王春:上转发光免疫层析试纸条快速检测猪旋毛虫方法建立论文

王春:上转发光免疫层析试纸条快速检测猪旋毛虫方法建立论文

本文主要研究内容

作者王春(2019)在《上转发光免疫层析试纸条快速检测猪旋毛虫方法建立》一文中研究指出:旋毛虫病是由旋毛虫引起的人兽共患疾病,呈世界性分布。猪是旋毛虫主要宿主之一,生食或半生食感染旋毛虫的猪肉及其产品是人类感染旋毛虫的主要方式,旋毛虫病严重威胁人类健康和公共安全。目前旋毛虫检测方法无法满足现场快速检测旋毛虫病的要求。因此,开发适用于现场的高效、灵敏的旋毛虫检测方法,能有效地缩短旋毛虫的检验时间,并为旋毛虫病的诊断和检测提供强有力的技术支持。本研究基于上转发光免疫层析(up-converting phosphor technology-based lateral flow assay,UPT-LF)技术快速检测猪旋毛虫。通过抗原和检测模式筛选、层析条件优化,确定间接法制备试纸条。将山羊抗猪IgG与示踪物上转发光颗粒(up-converting phosphor particle,UCP)共价偶联,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因(WM5)表达的蛋白WM5(2 mg/mL)与兔抗山羊IgG(0.5 mg/mL)喷点于分析膜上作为检测带(T)与质控带(C),并命名该试纸条为Tsp-UPT-LF。通过进一步优化确定Tsp-UPT-LF最佳血清稀释倍数(5倍)、最优样品处理液(0.03 mol/L的PB内含有0.5%NP-40,0.1 mol/L NaCl,1%BSA)。通过对95份阴性血清的检测,确定Tsp-UPT-LF的Cutoff值为0.099。猪囊虫、华支睾吸虫感染后的猪血清测试结果显示Tsp-UPT-LF的特异性良好。对273份猪血清样本进行检测,Tsp-UPT-LF和ELISA的总符合率为92.31%,一致性系数Kappa(K)值为0.837,表明两种方法具有高度一致性。Tsp-UPT-LF检测感染五万条旋毛虫肌幼虫猪血清,结果显示感染第28 d为阳性(T/C值0.109),第122 d阳性最强(T/C值为0.207),至第425 d时阳性值有所下降,抗旋毛虫IgG阳性率为71.4%。本研究建立的基于UPT-LF技术检测猪旋毛虫的方法,通过对血清样本检测表明该方法操作简便并具有良好的特异性、耗时短(整个检测过程在20 min内完成),为猪旋毛虫的即时检测(point-of-care testing,POCT)和保障食品安全提供了新的检测方法参考。

Abstract

xuan mao chong bing shi you xuan mao chong yin qi de ren shou gong huan ji bing ,cheng shi jie xing fen bu 。zhu shi xuan mao chong zhu yao su zhu zhi yi ,sheng shi huo ban sheng shi gan ran xuan mao chong de zhu rou ji ji chan pin shi ren lei gan ran xuan mao chong de zhu yao fang shi ,xuan mao chong bing yan chong wei xie ren lei jian kang he gong gong an quan 。mu qian xuan mao chong jian ce fang fa mo fa man zu xian chang kuai su jian ce xuan mao chong bing de yao qiu 。yin ci ,kai fa kuo yong yu xian chang de gao xiao 、ling min de xuan mao chong jian ce fang fa ,neng you xiao de su duan xuan mao chong de jian yan shi jian ,bing wei xuan mao chong bing de zhen duan he jian ce di gong jiang you li de ji shu zhi chi 。ben yan jiu ji yu shang zhuai fa guang mian yi ceng xi (up-converting phosphor technology-based lateral flow assay,UPT-LF)ji shu kuai su jian ce zhu xuan mao chong 。tong guo kang yuan he jian ce mo shi shai shua 、ceng xi tiao jian you hua ,que ding jian jie fa zhi bei shi zhi tiao 。jiang shan yang kang zhu IgGyu shi zong wu shang zhuai fa guang ke li (up-converting phosphor particle,UCP)gong jia ou lian ,yi xuan mao chong ji you chong si an suan dan bai mei yi zhi yin zi ji yin (WM5)biao da de dan bai WM5(2 mg/mL)yu tu kang shan yang IgG(0.5 mg/mL)pen dian yu fen xi mo shang zuo wei jian ce dai (T)yu zhi kong dai (C),bing ming ming gai shi zhi tiao wei Tsp-UPT-LF。tong guo jin yi bu you hua que ding Tsp-UPT-LFzui jia xie qing xi shi bei shu (5bei )、zui you yang pin chu li ye (0.03 mol/Lde PBnei han you 0.5%NP-40,0.1 mol/L NaCl,1%BSA)。tong guo dui 95fen yin xing xie qing de jian ce ,que ding Tsp-UPT-LFde Cutoffzhi wei 0.099。zhu nang chong 、hua zhi gao xi chong gan ran hou de zhu xie qing ce shi jie guo xian shi Tsp-UPT-LFde te yi xing liang hao 。dui 273fen zhu xie qing yang ben jin hang jian ce ,Tsp-UPT-LFhe ELISAde zong fu ge lv wei 92.31%,yi zhi xing ji shu Kappa(K)zhi wei 0.837,biao ming liang chong fang fa ju you gao du yi zhi xing 。Tsp-UPT-LFjian ce gan ran wu mo tiao xuan mao chong ji you chong zhu xie qing ,jie guo xian shi gan ran di 28 dwei yang xing (T/Czhi 0.109),di 122 dyang xing zui jiang (T/Czhi wei 0.207),zhi di 425 dshi yang xing zhi you suo xia jiang ,kang xuan mao chong IgGyang xing lv wei 71.4%。ben yan jiu jian li de ji yu UPT-LFji shu jian ce zhu xuan mao chong de fang fa ,tong guo dui xie qing yang ben jian ce biao ming gai fang fa cao zuo jian bian bing ju you liang hao de te yi xing 、hao shi duan (zheng ge jian ce guo cheng zai 20 minnei wan cheng ),wei zhu xuan mao chong de ji shi jian ce (point-of-care testing,POCT)he bao zhang shi pin an quan di gong le xin de jian ce fang fa can kao 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自吉林大学的王春,发表于刊物吉林大学2019-06-25论文,是一篇关于上转发光技术论文,免疫层析论文,旋毛虫论文,即时检测论文,食品安全论文,吉林大学2019-06-25论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自吉林大学2019-06-25论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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