论文摘要
目的:检测肠球菌临床分离株对6种抗菌药物的敏感性,分析粪肠球菌临床株的esp基因扩增序列,以揭示肠球菌临床株的耐药现状及esp基因与粪肠球菌耐药的关系,为临床合理选用药物治疗肠球菌感染提供实验及理论依据。 方法:从临床实验室收集肠球菌感染标本,进行分纯、培养、鉴定;用琼脂平板稀释法检测去甲万古霉素、氨苄西林、环丙沙星、阿奇霉素和红霉素对肠球菌的最低抑菌浓度(MIC)及鉴定庆大霉素高浓度(MIC≥500μg/mL)耐药株,筛选出对6种抗菌药物呈不同程度耐药或多重耐药的肠球菌。然后用PCR法扩增粪肠球菌临床株的esp基因;随机挑选一阳性菌株,将其PCR产物克隆到pUC18载体,转化大肠杆菌JM109,蓝白斑筛选挑取阳性重组子进行限制性内切酶酶切、PCR及测序鉴定,并对测序结果用Blast软件进行同源性分析,探讨粪肠球菌耐药与esp基因的关系。 结果:从临床分离的肠球菌共78株,其中粪肠球菌61株,占78.2%;屎肠球菌15株,占19.2%;鸟肠球菌、坚韧肠球菌各1株,共占2.6%。 去甲万古霉素对肠球菌的MIC50、MIC90分别为0.μg/mL和4μg/mL;氨苄西林和环丙沙星的MIC50、MIC90分别为1μg/mL和4μg/mL、16μg/mL和64μg/mL:阿奇霉素和红霉素的MIC50、MIC90较高,分别为16μg/mL和32μg/mL、64μg/mL和128μg/mL。未检测出去对甲万古霉素耐药的肠球菌,肠球菌对氨苄西林、环丙沙星、高浓度庆大霉素、阿奇霉素和红霉素的耐药率分别为16.7%、53.8%、56.4%、74.4%、85.9%。 粪肠球菌和屎肠球菌对氨苄西林的耐药率分别为9.8%和46.7%(P<0.01);对环丙沙星的耐药率分别为50.8%和73.3%(P<0.05),这两种主要肠球菌对氨苄