半乳糖脂的合成、肝靶向研究及利用“点击化学”合成糖缀合物

论文摘要

存在于肝实质细胞表面的无唾液酸糖蛋白受体（ASGPr）是一高效内吞受体,具有高度的组织特异性、高亲和力和高容量的特点,这使得以无唾液酸蛋白受体介导的肝靶向给药系统有望成为可用于临床的肝靶向给药系统。而脂质体作为靶向药物和基因转移的载体,具有良好的生物兼容性、可降解性、无抗原性及多功能性,因而倍受人们的青睐。鉴于此,为了构建具有肝靶向传递作用的稳定的给药系统,我们以具有肝细胞特异性的ASGPr为靶标,设计了三类新型半乳糖脂作为靶头,脂质体作为药物载体,从而构建半乳糖簇-脂质体-抗癌药物组成的主动的肝靶向载药系统。本文以半乳糖、胆固醇、氨基酸等为初始原料,经过乙酰基保护与脱保护,糖苷化,缩合以及催化氢化等一系列反应可得到半乳糖合成子6a、4b和6c,同时胆固醇与丁二酸酐反应得到CHS （8）。之后在DCC/NHS或者DIPEA、HOBT、HBTU的催化下,半乳糖合成子与CHS缩合可得到半乳糖-胆固醇偶联物TM 13。并通过IR、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HSQC以及MS对其进行了结构确定;而对于三分支糖脂的合成,由于实验过程中多肽的酯水解时,肽键发生断裂,未得到三分支糖脂。但从活性数据可以看出:一、二分支糖脂肝靶向性效果比较理想,静脉注射30 min后,相对于普通脂质体中的阿霉素,单、双靶头脂质体中的阿霉素在血液中迅速降低,相反在肝脏中的累积则迅速增加,普通脂质体的肝累积仅有23.38%,而单、双靶头修饰的脂质体分别为41.67%、66.43%;并且它们合成更加简便快捷,因此较三分支糖脂更具实用性。另一方面,由于Cu（I）-介导的1,3-偶极环加成反应具有区域选择性、产率高以及反应条件温和的特点,因此最近几年该反应被广泛用来合成寡糖和糖缀合物,但由于异头叠氮的位阻较大,在一些糖缀合物的合成中产率并不是很理想。本文我们发展了新的合成策略,将糖基配体连接到氨基酸、芳环以及杂环化合物中,合成了八种糖肽、皂苷等类似物。通过引入连接臂,减少了空间位阻,使反应产率大大提高（≥85%）;并且除了g10a的合成外,大部分反应的选择性也比较高。因此,该法可用作糖缀合物的新的合成策略。本论文并对所合成的化合物分别做了IR、1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HSQC以及EA或MS,对目标化合物进行了结构表征;对两种中间产物的单晶还进行了X-射线单晶衍射分析。由于在g7a的合成中,采用加热回流和类似水热合成两种方法,方法一投料比大,浪费原料,且有副反应发生产率低;而采用方法二降低投料比的同时,高效的合成了g7a （87%）;同时,由于加热回流中的副产物g7a″的产量较大（41%）,我们对其进行了结构分析,发现了一个新型的杂环化合物,并对其反应历程进行了探讨。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 1 糖缀合物的研究进展
• 2 无唾液酸糖蛋白介导的肝靶向给药系统的研究现状
• 3 1,3-偶极环加成及点击化学
• 参考文献
• 第一章 半乳糖脂的设计与合成
• 1 立题依据
• 2 路线设计
• 3 实验部分
• 4 结果与讨论
• 5 小结
• 参考文献
• 第二章 半乳糖化脂质体的肝靶向研究
• 1 仪器与材料
• 2 实验方法
• 3 结果与讨论
• 4 小结
• 参考文献
• 第三章 利用“点击化学”的方法合成糖缀合物
• 1 立题依据
• 2 路线设计
• 3 实验部分
• 4 结果与讨论
• 5 小结
• 参考文献
• 结论
• 附录
• 致谢
• 攻读学位期间发表及待发表的学术论文目录