许秋达:关于GPR120的脂肪酸类电化学受体传感器的研究论文

许秋达:关于GPR120的脂肪酸类电化学受体传感器的研究论文

本文主要研究内容

作者许秋达(2019)在《关于GPR120的脂肪酸类电化学受体传感器的研究》一文中研究指出:肥胖已经成为一种现代流行性疾病,严重危害人类健康,影响生命质量,给社会增加了巨大的医疗负担。作为一种营养过剩所造成的代谢类疾病,肥胖将成为21世纪全球最大的公共卫生问题。2010年中国肥胖人口已经达到3.25亿,这个数字在未来20年还可能增加一倍,因此解决当代人的肥胖问题迫在眉睫。脂肪酸受体目前正成为治疗代谢和炎症疾病的一个新的潜在目标。我们需要更好地了解这一法规背后的分子机制,最终可能会导致限制食用富含脂肪和有害物质的新策略,从而正确应对肥胖。味觉是食物对哺乳动物口腔内的化学感受系统刺激而产生的一种特殊感觉。人的味觉除了酸、咸、苦、甜、鲜,人类还有第6味觉——脂肪味。它们分别代表了摄入食物的卡路里含量、潜在的有毒物质、氨基酸含量、矿物质的存在、细菌性腐败等。多样的食品成分以及灵敏的味觉感受系统成就了我们“有滋味”的世界。同时,电化学受体传感器是一种复杂的测量仪器,它利用电化学作为换能器,并利用生物活性成分作为敏感原件。在此基础上,本实验利用GPR120受体制备电化学受体传感器,检测了14种脂肪酸与其受体GPR120之间的作用。通过NCBI查找到FFAR4受体基因GPR120,利用真核表达载体pcDNA3.0获得重组质粒。通过脂质体转染法将重组质粒转染HEK-239T细胞,利用HEK-239T细胞表达系统获得目标蛋白。然后,通过自组装的方法在玻碳电极表面按顺序固定壳聚糖,纳米金溶胶,GPR120蛋白溶液,硫堇-壳聚糖混合物,辣根过氧化物酶-纳米金溶胶,GPR120蛋白溶液在玻碳电极表面,最后用BSA溶液封闭。组装的每个过程都使用循环伏安法进行表征。使用电化学工作站,通过时间-电流法对分别对14种脂肪酸的不同浓度的溶液进行检测。结果表明,GPR120与14种脂肪酸在一定浓度范围内均呈现双曲线,使用双曲线模型进行线性拟合,相关系数(R2)均达到0.95以上。使用双倒数方法(Lineweaver-Burk方程)用于绘图并进行回归分析,R2也达到0.95以上,进一步计算出受体-配体的变构常数:得出乙酸的变构常数Ka值为2.87×10-17mol/L;丙酸的变构常数Ka值为3.34×10-17mol/L;正丁酸的变构常数Ka值为2.73×10-15mol/L;巴豆酸的变构常数Ka值为7.76×10-16mol/L;正辛酸的变构常数Ka值为7.47×10-16mol/L;正葵酸的变构常数Ka值为2.38×10-15mol/L;十二酸的变构常数Ka值为1.19×10-15mol/L;棕榈酸的变构常数Ka值为6.87×10-15mol/L;油酸的变构常数Ka值为8.32×10-15mol/L;亚油酸的变构常数Ka值为3.80×10-15mol/L;α-亚麻酸的变构常数Ka值为1.89×10-14mol/L;花生四烯酸的变构常数Ka值为5.98×10-15mol/L;EPA的变构常数Ka值为1.78×10-13mol/L;DHA的变构常数Ka值为1.31×10-13mol/L。说明该传感器可以在一定程度上模拟体内信号传递过程,揭示受体与配体相互作用的关系。使用同一传感器测量相同的样品10次,RSD为4.73%,表明传感器具有良好的重复性。测量了不同批次的5支传感器,RSD为2.52%,表明传感器具有良好的重现性。将电极在4℃下储存在PBS溶液上方,第10天,它是初始响应信号的88.12%,表明传感器具有良好的稳定性。通过对上述电化学受体传感器的研究,我们在分子水平上讨论了脂肪酸和GPR120受体之间的相互作用,该方法不依赖于组织或者细胞,利用新的信号传递系统实现了对细胞内信号传递过程的模拟,且效果良好。对于今后关于代谢性疾病药物的筛选等方面的研究提供了新的思考方向。

Abstract

fei pan yi jing cheng wei yi chong xian dai liu hang xing ji bing ,yan chong wei hai ren lei jian kang ,ying xiang sheng ming zhi liang ,gei she hui zeng jia le ju da de yi liao fu dan 。zuo wei yi chong ying yang guo sheng suo zao cheng de dai xie lei ji bing ,fei pan jiang cheng wei 21shi ji quan qiu zui da de gong gong wei sheng wen ti 。2010nian zhong guo fei pan ren kou yi jing da dao 3.25yi ,zhe ge shu zi zai wei lai 20nian hai ke neng zeng jia yi bei ,yin ci jie jue dang dai ren de fei pan wen ti pai zai mei jie 。zhi fang suan shou ti mu qian zheng cheng wei zhi liao dai xie he yan zheng ji bing de yi ge xin de qian zai mu biao 。wo men xu yao geng hao de le jie zhe yi fa gui bei hou de fen zi ji zhi ,zui zhong ke neng hui dao zhi xian zhi shi yong fu han zhi fang he you hai wu zhi de xin ce lve ,cong er zheng que ying dui fei pan 。wei jiao shi shi wu dui bu ru dong wu kou qiang nei de hua xue gan shou ji tong ci ji er chan sheng de yi chong te shu gan jiao 。ren de wei jiao chu le suan 、xian 、ku 、tian 、xian ,ren lei hai you di 6wei jiao ——zhi fang wei 。ta men fen bie dai biao le she ru shi wu de ka lu li han liang 、qian zai de you du wu zhi 、an ji suan han liang 、kuang wu zhi de cun zai 、xi jun xing fu bai deng 。duo yang de shi pin cheng fen yi ji ling min de wei jiao gan shou ji tong cheng jiu le wo men “you zi wei ”de shi jie 。tong shi ,dian hua xue shou ti chuan gan qi shi yi chong fu za de ce liang yi qi ,ta li yong dian hua xue zuo wei huan neng qi ,bing li yong sheng wu huo xing cheng fen zuo wei min gan yuan jian 。zai ci ji chu shang ,ben shi yan li yong GPR120shou ti zhi bei dian hua xue shou ti chuan gan qi ,jian ce le 14chong zhi fang suan yu ji shou ti GPR120zhi jian de zuo yong 。tong guo NCBIcha zhao dao FFAR4shou ti ji yin GPR120,li yong zhen he biao da zai ti pcDNA3.0huo de chong zu zhi li 。tong guo zhi zhi ti zhuai ran fa jiang chong zu zhi li zhuai ran HEK-239Txi bao ,li yong HEK-239Txi bao biao da ji tong huo de mu biao dan bai 。ran hou ,tong guo zi zu zhuang de fang fa zai bo tan dian ji biao mian an shun xu gu ding ke ju tang ,na mi jin rong jiao ,GPR120dan bai rong ye ,liu jin -ke ju tang hun ge wu ,la gen guo yang hua wu mei -na mi jin rong jiao ,GPR120dan bai rong ye zai bo tan dian ji biao mian ,zui hou yong BSArong ye feng bi 。zu zhuang de mei ge guo cheng dou shi yong xun huan fu an fa jin hang biao zheng 。shi yong dian hua xue gong zuo zhan ,tong guo shi jian -dian liu fa dui fen bie dui 14chong zhi fang suan de bu tong nong du de rong ye jin hang jian ce 。jie guo biao ming ,GPR120yu 14chong zhi fang suan zai yi ding nong du fan wei nei jun cheng xian shuang qu xian ,shi yong shuang qu xian mo xing jin hang xian xing ni ge ,xiang guan ji shu (R2)jun da dao 0.95yi shang 。shi yong shuang dao shu fang fa (Lineweaver-Burkfang cheng )yong yu hui tu bing jin hang hui gui fen xi ,R2ye da dao 0.95yi shang ,jin yi bu ji suan chu shou ti -pei ti de bian gou chang shu :de chu yi suan de bian gou chang shu Kazhi wei 2.87×10-17mol/L;bing suan de bian gou chang shu Kazhi wei 3.34×10-17mol/L;zheng ding suan de bian gou chang shu Kazhi wei 2.73×10-15mol/L;ba dou suan de bian gou chang shu Kazhi wei 7.76×10-16mol/L;zheng xin suan de bian gou chang shu Kazhi wei 7.47×10-16mol/L;zheng kui suan de bian gou chang shu Kazhi wei 2.38×10-15mol/L;shi er suan de bian gou chang shu Kazhi wei 1.19×10-15mol/L;zong lv suan de bian gou chang shu Kazhi wei 6.87×10-15mol/L;you suan de bian gou chang shu Kazhi wei 8.32×10-15mol/L;ya you suan de bian gou chang shu Kazhi wei 3.80×10-15mol/L;α-ya ma suan de bian gou chang shu Kazhi wei 1.89×10-14mol/L;hua sheng si xi suan de bian gou chang shu Kazhi wei 5.98×10-15mol/L;EPAde bian gou chang shu Kazhi wei 1.78×10-13mol/L;DHAde bian gou chang shu Kazhi wei 1.31×10-13mol/L。shui ming gai chuan gan qi ke yi zai yi ding cheng du shang mo ni ti nei xin hao chuan di guo cheng ,jie shi shou ti yu pei ti xiang hu zuo yong de guan ji 。shi yong tong yi chuan gan qi ce liang xiang tong de yang pin 10ci ,RSDwei 4.73%,biao ming chuan gan qi ju you liang hao de chong fu xing 。ce liang le bu tong pi ci de 5zhi chuan gan qi ,RSDwei 2.52%,biao ming chuan gan qi ju you liang hao de chong xian xing 。jiang dian ji zai 4℃xia chu cun zai PBSrong ye shang fang ,di 10tian ,ta shi chu shi xiang ying xin hao de 88.12%,biao ming chuan gan qi ju you liang hao de wen ding xing 。tong guo dui shang shu dian hua xue shou ti chuan gan qi de yan jiu ,wo men zai fen zi shui ping shang tao lun le zhi fang suan he GPR120shou ti zhi jian de xiang hu zuo yong ,gai fang fa bu yi lai yu zu zhi huo zhe xi bao ,li yong xin de xin hao chuan di ji tong shi xian le dui xi bao nei xin hao chuan di guo cheng de mo ni ,ju xiao guo liang hao 。dui yu jin hou guan yu dai xie xing ji bing yao wu de shai shua deng fang mian de yan jiu di gong le xin de sai kao fang xiang 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自天津商业大学的许秋达,发表于刊物天津商业大学2019-07-05论文,是一篇关于受体论文,电化学受体传感器论文,蛋白偶联受体论文,脂肪酸论文,天津商业大学2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自天津商业大学2019-07-05论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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