胎衣不下奶牛血清离子、抗氧化指标及激素的变化

胎衣不下奶牛血清离子、抗氧化指标及激素的变化

论文摘要

为了研究奶牛胎衣不下(Retention of fetal membranes, RFM)的发生机制,颈静脉采取产奶量和饲养状况近似的胎衣正常排出牛和RFM牛血液。对RFM及胎衣正常排出奶牛分娩时和分娩后12小时血清中的常量、微量元素利用原子吸收分光光度计进行检测;对血清P、血清及胎盘组织抗氧化指标利用可见分光光度进行了检测;对血清中的雌激素、孕酮和皮质醇利用放射免疫法进行检测。目的是找出其中的相关性,对奶牛胎衣不下机理进行初步探索。1、对比分析颈静脉血清中常量元素钾(K)、钠(Na)、钙(Ca)、镁(Mg)和磷(P)的含量。结果显示:分娩时和分娩后12h RFM组血清中的Ca、P和Mg显著低于正常排出组(P<0.05);Na、K的含量差异不显著.胎衣正常排出组分娩时K、Na、Ca、P和Mg血清浓度较分娩后12h低,但是差异不显著,RFM组K、Na血清浓度分娩时较分娩后12h高,但是Ca、P和Mg的含量反而升高差异均不显著。2、对比分析颈静脉血清中微量元素铜(Cu)、铁(Fe)、锌(Zn)和锰(Mn)含量。结果显示:RFM组的Mn、Zn和Cu含量极显著低于正常组(P<0.01),但是RFM组Fe血清含量要极显著高于正常组(P<0.01)。胎衣正常排出组和RFM组分娩时Fe、Zn、Mn血清浓度都较分娩后12h低,但是差异不明显,虽然Cu的含量升高但差异不显著。试验结果表明:胎衣不下奶牛血清中的微量元素出现紊乱。3、对比分析血清中总超氧化物歧化酶(Total SOD)、铜锌-超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn–SOD)谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,分析血清中丙二醛(MDA),羟自由基(OH·)的含量。结果显示RFM奶牛血清中抗氧化酶CuZn-SOD、Mn-SOD及总SOD和GSH-Px的活性极显著低于正常组(P<0.01),而MDA与OH·的含量显著高于正常组(P<0.05)。实验结果表明:奶牛机体处于高度的氧化应激状态。4、测定胎盘组织中总超氧化物歧化酶(Total SOD)、铜锌-超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn–SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,分析胎盘组织中丙二醛(MDA),羟自由基(OH·)的含量。结果显示RFM奶牛胎盘组织中抗氧化酶CuZn-SOD、Mn–SOD及总SOD和GSH-Px的活性极显著低于正常组(P<0.01),而MDA与OH·的含量显著高于正常组(P<0.05)。实验结果表明:胎盘组织本身抗氧化能力差,抗氧化系统已经不能有效地清除活性氧及代谢产物,以至于过多的氧自由基对胎盘上皮造成了损伤,从而引起胎衣不下。5、血清中孕酮(P4)、雌激素(E2)和皮质醇(Cort)测定结果显示:RFM组和胎衣正常排出组P4分娩12小时比较分娩时都有所上升,但是差异均不显著;P4含量在胎衣正常排出组和RFM组差异不显著;胎衣不下组E2分娩时有较高的水平(p<0.01),但是在分娩后12h内急剧下降,因此E2是处于一个较低的水平的。皮质醇在分娩时较分娩后12小时低但差异不显著。RFM组Cort在分娩时及分娩12小时较对照组差异极显著(p<0.01)。实验结果表明:胎衣不下奶牛机体内激素紊乱,较低水平E2抑制胎盘突内血管收缩,也增加胎衣排出的难度。同时高度的应激状态会导致心率加快,从而导致心脏泵血增加,静脉回流减少,造成外周血液蓄积,也会造成胎盘突出现淤血,成为增加RFM的发生率的原因之一。

论文目录

  • 符号说明
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 引言
  • 1. 胎衣不下概况
  • 1.1 胎衣不下的发病及治疗
  • 1.1.1 奶牛胎衣不下的病因分析
  • 1.1.2 奶牛胎衣不下临床症状及诊断
  • 1.1.3 胎衣不下的预防措施
  • 1.1.4 胎衣不下的治疗
  • 1.2 胎衣不下的病理机制
  • 2. 应激、氧化应激及氧自由基概述
  • 2.1 应激的机制
  • 2.2 应激的诊断
  • 2.3 氧化应激
  • 2.4 微量元素与氧自由基代谢
  • 3 本课题研究的目的和意义
  • 1. 材料与方法
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 样品采集及处理
  • 1.2.1 血液样品采集及处理
  • 1.2.2 组织样品处理
  • 2. 试剂、仪器及方法
  • 2.1 主要仪器
  • 2.2 主要试剂
  • 2.3 金属粒子检测项目及方法
  • 2.3.1 血清中 Ca 含量的测定
  • 2.3.2 血清中 Mg 含量的测定
  • 2.3.3 血清中 Na 含量的测定
  • 2.3.4 血清中 K 含量的测定
  • 2.3.5 血清中 Zn 含量的测定
  • 2.3.6 血清中 Mn 含量的测定
  • 2.3.7 血清中 Fe 含量的测定
  • 2.3.8 血清中 Cu 含量的测定
  • 2.4 血清中无机磷的测定
  • 2.5 胎盘组织中蛋白质含量的测定
  • 2.6 血清及组织中抗氧化指标检测方法
  • 2.6.1 血清中及胎盘组织中总超氧化物歧化酶(T—SOD)活性的测定
  • 2.6.2 抽提法测 CuZn—SOD
  • 2.7 血清中及组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px )活性的测定
  • 2.7.1 血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的测定
  • 2.7.2 组织中GSH-PX 活力的测定
  • 2.8 血清及组织中丙二醛(MDA)的测定
  • 2.9 血清及组织中羟自由基测定
  • 3 激素水平的测定
  • 3.1 血浆中雌二醇检测
  • 3.2 数据分析与处理
  • 3.3 血清中皮质醇(Cort)的测定
  • 3.4 血浆中孕酮水平的测定
  • 3.5 数据处理方法
  • 4 实验结果
  • 4.1 血清中 Zn、Cu、Mn 和 Fe 含量
  • 4.2 血清中 Ca、Mg、Na 和 K 含量
  • 4.3 分娩时RFM 组和胎衣正常排出组奶牛血清中抗氧化指标变化
  • 4.4 胎盘组织中抗氧化指标
  • 4.5 分娩时和分娩后12h胎衣不下与正常排出的奶牛血清激素水平比较
  • 5 讨论和结论
  • 5.1 胎衣不下牛血清 Na、K 与氧化应激的关系
  • 5.2 胎衣不下牛血清Zn 与氧化应激的关系
  • 5.3 胎衣不下牛血清Fe 与氧化应激的关系
  • 5.4 胎衣不下牛血清Cu 与氧化应激的关系
  • 5.5 胎衣不下牛血清 Mn 与氧化应激的关系
  • 5.6 胎衣不下牛氧化应激与能量的关系
  • 5.7 胎衣不下牛血清钙、镁与氧化应激的关系
  • 5.8 胎衣不下奶牛血清激素水平变化
  • 6. 小结
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读硕士期间发表文章
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