胰腺癌中XIAP、XAF1基因表达及甲基化修饰的研究

论文摘要

胰腺癌（cancer of pancreas）是较常见的恶性肿瘤,其发病率约占全部恶性肿瘤的2%,为消化道系统中最为常见的恶性肿瘤之一。具有发病隐匿,早期诊断率低,恶性度高,预后及疗效差,病死率高等特点,其总体5年生存率小于5%。手术则是目前唯一的可能治愈胰腺癌的方法,但由于胰腺解剖及胰腺癌生物学特性等因素的影响,只有2.6-9%的患者可以获得根治性切除,但术后5年生存率仅达到15%-25%。恶性肿瘤的发生发展与细胞凋亡之间有密切的关系,凋亡蛋白抑制家族（Inhibitor of apoptosis protein, IAP）包括一系列的拮抗细胞凋亡因子,它们的共同特征是内源性的、具有显著的抑制细胞凋亡的作用,在机体的凋亡调控通路中处于核心位置。x连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP）作为IAP家族成员之一,是其中最有抑制活性的因子,它具有明显的抗细胞凋亡的作用,在多种肿瘤组织中呈高表达oXIAP相关因子1（XIAP associated factor-1,XAF1）是一个抑癌基因,是XIAP最强的抑制因子,在多种肿瘤组织中不表达或低表达。为了研究XIAP、XAF1蛋白在胰腺癌中的表达及二者的相互关系,应用免疫组织化学法检测XIAP、XAF1蛋白在胰腺癌组织、正常胰腺组织及胰腺良性疾病组织中的表达,探讨二者与胰腺癌发生、发展的关系及其临床意义,并用甲基化特异性聚合酶链反应（Methylation-specific PCR,MSP）法检测在三种组织中XAF1基因启动子甲基化改变,探讨XAF1甲基化与其蛋白表达之间的关系,为胰腺癌的生物学治疗提供理论依据。目的检测XIAP, XAF1蛋白在胰腺癌组织、胰腺良性疾病组织及正常胰腺组织中的表达,探讨二者与胰腺癌发生、发展的关系及其临床意义,同时检测三种组织中XAF1基因启动子甲基化情况,探讨XAF1甲基化与其蛋白表达之间的关系,为胰腺癌的诊治提供新的思路和药物治疗靶点,为胰腺癌的生物学治疗提供理论依据。方法通过免疫组化方法（SP法）对郑州大学第一附属医院2008年1月～2011年1月三年间48例胰腺癌组织、26例胰腺良性标本组织和15例正常胰腺组织中XIAP蛋白和XAF1蛋白的表达进行检测,观察XIAP和XAF1蛋白在胰腺癌、胰腺良性疾病及正常胰腺组织中的表达的差异及相关性。通过甲基化特异性聚合酶链反应法来检测三种组织中XAF1基因甲基化的情况,探讨XAF1甲基化与其蛋白表达之间的关系。结果1.XIAP蛋白在胰腺癌、胰岛良性病组织以及正常胰腺组织中都有表达,在胰腺癌组织、胰岛良性病组织、正常胰腺组织表达阳性率分别为79.2%（38/48）、34.6%（9/26）、27.8%（5/18）,在胰腺癌组织中呈显著高表达,与后两者比较均有显著性差别（P<0.05）。XIAP蛋白的表达与肿瘤病理分级有关（P<0.05）,与患者性别、年龄、肿瘤大小、发生部位、有无淋巴结转移及临床分期等无关（P>0.05）.2.XAF1蛋白在胰腺癌、胰岛良性病组织以及正常胰腺组织中都有表达,在胰腺癌组织、胰岛良性病组织、正常胰腺组织表达阳性率分别为52.1%（25/48）、84.6%（22/26）、88.9%（16/18）,在胰腺癌组织中呈显著低表达,与后两者比较均有显著性差异（P<0.05）；XAF1蛋白的表达与临床分期及肿瘤病理分级有关（P<0.05）,与患者性别、年龄、肿瘤大小、发生部位、有无淋巴结转移等无关（P>0.05）。3.在胰腺癌组织中,XIAP呈高表达,XAF1呈低表达,统计结果显示：二者呈负相关（r=-0.363,P<0.05）。4.XAF1基因在胰腺癌组织、胰腺良性疾病组织以及正常胰腺组织中甲基化的频率分别为31.3%（15/48）、7.7%（2/26）,0%（0/15）,XAF1甲基化频率在胰腺癌组织中显著增高,与后两组之间差异有统计学意（χ2=5.289,P=0.021,χ2=6.152,P=0.013）,后两者差异无显著性（χ2=1.213,P=0.271）.5.在胰腺癌组织中,XAF1蛋白表达与XAF1基因启动子甲基化频率呈负相关（r=-0.463,P<0.05）。结论1.在胰腺癌组织中,XIAP过度表达,XAF1表达下降,提示二者的表达失衡与胰腺癌的发生、发展及肿瘤的恶性程度相关,可能是胰腺癌的重要发病机制之一。2.XAF1基因启动子区域的甲基化水平与蛋白的表达、肿瘤的恶性程度呈负相关,可能是导致该蛋白不表达的重要机制之一。应用去甲基化药物,恢复XAF1的表达和功能,则有可能成为胰腺癌药物治疗的新靶点。

论文目录

• 摘要
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• 縮略词表
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• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 附图
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• 综述
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