Nd(3)+和Sm3+对原代培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响

Nd(3)+和Sm3+对原代培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响

论文摘要

本实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、碱性磷酸酶(ALP)活性测定、油红O染色及定量测定、矿化功能的测定以及实时定量PCR(qPCR)等手段,在细胞和分子水平上研究了Nd3+和Sm3+对原代培养成骨细胞(OBs)增殖、分化和矿化功能的影响。研究结果表明:在测试浓度范围内,Nd3+和Sm3+抑制OBs的增殖,而且Sm3+的抑制效应强于Nd3+。Nd3+和Sm3+对OBs分化的影响是相似的,在1×10-5mol/L的浓度下均提高ALP的活性,当浓度为1×10-6mol/L时,ALP活性明显降低,随着浓度的降低,ALP活性逐渐升高,当浓度为1×10-8mol/L时,则转为促进OBs的分化。浓度为1×10-5mol/L的Nd3+促进矿化结节的形成,而浓度为1×10-7 mol/L和1×10-6mol/L的Nd3+抑制矿化结节的形成,进一步降低浓度为1×10-8mol/L,则对矿化功能没有影响。在测试浓度范围内,Sm3+抑制OBs矿化结节的形成。Nd3+和Sm3+对OBs横向分化为脂肪细胞的影响是不同的,Sm3+(1×10-7,1×10-6和1×10-5mol/L)促进OBs横向分化为脂肪细胞,而Nd3+则在测试浓度范围内抑制OBs横向分化为脂肪细胞。进一步对成骨分化过程中相关基因Runt相关转录因子-2(Runx-2)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)的调控进行了研究。结果显示,浓度为1×10-6mol/L的Sm3+和Nd3+显著下调Runx-2的mRNA表达水平,浓度为1×10-6mol/L的Nd3+下调PPAR-γ的mRNA表达水平,但相同浓度的Sm3+则显著上调PPAR-γ的mRNA表达水平。上述研究结果提示:Nd3+和Sm3+对原代培养的OBs增殖、分化和矿化功能的影响依赖浓度、培养时间和稀土离子的种类。这些结果对深入理解稀土离子对骨代谢的影响具有重要的意义。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第1章 绪论
  • 1.1 稀土离子对成骨细胞和破骨细胞分化和功能表达的影响
  • 1.2 稀土离子对骨髓基质细胞成骨分化和成脂分化的影响
  • 1.3 立题依据
  • 3+和Sm3+对原代培养的小鼠成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响'>第2章 Nd3+和Sm3+对原代培养的小鼠成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响
  • 2.1 实验材料
  • 2.1.1 实验动物
  • 2.1.2 实验试剂
  • 2.1.3 实验仪器
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 原代成骨细胞的分离培养
  • 2.2.2 细胞增殖分析
  • 2.2.3 碱性磷酸酶活力分析
  • 2.2.4 茜素红染色及定量测定
  • 2.2.5 油红O 染色及定量测定
  • 2.2.6 RNA 提取和荧光定量PCR 反应
  • 2.2.7 统计分析
  • 2.3 实验结果
  • 3+和Sm3+对成骨细胞增殖的影响'>2.3.1 Nd3+和Sm3+对成骨细胞增殖的影响
  • 3+和Sm3+对成骨细胞分化的影响'>2.3.2 Nd3+和Sm3+对成骨细胞分化的影响
  • 3+和Sm3+对成骨细胞矿化结节形成的影响'>2.3.3 Nd3+和Sm3+对成骨细胞矿化结节形成的影响
  • 3+和Sm3+对成骨细胞横向分化为脂肪细胞的影响'>2.3.4 Nd3+和Sm3+对成骨细胞横向分化为脂肪细胞的影响
  • 3+和Sm3+对Runx-2 和PPAR-γmRNA 表达的影响.'>2.3.5 Nd3+和Sm3+对Runx-2 和PPAR-γmRNA 表达的影响.
  • 2.4 实验结果讨论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间所得的科研成果
  • 相关论文文献

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