论文摘要
眼斑芫菁又名黄黑小斑蝥（Mylabris Cichorii Linnaeus）,属昆虫纲鞘翅目芫菁科（Coleopter:Meloidae）昆虫,为中国药典收录的重要动物药之一,近年来因其体内所含的斑蝥素（Cantharidin）在临床医学中显著的抗肿瘤作用而使这一资源昆虫的需求量大为增加,野生资源远远不能满足人类需求。由于其生活史复杂,人工饲养难题未能解决,目前尚未有室内大规模养殖成功的先例。为改善眼斑芫菁野生资源日益减少的现状,重庆大学对眼斑芫菁的人工饲养进行系列研究。本文研究了环境因子对眼斑芫菁生长发育影响,同时,对眼斑芫菁斑蝥素的提取方法与检测程序进行了改进,测定了人工饲养条件下各生活时期眼斑芫菁体内斑蝥素的含量的变化以及斑蝥素在虫体各部位的分布。所得主要结果如下:①在室内人工饲养条件下,观察并记录各阶段眼斑芫菁幼虫的生物学特征,研究眼斑芫菁的生活史。以观察到蜕皮作为龄期的划分依据,结果表明:眼斑芫菁的幼虫分为5个龄期,不同龄期的幼虫之间在形态、大小上有着明显的不同。②在室内人工饲养条件下光照及温度对眼斑芫菁幼虫生长发育有着明显的影响。在幼虫的发育及最终羽化时期,有无光照（14L:10D）的对比处理T检验表明二者有显著性差异,即人工饲养中光照因子不可忽略。在此条件下,配以28-30℃温度,眼斑芫菁没有明显的滞育期,一年可以发育3代左右另外也确定了饲养时最佳温度约为31℃,这和自然条件下眼斑芫菁产地（贵州罗甸）幼虫发育时期的温度接近。③本研究首次研制出了能解除眼斑芫菁幼虫对蝗虫卵专一性倚赖的半人工饲料,保持合适温度、光周期、湿度等外界条件,用实验室改良优化的成虫半人工饲料饲养眼斑芫菁,已经在室内连续饲养眼斑芫菁近20代。④比较了热碱提取法及酸提取法两种斑蝥素的提取方法,结果表明:两种方法在斑蝥素得率上无显著差异,而热碱提取法较为简便且提取工艺对环境污染小。对所得样品结晶经薄层层析及气相色谱进行检测,也表明所提取目标物杂质含量少,纯度可达99.5%。⑤通过对眼斑芫菁各生活时期体内斑蝥素含量的检测发现:初孵幼虫有着较高的斑蝥素相对含量,但绝对量很低。随着幼虫的发育进程,其体重和斑蝥素含量都逐渐增加。羽化后的成虫立即隔离饲养结果显示,雌雄虫的斑蝥素合成具有典型的性二型现象。隔离饲养的刚羽化雄虫和雌虫体内斑蝥素含量都很低,但雄虫在5-30天之内大量合成斑蝥素,而雌虫体内斑蝥素含量保持极低水平。而在雌雄混合饲养眼斑芫菁成虫组中,20-30天之内,雌虫体内可以检测到大量斑蝥素,而同期雄虫斑蝥素含量则远低于隔离饲养组。研究还显示,混合饲养组的平均单头虫斑蝥素含量高于隔离饲养组雌雄平均斑蝥素含量。成虫身体各部位的斑蝥素含量以腹部最高,胸部次之。