本文主要研究内容
作者王玉洁（2019）在《H5N1和H1N1亚型流感病毒致病差异机制探索研究》一文中研究指出：甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是人群当中季节性流感流行和偶发的大流行的主要病原体,拥有广泛的宿主范围和变异程度,能够感染种类繁多的鸟类和哺乳动物,给人类社会带来严重危害。甲型流感病毒(IAV)是正黏科病毒(Orthomyxoviridae),基因组由八条单义负链RNA组成,编码包括核蛋白(Nucleoprotein,NP)、神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)、血凝素(Hemagglutinin,HA)在内的十多种蛋白。根据其表面糖蛋白HA和NA的抗原特异性,甲型流感病毒可以进一步分成多种亚型。甲型流感病毒的不同亚型在感染人体后引起不同的致病表现型。当病毒入侵宿主后,病毒蛋白会和宿主蛋白相互作用操纵宿主信号通路以利于自身复制和生存。在宿主众多的信号通路中,NF-κB信号通路是比较重要的抗病毒信号通路。当病原微生物入侵人体时,病原微生物的毒力蛋白或者遗传物质充当配体与细胞表面的受体相结合,通过一系列的接头蛋白将信号传递给IKK复合物,被活化的IKK复合物会激活IκB,使IκB泛素化降解,然后与核因子κB解离。核因子进入细胞核,结合相关基因,促进基因转录,使宿主细胞表达出抗病毒的细胞因子,以此实现抗病毒的效果。NF-κB信号通路存在于几乎所有的动物细胞中,是信号通路研究领域的热点问题。病毒蛋白和宿主蛋白之间的直接相互作用为流感病毒入侵宿主引起复杂的病理状况提供了基础。甲型流感病毒的不同亚型在感染人体后引起不同的致病表现型是因为不同亚型的流感病毒与宿主信号通路的关系不同,即不同流感病毒的不同蛋白和人体信号通路相互作用产生不同的生理效应。我们设计实验来探索流感病毒蛋白和NF-κB信号通路关系以及相互作用位点的差异来验证我们的猜想。在我们的实验中,我们选取了H5N1和H1N1亚型流感病毒的两组蛋白神经氨酸酶NA和核蛋白NP,通过双荧光素酶报告基因实验确定病毒蛋白和NF-κB信号通路的关系以及病毒蛋白影响NF-κB信号通路的可能位点,随后我们利用免疫共沉淀实验确定病毒蛋白影响NF-κB信号通路的具体位点。具体实验结果如下:1、H5N1和H1N1亚型流感病毒的NP蛋白和NF-κB信号通路的关系存在差异H5N1亚型流感病毒的NP蛋白抑制NF-κB信号通路,作用位点在TAK1与IKKα处。H5N1亚型流感病毒的NP蛋白抑制TN F-α介导的NF-κB-1uc转录活性;免疫印迹实验结果显示H5N1亚型流感病毒的NP蛋白增加IκBα的蛋白表达水平,抑制IκBα的磷酸化;免疫荧光实验显示H5N1亚型流感病毒的NP蛋白抑制p65蛋白入核,以上结果说明H5N1亚型流感病毒的NP蛋白抑制NF-κB信号通路。H5N1亚型流感病毒的NP蛋白抑制TAK复合物和IKKα蛋白介导的NF-κB-1uc转录活性,与TAK1以及IKKα 具有相互作用且抑制IKKα的磷酸化,说明H15N1亚型流感病毒的NP蛋白抑制NF-κB信号通路的作用位点在TAK1与IKKα处。H1N1亚型流感病毒的NP蛋白对NF-κB信号通路没有影响。H1N1亚型流感病毒的NP蛋白不影响TNF-α介导的NF-κB-Iuc转录活性,对IκBα的蛋白表达水平和IκBα的磷酸化以及p65蛋白的核转位没有影响说明H1N1亚型流感病毒的NP蛋白对NF-κB信号通路没有影响。2、H5N1和H1N1亚型流感病毒的NA蛋白和NF-κB信号通路的关系也存在差异H5N1亚型流感病毒的NA蛋白激活NF-κB 号通路,作用位点在TAB2处。H5N1亚型流感病毒的NA蛋白上调IL-1β介导的NF-κB-1uc转录活性,说明H5N1亚型流感病毒的NA蛋白激活NF-κB信号通路。H5N1亚型流感病毒的NA蛋白增强TAK复合物介导的NF-κB-Iuc转录活性,与TAB2蛋白具有直接相互作用,说明H5N1亚型流感病毒的NA蛋白激活NF-κB信号通路的作用位点在TAB2处。H1N1亚型流感病毒的NA蛋白抑制NF-κB信号通路,作用位点在IKKβ处。H1N1亚型流感病毒的NA蛋白抑制IL-1β介导的NF-κB-Iuc转录活性说明H1N1亚型流感病毒的NA蛋白抑制NF-κB信号通路。H1N1亚型流感病毒的NA蛋白抑制TAB2和IKKβ介导的NF-κB-Iuc转录活性,与IKKβ具有直接相互作用,说明H1N1亚型流感病毒的NA蛋白抑制NF-κB信号通路的作用位点在IKKβ处。结果一和结果二的对比,验证了我们的猜想不同流感病毒的不同蛋白和人体信号通路相互作用产生不同的生理效应,即流感病毒和宿主蛋白相互作用具有亚型特异性特征,其可响应不同亚型的流感病毒的特定致病机制。对实验结果的分析也表明流感病毒的不同亚型可以影响NF-κB信号通路是否抗病毒以及抗病毒的能力。
Abstract
jia xing liu gan bing du (Influenza A virus,IAV)shi ren qun dang zhong ji jie xing liu gan liu hang he ou fa de da liu hang de zhu yao bing yuan ti ,yong you an fan de su zhu fan wei he bian yi cheng du ,neng gou gan ran chong lei fan duo de diao lei he bu ru dong wu ,gei ren lei she hui dai lai yan chong wei hai 。jia xing liu gan bing du (IAV)shi zheng nian ke bing du (Orthomyxoviridae),ji yin zu you ba tiao chan yi fu lian RNAzu cheng ,bian ma bao gua he dan bai (Nucleoprotein,NP)、shen jing an suan mei (Neuraminidase,NA)、xie ning su (Hemagglutinin,HA)zai nei de shi duo chong dan bai 。gen ju ji biao mian tang dan bai HAhe NAde kang yuan te yi xing ,jia xing liu gan bing du ke yi jin yi bu fen cheng duo chong ya xing 。jia xing liu gan bing du de bu tong ya xing zai gan ran ren ti hou yin qi bu tong de zhi bing biao xian xing 。dang bing du ru qin su zhu hou ,bing du dan bai hui he su zhu dan bai xiang hu zuo yong cao zong su zhu xin hao tong lu yi li yu zi shen fu zhi he sheng cun 。zai su zhu zhong duo de xin hao tong lu zhong ,NF-κBxin hao tong lu shi bi jiao chong yao de kang bing du xin hao tong lu 。dang bing yuan wei sheng wu ru qin ren ti shi ,bing yuan wei sheng wu de du li dan bai huo zhe wei chuan wu zhi chong dang pei ti yu xi bao biao mian de shou ti xiang jie ge ,tong guo yi ji lie de jie tou dan bai jiang xin hao chuan di gei IKKfu ge wu ,bei huo hua de IKKfu ge wu hui ji huo IκB,shi IκBfan su hua jiang jie ,ran hou yu he yin zi κBjie li 。he yin zi jin ru xi bao he ,jie ge xiang guan ji yin ,cu jin ji yin zhuai lu ,shi su zhu xi bao biao da chu kang bing du de xi bao yin zi ,yi ci shi xian kang bing du de xiao guo 。NF-κBxin hao tong lu cun zai yu ji hu suo you de dong wu xi bao zhong ,shi xin hao tong lu yan jiu ling yu de re dian wen ti 。bing du dan bai he su zhu dan bai zhi jian de zhi jie xiang hu zuo yong wei liu gan bing du ru qin su zhu yin qi fu za de bing li zhuang kuang di gong le ji chu 。jia xing liu gan bing du de bu tong ya xing zai gan ran ren ti hou yin qi bu tong de zhi bing biao xian xing shi yin wei bu tong ya xing de liu gan bing du yu su zhu xin hao tong lu de guan ji bu tong ,ji bu tong liu gan bing du de bu tong dan bai he ren ti xin hao tong lu xiang hu zuo yong chan sheng bu tong de sheng li xiao ying 。wo men she ji shi yan lai tan suo liu gan bing du dan bai he NF-κBxin hao tong lu guan ji yi ji xiang hu zuo yong wei dian de cha yi lai yan zheng wo men de cai xiang 。zai wo men de shi yan zhong ,wo men shua qu le H5N1he H1N1ya xing liu gan bing du de liang zu dan bai shen jing an suan mei NAhe he dan bai NP,tong guo shuang ying guang su mei bao gao ji yin shi yan que ding bing du dan bai he NF-κBxin hao tong lu de guan ji yi ji bing du dan bai ying xiang NF-κBxin hao tong lu de ke neng wei dian ,sui hou wo men li yong mian yi gong chen dian shi yan que ding bing du dan bai ying xiang NF-κBxin hao tong lu de ju ti wei dian 。ju ti shi yan jie guo ru xia :1、H5N1he H1N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai he NF-κBxin hao tong lu de guan ji cun zai cha yi H5N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai yi zhi NF-κBxin hao tong lu ,zuo yong wei dian zai TAK1yu IKKαchu 。H5N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai yi zhi TN F-αjie dao de NF-κB-1uczhuai lu huo xing ;mian yi yin ji shi yan jie guo xian shi H5N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai zeng jia IκBαde dan bai biao da shui ping ,yi zhi IκBαde lin suan hua ;mian yi ying guang shi yan xian shi H5N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai yi zhi p65dan bai ru he ,yi shang jie guo shui ming H5N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai yi zhi NF-κBxin hao tong lu 。H5N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai yi zhi TAKfu ge wu he IKKαdan bai jie dao de NF-κB-1uczhuai lu huo xing ,yu TAK1yi ji IKKα ju you xiang hu zuo yong ju yi zhi IKKαde lin suan hua ,shui ming H15N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai yi zhi NF-κBxin hao tong lu de zuo yong wei dian zai TAK1yu IKKαchu 。H1N1ya xing liu gan bing du de NPdan bai dui NF-κBxin hao tong lu mei you ying xiang 。H1N1ya 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li 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自安徽大学的王玉洁，发表于刊物安徽大学2019-07-03论文，是一篇关于流感病毒论文,神经氨酸酶论文,核蛋白论文,信号通路论文,相互作用论文,安徽大学2019-07-03论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自安徽大学2019-07-03论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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