中国人群PBC家系成员的发病情况及机制初探

论文摘要

背景:原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis, PBC）是一种慢性进行性自身免疫性疾病,主要发病于女性,以肝内胆管损害和门脉炎症为主要特征,逐渐发生胆汁淤积和肝硬化,最终导致肝衰竭。随着人们认识水平的提高和抗线粒体抗体（antimitochondrial antibodies, AMA）检测技术的广泛应用,越来越多的PBC被确诊。90%到95%的PBC病人在出现临床症状之前可检测到AMA阳性。大部分PBC病人无症状,常常因在常规肝功能检测中突然发现结果异常而被确诊。部分PBC病人在医院检测时已经发展到了晚期。目前认为及时使用熊脱氧胆酸能阻止疾病的进一步发展,提高肝移植后生存率。大量的研究发现PBC具有家族聚集性。据估计,1%-7.1%的PBC病人有家族史。PBC常常发生在有家族史的人群中,尤其是一级亲属。PBC的研究已经进行了很多年,但是它的发生机制仍不清楚。目前认为PBC的发病机制是多因素的,主要是基因遗传易感性与环境因素相互作用的结果。PBC在单卵双胞胎具有非常高的患病一致率,而且PBC的家族聚集性都提示基因因素可能在PBC的发病中起着非常重要的作用。另外,肝门CD4+和CD8+T细胞浸润以及在胆管上皮细胞上的人类白细胞抗原（human leukocyte antigen, HLA）Ⅰ和Ⅱ表达均提示HLA分子在PBC的发生机制中起重要的作用。在中国,研究发现PBC发病与DRB1*0701高度相关,但与DRB1*0801不相关。与之相反的实验发现PBC发病与DRB1*0801高度相关。目前诸如PBC之类的罕见复杂疾病与HLA遗传易感性还不很清楚,有关基因还需要进一步的研究。目的:研究原发性胆汁性肝硬化（PBC）家系患者发病时的临床表现、生化指标及人类白细胞抗原（HLA）基因分型的特征,分析该疾病的发病机制,以提高对该病的认识。方法:分别用临床生化分析试剂盒、间接免疫荧光法、免疫印迹法和微阵列聚合酶链式反应（PCR）等技术对收集的31个家系129例一级亲属进行生化指标、自身抗体和HLAⅡ基因分型的相关检测。结果:一级亲属包括10例父母,65例同胞及54例子女。研究发现,31个PBC家系中1个家族患PBC,5个家系发现免疫异常。由此可见,PBC家系患病率为3.2%,免疫异常发生率为16.1%。所有的一级亲属都没有发现慢性肝脏疾病,有7例一级亲属是在本次研究中才发现自身抗体异常,均为抗核抗体（antinuclear antibody,ANA）阳性。其中,两例一级亲属ANA滴度高达1:320,一例为1:160,另外4例仅为1:40。然而在这些免疫异常的一级亲属中仅有一例患PBC,间接免疫荧光结果表现为AMA阳性并且免疫印迹法测定ANA谱为AMA-M2型。本实验除了观察所有PBC患者及一级亲属的临床表现外还对其肝功能进行了检查。研究发现,发生免疫异常的5个家系一级亲属中2例出现肝功能异常,主要表现在天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase, AST）,丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）值异常。γ谷氨酰基转肽酶（γ-glutamyl transpeptidase,GGT）和ALP均未见异常。而且同一个家系中三个姐妹同时发现肝功能异常。姐姐临床表现为乏力且超声表现为肝硬化,两个妹妹无症状,因在本研究中检测才发现自身抗体异常,尤其是其中一个妹妹特异性AMA-M2抗体阳性,后来经诊断为PBC。建议每天口服熊脱氧胆酸60mg,6个月后肝功能改善,疾病控制在无症状阶段。研究发现,在第一个家系的三个样本中共同含有HLAⅡ-DRB1（*08,*12）基因型,第二个家系中包含HLAⅡ-DRB1（*08,*15）。第四个家系的成员含有一个共同HLAⅡ-DRB1（*12）基因,另有一个含有HLAⅡ-DRB1（*04,*07）基因。第三个家系其中一个成员含HLAⅡ-DRB1 （*13）基因,还有一个含有HLAⅡ-DRB1（*07,*11）基因型。第三个家系和第四个家系都含有一个HLAⅡ-DRB1（*07）基因型。第五个家系没有相同的HLAⅡ-DRB1基因型。其中,母亲是HLAⅡ-DRB1（*03,*12）基因型,但是女儿却是HLAⅡ-DRB1 （*09,*14）基因型。结论:PBC具有一定的家族聚集性,其发病可能与HLAⅡ-DRB1（*08）高度相关。PBC家系患病率为3.2%,免疫异常发生率为16.1%。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 一、原发性胆汁性肝硬化的流行病学特征
• 二、原发性胆汁性肝硬化的自身抗体谱
• 三、原发性胆汁性肝硬化的病因及发病机制
• 四、原发性胆汁性肝硬化易感基因的研究现状
• 五、原发性胆汁性肝硬化的生物学治疗进展
• 正文
• 实验一 中国人群PBC 家系成员的发病情况
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验二 中国人群PBC 家系成员的机制研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢