论文摘要
目的观察缺氧对巨噬细胞高迁移率族蛋白B1（HMGB1）释放的诱导作用，并探讨其可能机制。方法采用巨噬细胞株RAW264.7，观察缺氧（1%O2或100μmol/LCoCl2）培养不同时间（6、12、24h）对细胞培养上清液中HMGB1含量、细胞HMGB1mRNA及细胞HMGB1胞内分布的影响。观察不同浓度N-乙酰半胱氨酸（NAC）、MAPK信号通路抑制剂（PD98059、SP600125、SB202190）对缺氧诱导细胞HMGB1释放的影响。HMGB1上清液含量和HMGB1mRNA表达水平分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测。结果巨噬细胞株RAW264.7缺氧（1%O2或100μmol/LCoCl2）培养12h后培养上清液中HMGB1含量及细胞HMGB1mRNA表达升高（P<0.05或P<0.01），24h时达到峰值；缺氧（1%O2）培养12h时，免疫荧光染色显示HMGB1出现核浆转移；NAC（10、100mmol/L）、PD98059（5、20μmol/L）、SP600125（5、20μmol/L）对巨噬细胞株RAW264.7缺氧（1%O2）培养24h后培养上清液中的HMGB1含量有明显抑制作用（P<0.01）。结论缺氧能诱导巨噬细胞释放HMGB1，其机制可能与胞内氧自由基产生及MEKJNK信号通路有关。
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