本文主要研究内容
作者王璐（2019）在《叶用莴苣LsSTPK和LsMAPK4基因的克隆与LsSTPK基因在抽薹中的功能分析》一文中研究指出：叶用莴苣（Lactuca sativa L.）适宜在凉爽湿润的条件下生长,在夏季时,气温升高容易出现先期抽薹,导致品质下降,这是影响叶用莴苣实现周年生产的一个关键问题。目前,关于调控叶用莴苣高温抽薹分子机制的研究尚少。因此,挖掘与叶用莴苣高温抽薹相关的基因,深入探讨其作用机制对培育耐抽薹品种和解决叶用莴苣周年生产难题有重要意义。本课题组前期在关于叶用莴苣高温抽薹的差异磷酸化蛋白质组研究中筛选到两个差异蛋白,分别为蛋白质丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（STPK）和丝分裂原活化蛋白激酶4（MAPK4）,这两个蛋白在高温抽薹组表达量下调。然而,STPK基因在叶莴苣中的作用机制及其与抽薹的关系尚不清楚。本试验以叶用莴苣‘GB30’品种为材料,利用基因克隆、生物信息学分析、qPCR以及病毒诱导的基因沉默等方法,初步探究LsSTPK和LsMAPK4基因在叶用莴苣高温抽薹过程中的作用,为避免叶用莴苣夏季高温抽薹,实现周年生产提供理论依据。结果如下:1.采用RT-PCR技术克隆获得了1个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因,将其命名为LsSTPK基因,该基因编码区为1095 bp,共编码365个氨基酸亚细胞定位结果显示LsSTPK被定位于细胞核。2.采用RT-PCR技术克隆获得了1个丝分裂原活化蛋白激酶基因,命名为LsMAPK4基因,该基因全长1641 bp,编码区为1134 bp,共编码378个氨基酸,具有促分裂原活化蛋白激酶的保守结构域,亚细胞定位结果显示LsMAPK4被定位于细胞核。3.实时荧光定量PCR结果表明,LsSTPK基因和LsMAPK4基因在叶用莴苣茎中的表达量显著高于根和叶;转录和翻译水平上,高温处理下该基因在茎中表达量均明显低于对照组,说明该基因的表达受高温影响。4.利用病毒诱导基因沉默（VIGS）方法将LsSTPK基因沉默后,茎长大于对照组,同时IAA、GA3和ABA含量较对照组升高。处理组植株花芽分化,对照组植株未见花芽分化。以上结果表明,LsSTPK抑制了高温条件下叶用莴苣抽薹。
Abstract
xie yong wo ju （Lactuca sativa L.）kuo yi zai liang shuang shi run de tiao jian xia sheng chang ,zai xia ji shi ,qi wen sheng gao rong yi chu xian xian ji chou tai ,dao zhi pin zhi xia jiang ,zhe shi ying xiang xie yong wo ju shi xian zhou nian sheng chan de yi ge guan jian wen ti 。mu qian ,guan yu diao kong xie yong wo ju gao wen chou tai fen zi ji zhi de yan jiu shang shao 。yin ci ,wa jue yu xie yong wo ju gao wen chou tai xiang guan de ji yin ,shen ru tan tao ji zuo yong ji zhi dui pei yo nai chou tai pin chong he jie jue xie yong wo ju zhou nian sheng chan nan ti you chong yao yi yi 。ben ke ti zu qian ji zai guan yu xie yong wo ju gao wen chou tai de cha yi lin suan hua dan bai zhi zu yan jiu zhong shai shua dao liang ge cha yi dan bai ,fen bie wei dan bai zhi si an suan /su an suan dan bai ji mei （STPK）he si fen lie yuan huo hua dan bai ji mei 4（MAPK4）,zhe liang ge dan bai zai gao wen chou tai zu biao da liang xia diao 。ran er ,STPKji yin zai xie wo ju zhong de zuo yong ji zhi ji ji yu chou tai de guan ji shang bu qing chu 。ben shi yan yi xie yong wo ju ‘GB30’pin chong wei cai liao ,li yong ji yin ke long 、sheng wu xin xi xue fen xi 、qPCRyi ji bing du you dao de ji yin chen mo deng fang fa ,chu bu tan jiu LsSTPKhe LsMAPK4ji yin zai xie yong wo ju gao wen chou tai guo cheng zhong de zuo yong ,wei bi mian xie yong wo ju xia ji gao wen chou tai ,shi xian zhou nian sheng chan di gong li lun yi ju 。jie guo ru xia :1.cai yong RT-PCRji shu ke long huo de le 1ge si an suan /su an suan dan bai ji mei ji yin ,jiang ji ming ming wei LsSTPKji yin ,gai ji yin bian ma ou wei 1095 bp,gong bian ma 365ge an ji suan ya xi bao ding wei jie guo xian shi LsSTPKbei ding wei yu xi bao he 。2.cai yong RT-PCRji shu ke long huo de le 1ge si fen lie yuan huo hua dan bai ji mei ji yin ,ming ming wei LsMAPK4ji yin ,gai ji yin quan chang 1641 bp,bian ma ou wei 1134 bp,gong bian ma 378ge an ji suan ,ju you cu fen lie yuan huo hua dan bai ji mei de bao shou jie gou yu ,ya xi bao ding wei jie guo xian shi LsMAPK4bei ding wei yu xi bao he 。3.shi shi ying guang ding liang PCRjie guo biao ming ,LsSTPKji yin he LsMAPK4ji yin zai xie yong wo ju jing zhong de biao da liang xian zhe gao yu gen he xie ;zhuai lu he fan yi shui ping shang ,gao wen chu li xia gai ji yin zai jing zhong biao da liang jun ming xian di yu dui zhao zu ,shui ming gai ji yin de biao da shou gao wen ying xiang 。4.li yong bing du you dao ji yin chen mo （VIGS）fang fa jiang LsSTPKji yin chen mo hou ,jing chang da yu dui zhao zu ,tong shi IAA、GA3he ABAhan liang jiao dui zhao zu sheng gao 。chu li zu zhi zhu hua ya fen hua ,dui zhao zu zhi zhu wei jian hua ya fen hua 。yi shang jie guo biao ming ,LsSTPKyi zhi le gao wen tiao jian xia xie yong wo ju chou tai 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自北京农学院的王璐，发表于刊物北京农学院2019-07-10论文，是一篇关于叶用莴苣论文,抽薹论文,亚细胞定位论文,基因表达论文,功能分析论文,北京农学院2019-07-10论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自北京农学院2019-07-10论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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