两亲环糊精高分子载体逆转肿瘤阿霉素耐药性的研究

论文摘要

P-糖蛋白（P-gp）的过表达是导致肿瘤细胞产生多药耐药性的主要原因之一,严重影响了癌症化疗的治疗效果。本课题组的前期实验已证实基于β-环糊精的两亲聚合物（PECL-CD和PELA-CD）能够在一定程度上逆转肿瘤细胞对传统抗癌药物的耐药性,提高耐药肿瘤细胞对药物的敏感性,然而其机制还不清楚。为此,在本课题中,我们合成了两大类两亲β-环糊精聚合物（PECL-CDs、PELA-CDs）,并通过一系列试验,研究该高分子载体对阿霉素耐药人乳腺癌细胞株MCF-7/DOX细胞中的P-gp蛋白功能的影响。细胞毒性实验表明,与游离的阿霉素相比,聚合物胶束载阿霉素能够高效的释放抗癌药物阿霉素并且能够增强阿霉素对MCF-7/DOX细胞的毒性。凋亡检测实验进一步证明,聚合胶束载阿霉素能够增加阿霉素在肿瘤细胞内的蓄积,从而显著增强阿霉素诱导的细胞凋亡。罗丹明Rh123细胞摄取试验表明,聚合物能够增加Rh123在P-gp过表达的MCF-7/DOX内的蓄积。我们还发现,空白的聚合物能够消耗MDR细胞内的ATP并且增强P-gp ATP酶活性。进一步的研究表明PELA-CD和PECL-CD聚合物能够下调细胞膜表面的P-gp蛋白的表达,但是对编码P-gp蛋白的MDR1基因的表达水平却没有影响。该类基于β-CD的两亲聚合物（PELA-CDs及PECL-CDs）能够抑制P-gp蛋白功能和逆转多药耐药（MDR）,在癌症治疗方面具有良好的应用前景,值得进行深入的研究。而且,我们的工作为更好的理解聚合物载体逆转多药耐药（MDR）的机制和开发更加有效的纳米载药系统提供了基础。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一章 基于β-环糊精的两亲聚合物的合成及表征
• 1.1 前言
• 1.2 实验部分
• 1.2.1 实验原料和仪器
• 1.2.2 两亲聚合物（PELA-CDs）和（PECL-CDs）的合成
• 1.2.3 两亲聚合物PELA-CD和PECL-CD的结构表征
• 1.2.4 PELA-CD和PECL-CD在水溶液中胶束化的研究
• 1.3 结果与讨论
• 1.3.1 PELA及PECL嵌段共聚物的合成与表征
• 1.3.2 β-CD与PELA及PECL的偶联
• 1.3.4 聚合物粒径的测定
• 1.4 本章小结
• 第二章 两亲聚合物载药胶束的制备
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 材料与仪器
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 检测方法确立
• 2.3.2 胶束载药
• 2.3.3 载药胶束的粒径
• 2.4 本章小结
• 第三章 两亲聚合物载体逆转MDR细胞多药耐药性的研究
• 3.1 引言
• 3.2 原料与仪器
• 3.2.1 原料
• 3.2.2 仪器
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 细胞毒性实验
• 3.3.2 Annexin V/PI细胞凋亡检测
• 3.3.3 Rh123细胞摄取实验
• 3.3.4 细胞内ATP含量测定
• 3.3.5 P-gp蛋白ATP酶活性检测
• 3.3.6 P-gp蛋白表达检测
• 3.3.7 RT-PCR
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 细胞毒性实验
• 3.4.2 Annexin V/PI细胞凋亡检测
• 3.4.3 Rh123细胞摄取
• 3.4.4 胞内ATP水平下降
• 3.4.5 P-gp蛋白ATP酶活性提高
• 3.4.6 P-gp蛋白表达抑制
• 3.4.7 MDR1基因表达的调节
• 3.5 本章小结
• 全文总结
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 作者简介