论文摘要
【目的】研究20（R）-人参皂苷Rg3对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡、calpain、caspase-3基因表达的影响，从细胞凋亡调控通路的角度探讨20（R）-人参皂苷Rg3的神经保护作用及其作用机制。【方法】采用线栓法复制SD大鼠大脑中动脉暂时性局部脑缺血再灌注模型（MCAO）。将健康雄性SD大鼠，随机分为：假手术组、模型组、溶媒组、尼莫地平组、Rg3低剂量组、Rg3中剂量组、Rg3高剂量组。各组根据再灌注时间不同，再分为再灌注12h、24h和72h组。尼莫地平组、Rg3低剂量组、Rg3中剂量组、Rg3高剂量组，分别给予：1mg／kg、5mg／kg、10mg／kg、20mg／kg，腹腔注射，2次／d。模型组、假手术组和溶媒组腹腔注射等体积的溶媒。用神经功能评分评价大鼠脑缺血再灌注后行为障碍，用2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色法测定梗死灶体积，用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法（TUNEL）检测神经细胞凋亡，用原位杂交技术检测鼠脑中calpain和caspase-3 mRNA的表达。【结果】神经行为学评分上，缺血再灌注12h时，Rg3各剂量组无明显改善大鼠行为障碍，随着再灌注时间的延长至24h和72h，Rg3治疗可显著改善大鼠的行为障碍，呈一定的剂量依赖性，其高、中剂量组的作用与尼莫地平组相当；再灌注24h TTC染色，高、中剂量Rg3能显著缩小MCAO大鼠的梗死体积和降低梗塞率；假手术组仅有极少数的TUNEL阳性细胞出现，模型组和溶媒组凋亡细胞数在再灌注24h达到高峰，Rg3可显著减少神经细胞凋亡数，呈一定的剂量依赖性，其Rg3中、高剂量组的作用与尼莫地平组相当；假手术组中有少量的calpainⅠ和caspase-3 mRNA表达，模型组和溶媒组calpainⅠ和caspase-3 mRNA表达达到高峰，Rg3可显著降低calpainⅠ和caspase-3 mRNA的表达并呈一定的剂量依赖关系，其高、中剂量组的作用与尼莫地平组相当。【结论】人参皂苷Rg3可明显改善大鼠大鼠脑缺血再灌注损伤后的行为障碍，缩小梗死灶体积，减少凋亡的神经细胞数目，其机制与抑制calpain和caspase-3 mRNA的表达密切相关，提示20（R）-人参皂苷Rg3具有抑制神经细胞凋亡和神经保护作用，对干预治疗短暂局灶性脑缺血具有潜在的临床应用价值。