论文摘要
目的：研究不同浓度的CTGF对体外培养肌腱细胞增殖的影响，探讨CTGF参与肌腱损伤修复的可能机制。方法：本实验以成年兔后肢趾屈肌腱为材料，用酶消化后，将分离的细胞用含10％胎牛血清的培养基培养，贴壁达80％后传代。观察细胞的形态及生长规律。取第二代细胞，通过免疫组化的方法进行肌腱细胞鉴定。取第三代肌腱细胞，按细胞数约为4×10~3／孔接种在96孔培养板的48孔，每6孔为一组，共分为8组，根据每组CTGF浓度不同，分为5ng／ml CTGF组、10ng／ml CTGF组、20ng／ml CTGF组、50ng／ml CTGF组、100ng／ml CTGF组、200ng／ml CTGF组、500ng／ml CTGF组及对照组(不加CTGF)。显微镜下观察各组细胞均进入对数生长期时，用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)法染色，在酶联免疫检测仪上测出各孔吸光度(optical density，OD)值，并计算各组OD均值进行比较。结果：MTT实验通过比较各组OD值发现：5ng／mlCTGF组肌腱细胞增殖与对照组无显著性差异；5ng／ml、10ng／ml、20ng／ml、50ng／mlCTGF组肌腱细胞增殖有随CTGF浓度增加而上升的趋势，且各组之间的差异均有显著性(P＜0.05)；50ng／ml、100ng／ml、200ng／ml CTGF、500ng／ml CTGF组肌腱细胞增殖有随浓度增加而稍呈下降的趋势，但各组之间的差异均无显著性(P＞0.05)。结论：10ng／mlCTGF、20ng／mlCTGF、50ng／mlCTGF、100ng／mlCTGF、200ng／mlCTGF、500ng／mlCTGF有促进肌腱细胞增殖作用；5ng／mlCTGF对肌腱细胞增殖无明显作用。CTGF浓度在0ng／ml～50ng／ml之间时，肌腱细胞的增殖随浓度增加呈上升趋势；在50ng／ml～500ng／ml之间时，肌腱细胞的增殖随浓度增加稍呈下降趋势。50ng／ml为促肌腱细胞增殖的最佳CTGF浓度。