高效液相色谱法测定大豆异黄酮的方法研究

论文摘要

异黄酮是黄酮类化合物中的一种,主要存在于豆科植物中,大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次级代谢产物。由于是从植物中提取,与雌激素有相似结构,因此称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性,是天然的癌症化学预防剂。益生大豆异黄酮是从非转基因大豆精制而成的生物活性物质,是一种具有多种重要生理活性的天然营养因子,是纯天然的植物雌激素,容易被人体吸收,能迅速补充营养。本研究建立了高效液相色谱法（HPLC）同时测定大豆异黄酮五种组分大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷、黄豆黄素的测定方法。实验考察了不同流动相体系、流动相配比、柱温、流速、进样量等因素对分离的影响,确定了最佳色谱条件:ZORBAXSB-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;二极管阵列检测器,检测波长为255 nm;色谱柱温度20℃,流速:1.0 mL/min,进样体积:5μL。在最佳色谱条件下,建立了各物质的标准曲线,相关系数r为0.9996～0.9999;样品的加标回收率均在83.0～100.6%,方法相对标准偏差在3.0%以内,实现了30 min内对5种化合物的同时测定。研究结果表明,本实验所建立的测定大豆异黄酮五种组分大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素的高效液相色谱法,具有操作简单,快速、准确、重现性好、检出限低的特点。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 第1章 绪论
• 1.1 前言
• 1.2 大豆异黄酮的结构、组成与性能
• 1.2.1 大豆异黄酮的结构与组成
• 1.2.2 大豆异黄酮的性能
• 1.3 大豆异黄酮的分布与医学价值
• 1.3.1 大豆异黄酮的自然分布
• 1.3.2 大豆异黄酮的医学价值
• 1.4 大豆异黄酮的提取技术
• 1.5 国内外大豆异黄酮分析方法的研究进展
• 1.6 选题的目的及意义
• 第2章 方法原理
• 2.1 引言
• 2.2 反相键合液相色谱法分离机理
• 2.3 定性和定量依据
• 2.3.1 定性分析依据
• 2.3.2 定量分析依据
• 2.4 样品预处理方法
• 第3章 实验部分
• 3.1 仪器和试剂
• 3.1.1 所用仪器
• 3.1.2 试剂与标准品
• 3.2 色谱条件
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 样品预处理
• 3.3.2 仪器操作
• 第4章 结果与讨论
• 4.1 色谱柱及其操作参数的选择
• 4.2 流动相体系的选择
• 4.3 DAD检测波长的确定
• 4.4 梯度洗脱方式及洗脱程序的确定
• 4.5 柱温的选择
• 4.6 进样量的选择
• 4.7 最佳色谱条件
• 4.8 标准曲线
• 4.9 仪器精密度实验
• 4.10 检出限和定量限
• 4.11 样品前处理方法的确定
• 4.12 回收率实验
• 第5章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 已发表论文