论文摘要
目的探讨脂肪酸合酶(FAS)的抑制剂浅蓝菌素对前列腺癌细胞株PC-3的生长抑制作用。方法1.细胞培养:取人前列腺癌细胞株PC-3常规培养于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中,培养箱内含5%CO2,湿度95%,温度37℃,每3-4天换液传代培养。待细胞长至单层后,以0.25%胰蛋白酶消化贴壁细胞,选用对数生长期细胞用于实验。2.用MTT比色法测定浅蓝菌素对PC-3细胞的光密度OD值,计算其抑制率。3.通过流式细胞术(FCM)对细胞株的凋亡及细胞周期的变化进行检测。4.用蛋白免疫印迹(Western blotting)法来检测浅蓝菌素对PC-3细胞中FAS蛋白水平表达的影响。结果1.PC-3细胞在浅蓝菌素的作用下,细胞增殖被明显阻遏,并呈现出剂量效应关系,在加入浓度为2.5mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L的浅蓝菌素作用24h后,PC-3细胞24h的抑制率分别为(34.78±2.47)%、(46.76±3.18)%、(58.13±3.55)%、(65.31±2.81)%,与对照组相比较有统计学意义(P<0.05)。2.流式细胞仪显示,PC-3细胞经浅蓝菌素作用后,细胞凋亡增多,PC-3细胞在浅蓝菌素浓度5.0mg/L三个时间组(24h,48h,72h)的细胞凋亡率分别为28.29±1.88%、44.73±2.69%、61.25±1.43%;且G0/G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞比例减少。3.蛋白免疫印迹实验中,随着浅蓝菌素作用时间的延长,PC-3细胞中的FAS蛋白水平表达量明显减少,药物作用时间与细胞中蛋白水平表达量呈负相关。结论1.浅蓝菌素能抑制人前列腺癌细胞PC-3的生长,且其抑制作用呈现时间依赖性和浓度依赖性。2.浅蓝菌素能干扰人前列腺癌细胞PC-3的细胞周期,将其阻滞在G0/G1并诱导其凋亡。
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