论文摘要
“研制开发中药复方有效部位群是中药现代化的有效途径，在阐明其药效及作用机理的基础上，进行中药及其复方开发的系列研究。”这是在“第三届生物多样性保护与利用高新科学技术国际研讨会”上专家对中药现代化研究提出的宝贵建议。复方经提取、纯化得到的有效部位，去除了大量无效及许多具有限制性、抑制性的成分，药效作用突出，副作用减少；同时化学成分更加明确，有利于药品质量标准的制定和生产质量的控制。本课题选用由五味子、山茱萸、金樱子、诃子、白及五味药组成的中药复方WZDL作为研究对象，通过广泛的文献调研，建立了复方中各单味药的数据库（包括单味药的来源、性状、性味及归经、功能主治，已报道的化学成分、含量及其在体内、体外的药理活性研究）。通过对已报道文献的整理、分析，结合对粗提物的初步定性实验，确定了四个有效部位即总木脂素、总皂苷、总多糖、总鞣质。为了能更有效地提取、分离有效部位，根据各有效部位在单味药中的存在特点，把复方中五味药分成四组，分别进行提取、分离、纯化操作。即从五味子中提取总木脂素，从山茱萸中提取总皂苷，从诃子和金樱子中提取总鞣质，从白及中提取白及多糖。从总固形物得率、有效部位的含量、除杂实验、薄层鉴别等多个方面，研究比较了多种方法的分离、纯化效果。筛选出大孔吸附树脂HPD-300型对山茱萸皂苷纯化效果较好，并通过柱色谱对得到的总皂苷进一步分离得到2个有效部位（Ⅲ和Ⅴ）；在乙酸乙酯萃取部位得到总鞣质（0）；通过索氏提取，硅胶柱色谱分离得到总木脂素（Ⅳ）；从白及中水提醇沉得到白及胶（Ⅰ）；对除白及外其余四味中药提取后的药渣水提醇沉得到总多糖（Ⅱ），并探讨了大孔吸附树脂除色素及sevag法除蛋白对多糖的纯化作用。对0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ部位及其配伍组成的复方进行体外肿瘤细胞毒性及抗粘附实验，结果表明Ⅳ和Ⅴ部位及其复配物均有明显的细胞毒性及抗粘附作用，而配伍复方效果较差。对有效部位配伍复方进行体内抗肿瘤实验，选取3个浓度0.45g·Kg-1、0.225g·Kg-1、0.13g·Kg-1，结果表明有效部位配伍复方有体内抗肿瘤作用，并且效果呈剂量依赖关系。