荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮癌及前列腺癌中的临床研究

论文摘要

目的:本研究通过比较尿脱落细胞的细胞学检查和荧光原位杂交技术两种方法对膀胱尿路上皮癌患者的诊断效果,拓展膀胱癌新的诊断方式;通过对比复发膀胱尿路上皮癌和无复发膀胱尿路上皮癌蜡块组织中细胞的染色体畸变情况,推断基于染色体检测的FISH技术用于预测膀胱尿路上皮癌复发的价值;同时运用FISH技术对前列腺癌组织和增生前列腺组织进行融合基因的检测,旨在寻找提高前列腺癌阳性穿刺率而不产生假阳性的辅助手段。方法:留取经电子膀胱镜确诊为膀胱尿路上皮癌的患者尿液15例,经电子膀胱镜排除膀胱癌的患者尿液35例、其中血尿患者15例,分别加入经荧光标记过的探针组检测9号染色体p16基因、3号、7号和17号染色体的情况,根据判断标准记录阳性或阴性,同时对所有标本进行尿脱落细胞学检查;收集我院2007年1月-2008年3月行膀胱癌手术的病理蜡块标本32例,根据随访结果分为复发（18例）和无复发（14例）两组,运用FISH技术分别检测9号染色体p16基因、3号、7号和17号染色体的畸变情况;选取我院2009年1月-12月的前列腺癌组织26例增生前列腺组织10例,采用三种FISH探针检测两组标本内TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2- ETV4融合基因的出现状况。结果:基于9p16基因、7号、3号和17号染色体检测的FISH技术诊断膀胱尿路上皮癌的敏感性为86.7%,特异性为88.6%,其敏感性显著高于尿脱落细胞学检查,而特异性无差别,并且血尿对诊断结果无干扰;复发膀胱癌组织的9号染色体p16基因和17号染色体畸变率高于无复发膀胱癌组织,而7号和17号染色体的畸变率不具有统计学意义;通过检测融合基因TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2- ETV4的出现诊断前列腺癌的敏感性为62%,特异性高达100%。结论:将FISH技术应用于膀胱癌的诊断,敏感性和特异性均较高,敏感性显著优于尿脱落细胞学检查,而特异性不受影响;复发的膀胱癌细胞9号染色体p16基因和17号染色体畸变率要高于无复发的膀胱癌细胞,因此可以推断经检测9号染色体p16基因和17号染色体畸变的膀胱癌患者,其复发风险高于9号染色体p16位点和17号染色体正常的膀胱癌患者;对前列腺穿刺标本采用FISH技术进行融合基因的检测有可能提高前列腺癌的检出率,并且不会增加假阳性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第1章 引言
• 第2章 资料与方法
• 2.1 病例分组
• 2.1.1 FISH 技术用于膀胱癌诊断的敏感性和特异性，及其与尿脱落细胞形态学的比较
• 2.1.2 复发膀胱癌与无复发膀胱癌的染色体畸变分析
• 2.1.3 TMPRSS2-ERG/ ETV1/ ETV4 融合基因在前列腺癌组织及增生前列腺组织的表达情况
• 2.2 主要材料
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 以尿液为标本的样本玻片制备
• 2.3.2 以尿液为标本的玻片预处理程序
• 2.3.3 以蜡块为标本的玻片预处理
• 2.3.4 变性杂交操作步骤
• 2.3.5 玻片洗涤和复染
• 2.3.6 FISH 结果观察
• 2.4 结果判定
• 2.5 统计方法
• 第3章 结果
• 3.1 FISH 技术应用于膀胱癌的诊断价值
• 3.2 复发膀胱癌与无复发膀胱癌染色体畸变的比较
• 3.3 前列腺癌与前列腺增生染色体畸变的比较
• 第4章 讨论
• 4.1 膀胱癌的分子生物学研究背景
• 4.2 前列腺癌的分子生物学研究背景
• 4.3 FISH 技术应用于膀胱癌诊断的意义
• 4.4 FISH技术应用于膀胱癌复发的预测价值
• 4.5 FISH 技术应用于前列腺癌的意义
• 第5章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 附带综述