特异性抗前列腺癌多肽的原核表达及活性研究

论文摘要

肿瘤治疗过程中的大多数化疗药物缺乏对肿瘤组织的高选择性,并且在对肿瘤组织发挥作用的同时也对机体的正常组织产生毒副作用。因此,高特异性的导向基因治疗成为目前肿瘤治疗研究的重要课题之一。 前列腺癌是老年男性常见的恶性肿瘤之一,在美国占男性肿瘤发病率首位,随着人均寿命及饮食结构的改变,我国前列腺癌的发病率呈逐年上升的趋势。目前非手术治疗尚无一种较理想的方案,非常需要对其进行新的治疗方案的探索研究。近两年来,针对前列腺癌的PSA激活的前体药物疗法越来越受到关注。它利用PSA具有的肿瘤定位特异性及丝氨酸水解酶活性,设计最易被PSA特异性裂解的多肽,将其与化疗药物共价连接,当该多肽-化疗药物到达前列腺癌组织时,被PSA特异性水解,发挥化疗药物的杀伤肿瘤的作用。 在肿瘤的基因治疗策略中,Bcl-2凋亡调控家族的促凋亡蛋白的BH3作用域是促凋亡蛋白发挥抗肿瘤作用所必需,而且该结构域本身即具有诱导细胞凋亡的作用,在蛋白转导功能域（protein transduction domain,PTD）的引导下可直接进入肿瘤细胞,作用于线粒体,诱导细胞凋亡。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）、血管内皮生长因子

论文目录

• 目录
• 缩略语表
• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 文献回顾
• 一、Bcl-2家族蛋白调控细胞凋亡研究进展
• 二、蛋白转导技术及其在肿瘤基因治疗中的应用
• 三、前列腺癌靶向治疗研究进展
• 四、抗血管生成在肿瘤治疗中的应用
• 正文
• 第一部分 抗前列腺癌多肽APP216的设计及原核表达
• 引言
• 1 材料与力祛
• 1.1 实验材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 APP216的氨基酸序列和核苷酸序列
• 2.2 原核表达载体pGEX 4T-2-APP216的酶切鉴定
• 2.3 pGEX 4T-2-APP216的DNA测序结果
• 2.4 PCR进行定点突变
• 2.5 定点突变后原核表达载体pGEX 4T-2-APP216的酶切鉴定
• 2.6 定点突变后pGEX 4T-2-APP216的DNA测序结果
• 2.7 SDS-PAGE电泳鉴定
• 3 讨论
• 第二部分 抗前列腺癌多肽APP216的活性分析
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 GST-APP216蛋白诱导表达条件的探索
• 2.2 APP216蛋白的纯化
• 2.3 体外细胞毒性试验
• 2.4 体内细胞毒性试验
• 3 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历与研究成果
• 致谢