藜蒿离体培养与试管苗分泌结构的研究

论文摘要

藜蒿（Artemisia selengensis）为菊科蒿属多年生草本植物,也是该属唯一的多年生水生草本植物。分布于东北、华北、华中和西南等省区,江西鄱阳湖和湖南洞庭湖区是主产区。特别是八十年代以后,形成了采食与开发的热潮。藜蒿嫩茎不仅味正香脆,还含有丰富的营养成分,被视为宴中佳品。此外,它还可以入药。它是大自然赐予人类的一种宝贵的植物资源。为了使藜蒿得到良好的保护和可持续发展的开发利用,需要为藜蒿种质保存、新种质的培育及其产业化提供一个基础性技术平台。此外,藜蒿具有特殊香味的挥发油与分泌结构密切相关。本文从云南产藜蒿离体培养入手,建立离体培养再生体系,并研究试管苗的分泌结构发生与发育,以填补藜蒿分泌结构无研究报道的空白。主要研究结果如下:1.建立了以云南产藜蒿为供试材料的离体培养再生体系。云南产藜蒿的细胞全能性表达能力强,MS+BA1mg·L-1+2.4-D4mg·L-1培养基适宜于它的致密胚性愈伤组织的诱导;MS+BA1mg·L-1+NAA0.4mg·L-1培养基适宜丛芽分化和增殖;1/2MS+NAA0.5mg·L-1+IAA0.5mg·L-1培养基适宜试管苗生根及根状茎的形成。2.云南产藜蒿外植体不同,所诱导出的愈伤组织在颜色、质地上普遍存在差异。嫩茎的愈伤组织一般为浅黄绿色的胚性愈伤组织;幼叶的愈伤组织有深绿色、淡紫色、紫红色等。愈伤组织的多样性为藜蒿体细胞无性系变异的筛选提供了良好的基础。3.细胞组织学观察,表明愈伤组织脱分化与不同外值体有差异,并发现嫩茎愈伤组织的有两种来源。第一种是由表皮及以下多处皮层薄壁细胞脱分化而产生;第二种,是由切口处维管组织周围基本组织的薄壁细胞脱分化产生。幼叶愈伤组织主要来自部分叶肉细胞脱分化产生分生细胞,从叶缘到整个外植体都为愈伤组织所包被。与此同时,相当一部分叶肉细胞原生质体自溶,细胞壁加厚成为管状分子,这是叶肉细胞分化的标志性特征。藜蒿幼嫩愈伤组织在结构以胚性细胞、胚性细胞团及分生组织结节的出现,但胚性细胞仍然为主,因而藜蒿愈伤组织继代能力比较强。藜蒿愈伤组织芽分化为外起源。试管苗生根培养,根原基发生于皮层的髓射线处,由薄壁细胞脱分化产生分生细胞形成根原基,属内起源。4.藜蒿试管苗有分泌腔和分泌腺两种分泌结构,为人工条件下系统研究植物分泌结构与发育提供了新途径。藜蒿分泌腔分布在茎和根状茎皮层内,为裂生分泌腔。它是由排列紧密的一团细胞,彼此间的中层溶解消失,细胞互相分离并向外推移,形成一个球形囊腔,在腔内由一层具有分泌能力的上皮细胞围绕。藜蒿试管苗茎和表面分泌着两种分泌腺。一种为腺毛状分泌腺,由10个细胞构成,2个基细胞,2个柄细胞,6个腺毛状细胞,排成2列,成熟时为扇形囊状;另一种为非腺毛状,由管状腺细胞构成。对腺毛状分泌腺发育过程中的系统观察中发现,腺毛状分泌腺存在多样性,除二列排列外,有单列和三列排列的。二列排列的腺毛状细胞有的超过10个,单列排列的细胞如何发育还有待研究。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 文献综述
• 1 黎蒿研究现状
• 2 黎蒿的生物学特性研究
• 2.1 黎蒿的植物学特性
• 2.2 黎蒿的生长习性
• 2.3 黎蒿的应用价值
• 3 黎蒿组织培养的研究
• 4 研究目的意义与研究内容
• 第二章 黎蒿离体培养再生体系的建立
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 主要仪器
• 1.3 试剂、药品
• 1.4 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 不同消毒试剂和消毒时间对外植体灭菌效果的影响
• 2.2 不同植物生长调节剂浓度及组合对云南黎蒿愈伤组织诱导的影响
• 2.3 不同植物生长调节剂浓度及组合对芽分化及增殖的影响
• 2.4 不同培养基与植物生长调节剂浓度对黎蒿试管苗生根的影响
• 2.5 移栽的黎蒿试管苗成活率统计
• 3 讨论
• 3.1 不同消毒方式对外植体的影响
• 3.2 不同外植体对愈伤组织诱导的影响
• 3.3 不同季节对愈伤组织诱导的影响
• 3.4 不同植物生长调节剂对外植体的影响
• 3.5 关于愈伤组织褐化现象的阻遏
• 3.6 试管苗腋芽增殖有可能是解决黎蒿快速繁殖的重要有效途径
• 第三章 黎蒿离体培养的细胞组织学观察
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 主要试验仪器
• 1.3 试验药品、药品
• 1.4 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 黎蒿外植体脱分化的细胞组织学研究
• 2.2 黎蒿愈伤组织的形态解剖学观察
• 2.3 愈伤组织芽分化的细胞组织学观察
• 2.4 黎蒿试管无根苗生根培养的解剖学观察
• 3 讨论
• 3.1 愈伤组织脱分化和再分化的重要性
• 3.2 脱分化过程中管状分子在维管系统的形成中具有中心作用
• 第四章 黎蒿试管苗分泌结构的初步观察
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 主要仪器
• 1.3 试验药品、试剂
• 1.4 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 云南产黎蒿试管苗的茎和根状茎分泌囊观察
• 2.2 云南产黎蒿试管苗嫩枝、幼叶表面分布着分泌腺
• 3 讨论
• 3.1 云南产黎蒿分泌结构的类型及腺毛状分泌腺的多样性
• 3.2 从天然产物的开发利用出发，需进一步加强分泌结构的研究
• 全文小结与创新点
• 1 全文小结
• 2 创新点
• 参考文献
• 英文缩略词表
• 致谢
• 作者简历