论文摘要
目的:通过苯乙酸（phenylacetate , PA）分别联合化疗药物5-氟尿嘧啶（5-Fu）、顺铂（CDDP）作用于人喉癌细胞株（Hep-2细胞）,研究苯乙酸联合化疗药物对喉癌细胞凋亡的影响,同时检测Bax蛋白表达,初步探讨苯乙酸联合化疗药物促喉癌细胞凋亡的可能机制。方法:体外培养Hep-2细胞,将PA、5-Fu、CDDP及PA分别联合5-Fu、CDDP,5组药物作用于Hep-2细胞24小时,以无用药Hep-2细胞做为对照组,进行吖啶橙染色,分别检测喉癌细胞凋亡百分率,通过Bax免疫组织化学染色,观察PA联合5-Fu、CDDP作用的喉癌Hep-2细胞中Bax的表达。结果:1.吖啶橙染色:对照组:镜下可见均匀绿色荧光的喉癌细胞,偶见黄绿色凋亡细胞,细胞凋亡百分率为（0.79±0.09）%。5-Fu组:可见大量绿色荧光的喉癌细胞,和散在其中较少的黄绿色凋亡细胞,细胞凋亡百分率为（3.47±0.87）%。CDDP、PA组:镜下以绿色荧光的喉癌细胞为主,但黄绿的的凋亡细胞明显增多,且凋亡细胞数量多于5-Fu组,细胞凋亡百分率分别为（7.25±1.07）%和（9.70±1.42）%。PA+5-Fu,PA+CDDP组:吖啶橙染色显示较多的凋亡细胞,细胞呈致密浓染颗粒线块状黄绿色荧光,细胞凋亡百分率分别为（14.74±1.39）%和（20.51±1.61）%,说明PA联合5-Fu、CDDP对Hep-2细胞具有促细胞凋亡的作用。统计显示:单一用药组及联合用药组与对照组相比,细胞凋亡百分率明显高于对照组（P<0.05）,联合用药组与单一用药组相比,细胞凋亡百分率高于单一用药组（P<0.05）,具有统计学意义。2.免疫组织化学染色:Bax蛋白在对照组Hep-2细胞中为阴性表达;在单一用药组（5-Fu、PA组、CDDP组）Hep-2细胞中为阳性表达;而在联合用药组（PA+CDDP、PA+5-Fu）的Hep-2细胞中为强阳性表达。统计学显示:单一用药组及联合用药组与对照组相比,Bax蛋白表达水平明显高于对照组（P<0.05）,联合用药组与单一用药组相比,Bax蛋白表达水平明显高于单一用药组（P<0.05）,具有统计学意义。结论:1、PA联合5-Fu、CDDP对喉癌细胞的作用与单一化疗药物组比,具有明显促进细胞凋亡的作用。2、PA联合CDDP、5-Fu抗喉癌细胞的机制与凋亡有关。3、PA联合5-Fu、CDDP促进Hep-2细胞凋亡的机制可能与促进促凋亡基因Bax蛋白的表达有关。