茶多酚对HL-60细胞株体外增殖及细胞周期的影响

论文摘要

目的：探讨茶多酚（tea polyphenols，TP）对人急性早幼粒白血病细胞株HL-60细胞增殖和细胞周期的影响。方法：采用MTT比色法观察TP、全反式维甲酸（alltransretinoic acid，ATRA）单用及两者合用对体外培养的HL-60细胞增殖活性的影响。采用HE染色、荧光染色观察用药后细胞形态，用流式细胞仪（FACS）检测细胞凋亡率及细胞周期。结果：①MTT比色法测定显示TP能抑制HL-60细胞增殖，呈剂量依赖性和时间依赖性。②TP与ATRA有明显的协同作用。用Weed系数判定200、400、800μg／mlTP与10μmol／l ATRA有协同抑制增殖作用。③流式细胞仪分析，TP处理组出现一特征性的亚二倍体凋亡峰。其凋亡率呈时间、剂量依赖性。联合用药时，凋亡率高于单独用药组。④流式细胞术发现单用茶多酚可使HL-60细胞阻滞于S期，其阻滞细胞的数量与药物浓度呈正相剂量关系，以作用24小时对细胞周期的阻滞作用最强。联合用药时细胞周期阻滞作用不明显。结论：①TP能有效地抑制急性早幼粒白血病细胞HL-60增殖，其抗增殖作用具有时间、剂量依赖性。②TP可体外诱导HL-60细胞凋亡，并使细胞周期阻滞于S期。因此，诱导细胞周期阻滞作用可能是茶多酚抗肿瘤的一个重要机制。③TP与ATRA联合对HL-60细胞具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡协同作用。TP可能与白血病化疗药物有协同作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 第二章 实验材料与方法
• 2.1 主要材料与试剂
• 2.1.1 实验对象
• 2.1.2 药物及试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 细胞培养
• 2.2.2 实验步骤
• 2.2.2.1 细胞生长抑制测定
• 2.2.2.2 细胞形态及凋亡检测
• 2.2.2.2.1 实验分组
• 2.2.2.2.2 制片
• 2.2.2.2.3 HE染色
• 2.2.2.2.4 荧光染色
• 2.2.2.2.5 流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期
• 2.3 数据的统计学处理
• 第三章 结果
• 3.1 MTT比色法检测细胞抑制率
• 3.2 流式细胞仪检测结果
• 3.2.1 细胞凋亡结果
• 3.2.1.1 单独用药组
• 3.2.1.1.1 DNA直方图
• 3.2.1.1.2.细胞凋亡率
• 3.2.1.1.3 细胞周期的影响
• 3.2.1.2 联合用药组
• 3.2.1.2.1 DNA直方图
• 3.2.1.2.2 细胞凋亡率及细胞周期的影响
• 3.3 TP作用后HL-60细胞形态学改变
• 附图
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述
• 参考文献