论文摘要
目的:了解CML患者胸腺近期输出功能（TRECs的含量）以及TCR Vβ亚家族T细胞的基因表达和克隆性增殖情况,从而为临床特异性免疫治疗研究提供资料。 方法:收集38例CML患者的42份外周血标本,分离PBMCs,并采用MACS方法分选部分患者的CD4+和CD8+细胞,提取RNA和DNA后,通过实时定量PCR（real-time PCR）检测各细胞中TRECs的含量,利用免疫荧光检测的PBMCs中CD3+细胞的阳性率,计算CD3+细胞中TRECs含量,同时还采用RT-PCR和基因扫描方法分析CML患者PBMCs、CD4+和CD8+细胞中TCR Vβ24个亚家族T细胞的基因表达和克隆性。14例正常人外周血作对照。 结果:CML-CP患者PBMCs、CD3+、CD4+和CD8+细胞中TRECs含量均明显低于正常人,而缓解期和allo-BMT 6个月后的患者CD3+细胞中TRECs含量比发病期有所升高,比正常人稍低,但差别均无统计学意义。不同性别的正常人和CML-CP患者外周血TRECs含量也有差别,正常人CD8+细胞和CML-CP患者CD4+细胞中TRECs含量,女性均明显高于男性,而在其它各组,尽管女性TRECs含量也比男性高,但差异无统计学意义。 全部CML患者均存在不同程度的Vβ亚家族缺失,平均仅表达5.52个（PBMCs）、11.58个（CD4+）和12.37个（CD8+）Vβ亚家族,三者均以Vβ13的表达率最高。化疗后早期,TCR Vβ亚家族的表达明显减少,达完全缓解时,Vβ亚家族的表达逐渐恢复。基因扫描分析发现:PBMCs、CD4+和CD8+细胞分别有70.4%（19/27例）、73.7%（14/19例）和89.5%（17/19例）的患者部分Vβ亚家族出现克隆性增殖T细胞,PBMCs和CD4+细胞中,克隆性增殖的T细胞分布于16和14个Vβ亚家族,均以Vp21克隆性增殖最常见,而CD8+细胞中,克隆性增殖的T细胞分布于20个Vβ亚家族,以Vβ11的克隆性增殖最常见。进一步分析还发现TCR Vβ亚家族的基因表达和克隆性增殖均与TRECs的含量呈正相关。 结论:本研究首先提供了CML患者胸腺和外周的T细胞免疫功能状态的情况。患者体内所出现的克隆性增殖T细胞与特异性抗CML有关,但由于CML患者胸腺近期输出功能明显低下,可能是其不能产生有效的抗CML效应的主要原因。
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标签：慢性粒细胞白血病论文; 胸腺近期输出功能论文; 实时定量论文; 亚家族论文; 基因扫描论文;