论文摘要
目的研究针对VEGF的小分子干扰RNA（siRNA）介导的RNA干扰（RNAi）技术对人子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF基因及蛋白的靶向抑制作用,观察对细胞增殖的影响及形态的变化,探讨针对VEGF的siRNA介导RNAi技术的在子宫内膜癌基因治疗的应用前景。方法根据siRNA序列设计原则,设计并合成针对VEGF-165序列特异性小干扰RNA（siRNA）及阴性对照siRNA,应用德国QIAGEN公司RNAiFectTMTransfection试剂盒转染ishikawa细胞,分别于转染后12h、24h、48h、72h、7d后提取细胞RNA,应用实时荧光定量PCR检测其对VEGF mRNA表达水平的影响,Western Blot方法检测VEGF蛋白的表达水平,MTT法及细胞计数法检测细胞增殖的情况。结果（1）实验组的细胞明显变形、皱缩、变圆并开始脱落,内见凋亡小体。（2）荧光定量PCR检测发现转染后12h、24h、48h、72h VEGF mRNA表达水平明显下降,与对照组相比差异有统计学意义（Q值依次为6.44、8.75、19.23、7.34,P均＜0.05）,于转染后7天这种抑制作用消失（F=4.26,P＞0.05）;（3） Western Blot方法检测发现转染后12h、24h、48h、72h VEGF蛋白表达明显减弱（F值依次为19.7、79.6、203.1、58.2,P均＜0.05）,与对照组相比差异有统计学意义,于转染后7天这种抑制作用消失（F=3.2,P＞0.05）;（4） MTT法检测发现转染后12h-72h,实验组细胞增殖抑制率与相同时间点各对照组相比明显增高,差别有统计学意义（F值依次为20.4、25.1、40.6、23.4,P均＜0.05）,转染后7天这种抑制作用消失,差别无统计学意义（F=9.1,P＞0.05）;（5）细胞计数法发现转染后12h-7d,实验组细胞数均明显低于相同时间点各对组（F值依次为4.23、6.86、7.12、12.1,P均＜0.05）。结论针对VEGF的RNAi技术可有效抑制子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF基因及其蛋白的的表达,抑制细胞的生长增殖,且VEGF的表达的变化趋势与细胞增殖变化趋势一致,提示VEGF在子宫内膜癌的发生、发展中具有重要作用,针对VEGF的RNA干扰技术为子宫内膜癌基因治疗提供了新策略,为进一步利用RNAi技术抑制肿瘤生长、血管形成及局部侵袭和远处转移提供研究基础。
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- [4].华蟾素对子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学行为的影响[J]. 江苏医药 2009(07)
- [5].紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的作用研究[J]. 现代中西医结合杂志 2013(23)
- [6].凸度量空间上关于2N-映射的公共不动点的Ishikawa迭代的收敛性(英文)[J]. 黑龙江大学自然科学学报 2008(04)
- [7].雷帕霉素联合紫杉醇对子宫内膜癌Ishikawa细胞的作用及对HIF-1α、VEGF表达的影响[J]. 中国优生与遗传杂志 2013(03)
- [8].非扩张映射具有误差修改Ishikawa迭代算法的强收敛[J]. 数学学报(中文版) 2016(04)
- [9].番茄红素对子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的抑制作用[J]. 世界最新医学信息文摘 2016(40)
- [10].西罗莫司对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖的影响及其机制[J]. 实用临床医药杂志 2011(21)
- [11].硼替佐米诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡并增强其化疗敏感性[J]. 南方医科大学学报 2010(06)
- [12].增生算子方程的具误差的Ishikawa迭代序列的强收敛定理[J]. 数学杂志 2008(01)
- [13].赫赛汀诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡并增强其对化疗的敏感性[J]. 中国病理生理杂志 2015(09)
- [14].吉非替尼对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响[J]. 现代妇产科进展 2014(04)
- [15].求解变分不等式的Ishikawa类迭代算法[J]. 应用数学 2009(04)
- [16].卡铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞的作用[J]. 中国肿瘤 2013(02)
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- [18].大蒜素抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞生长的实验研究[J]. 医学研究杂志 2017(02)
- [19].子宫内膜癌Ishikawa细胞系孕激素膜受体表达的初步研究[J]. 中国医科大学学报 2008(06)
- [20].Ishikawa变形黏性迭代算法的强收敛性(英文)[J]. 南昌工程学院学报 2011(01)
- [21].来曲唑联合睾酮对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及凋亡的影响[J]. 中国全科医学 2019(S2)
- [22].紫草素对子宫内膜癌Ishikawa细胞雌激素信号通路表达的影响[J]. 世界中医药 2016(09)
- [23].三氟拉嗪对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的抑制作用[J]. 上海交通大学学报(医学版) 2014(05)
- [24].艾塞那肽抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞株裸鼠移植瘤的血管生成[J]. 中山大学学报(医学科学版) 2017(03)
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- [26].贝伐珠单抗单药及联合化疗对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中国医院药学杂志 2020(20)
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- [28].大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响[J]. 西部中医药 2017(09)
- [29].CXCL1在子宫内膜样腺癌中的表达及其对Ishikawa细胞增殖侵袭的影响[J]. 暨南大学学报(自然科学与医学版) 2019(06)
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