2.1，接种后第5d ‘Viticella GˋMme JuliaCorrevonˊ’就出现丛生芽的萌动，丛生芽率高达100%，而‘Ville de Lyon’到第8d时才有萌动，丛生芽率达89.5%，到第10d时都出现愈伤组织增殖，增殖率均在96%以上；‘Westerplatte’增殖倍数高达3.2，接种后仅有丛生芽的萌动而没有愈伤组织的增殖，丛生芽率高达93.9%。（5）‘Rouge Cardinal’较适增殖培养基为MS+3mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+2mg·L-1KT，增殖倍数1.6，虽然不及KT为1.5mg·L-1时的1.7，但丛生芽率和增殖率都较高，尤其是丛生芽率达30.8%，而KT为1.5mg·L-1时没有丛生芽的出现。（6）‘Huldine’最适诱导培养基为MS+2mg·L-16-BA+0.01mg·L-1NAA，培养120d的诱导率高达96%，均为愈伤组织，虽然在70d时出现不定芽的萌动，但最终未能分化出芽，对照的诱导率为0，证实了基本培养基只能保证外植体的生存和最低的生理活动，只有添加适当的植物激素才能诱导愈伤组织的生长和细胞的分裂。（7）‘General Slkorshy’较适诱导培养基为MS+0.01～0.05mg·L-1NAA+0.125mg·L-1KT，芽分化的最佳培养基为MS+0.05mg·L-1NAA+1mg·L-1KT，出芽率达100%。虽然从第8d开始就出现不定芽的萌动，可是诱导时间长达42d，第20d时有出现愈伤组织，但是培养60d后诱导率也仅为42.3%和42.9%，从目前几组配方来看诱导效果不佳，需要进一步加以研究。（8）‘Ramona’较适诱导培养基为MS+0.05mg·L-1NAA+1mg·L-1KT，从第8d开始陆续出现不定芽的萌发，但最终没有分化成芽，到第42d时才出现少量愈伤组织，诱导率仅为40%，其中4个处理和对照的诱导率均为0，目前使用的激素种类和浓度对诱导效果不显著。（9）在MS+2mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA+1mg·L-1KT的诱导培养基中‘MarieBoisselot’>‘Gipsy Queen’>‘Niobe’>‘Westerplatte’，诱导率最高的达168.1%，最低的为110%，诱导出的愈伤组织质地疏松，呈透明的淡黄色至黄绿色；‘ViticellaGˋMme Julia Correvonˊ’、‘Ville de Lyon’和‘Westerplatte’表现一般，诱导出的愈伤组织呈黄白色，质地较脆，容易褐变，‘Viticella GˋMme Julia Correvonˊ’最严重，有近1/3外植体发生褐变，‘Ville de Lyon’和‘Westerplatte’有2.7%左右发生褐变。（10）外植体采摘季节对诱导率有直接影响，以‘Gipsy Queen’和‘WarszawskaNike’两个品种不同季节的诱导率和综合表现来看，春季采摘的外植体材料在所观测的试验指标上都明显优于秋季，更适宜接种进行诱导培养。如果在秋冬季节进行增殖培养，虽说季节是影响增殖的主要因素，但是在培养基中添加一定浓度的KT或者NAA，就能够打破季节的限制，使增殖倍数成倍增加。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 铁线莲属植物概况
• 1.2 植物组织培养技术的原理与发展
• 1.3 研究的目的意义
• 2 铁线莲属植物国内外研究概况
• 2.1 分类学研究
• 2.2 种质资源调查研究
• 2.3 化学成分及药用价值研究
• 2.4 繁殖研究
• 2.4.1 常规繁殖
• 2.4.2 组培快繁
• 3 材料与方法
• 3.1 材料来源
• 3.2 材料处理
• 3.3 培养基设计
• 3.3.1 诱导培养
• 3.3.2 增殖培养
• 3.3.3 生根培养
• 3.3.4 炼苗移栽
• 3.4 培养基灭菌及接种
• 3.5 培养条件
• 3.6 试验指标与数据处理
• 3.6.1 试验指标
• 3.6.2 数据处理
• 4 结果与分析
• 4.1 ‘Gipsy Queen’植株再生体系的建立
• 4.1.1 诱导体系的建立
• 4.1.2 继代增殖
• 4.1.3 防褐变处理
• 4.1.4 生根培养
• 4.1.5 炼苗移栽
• 4.2 激素种类与浓度对其他品种的影响
• 4.2.1 对外植体诱导的影响
• 4.2.2 对继代增殖的影响
• 4.3 不同品种间的表现差异
• 4.3.1 不同品种诱导体系建立的差异
• 4.3.2 不同品种间继代增殖的差异
• 4.4 不同季节对外植体诱导的影响
• 5 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.1.1 ‘Gipsy Queen’组织培养和植株再生体系的建立
• 5.1.2 8 个品种诱导及增殖体系的建立
• 5.1.3 3 个品种诱导体系的建立
• 5.1.4 不同品种间的差异
• 5.1.5 不同季节间的差异
• 5.2 讨论
• 5.2.1 影响 8 个品种诱导体系建立的因素
• 5.2.2 生长调节剂对 15 个品种组织培养的影响
• 5.2.3 褐变问题
• 5.2.4 影响生根的因素
• 5.2.5 影响移栽成活的因素
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介
• 导师简介
• 在读期间所获成果目录清单
• 附录
• 附图