类金刚石薄膜血液相容性及人脐静脉内皮细胞种植实验研究

论文摘要

背景:随着大量医用高分子材料在生物医用领域的应用如组织工程、器官移植等,丰富了现代医学的诊疗手段。心脏瓣膜病是常见的心脏病,心脏瓣膜置换术是治疗心脏瓣膜病的有效方法。目前所用的机械瓣和生物瓣均存在一定的缺点,如不具备生长性、需抗凝、易感染、不能生长和自我修复等。探索和研究一种理想的人造心脏瓣膜,是心脏瓣膜外科领域所要解决的重大问题。随着组织工程技术的发展,组织工程心脏瓣膜被认为是一种潜在的理想的人造瓣膜,具有非常重要的临床应用前景,是目前心脏瓣膜外科领域重大研究课题。但构建组织工程心脏瓣膜包括支架的制作、细胞的种植、瓣膜的体外培养等诸多问题尚待解决。因此临床迫切需要一种生物相容性好和耐久性的心脏瓣膜。目的:研究类金刚石薄膜（Diamond- like Carbon,DLC）的血液相容性及人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC）的种植生长情况,探讨DLC的生物相容性程度,以期获得理想的心血管医用材料。方法:取对数生长期的细胞,稀释至1×104/ml接种到含类金刚石薄膜材料的多块96孔板中,每板同时设立阴性对照组（空白组）,置含5%（V/V）CO2、37℃的恒温培养箱培养,并于24、48、72、96及120h每日取出一块孔板,用四氮唑盐比色（MTT）法检测细胞的吸光度（A）值,根据标准曲线计算每天的细胞数,绘制细胞的生长曲线,并于第3、5、7天取出培养板行电镜扫描。分别采取正常人静脉血,在体外测定加入类金刚石薄膜材料后的血浆活化部分凝血活酶时间（Active partial thromboplastin time,APTT）、凝血酶原时间（Prothrombin time ,PT）和凝血酶时间（Thrombin time ,TT）,并设立阴性对照（不加金刚石材料）,鉴定材料的体外抗凝血活性。结果:通过MTT法绘制出的内皮细胞的生长曲线图可以看出,细胞与材料的复合培养后随着时间推移,细胞数增多,与阴性对照组对比,细胞增殖未受明显影响。电镜扫描,材料表面有细胞生长,并且随时间延长,细胞间出现细胞连接。对材料的体外抗凝血活性测定表明类金刚石薄膜体外未引起血液的PT、APTT、TT明显改变,血液相容性可能很好。结论:HUVEC在DLC薄膜材料中细胞增殖未受到明显影响,PT、APTT、TT无明显延长,表明DLC材料对HUVEC的细胞相容性和血液相容性可能很好,可以进一步行体内试验,以期能用于心脏瓣膜构建。

论文目录

• 中英文缩略词表
• 第一部分 类金刚石薄膜血液相容性及人脐静脉内皮细胞种植实验研究
• 中文摘要
• 英文摘要
• 正文
• 引言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二部分
• 个人简介
• 致谢
• 第三部分 综述
• 摘要
• 英文摘要
• 正文
• 参考文献