论文题目: 某些生物活性肽的毛细管电泳行为研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 物理化学
作者: 黄颖
导师: 陈国南
关键词: 生物活性肽,毛细管电泳,激光诱导荧光检测,紫外检测,在线富集
文献来源: 福州大学
发表年度: 2005
论文摘要: 生物活性肽是一类具有重要生物学功能的多肽，生物活性肽的研究是生命科学，神经生理学、药理学和临床医学领域的前沿课题，开展生物活性肽的分离分析研究，寻求灵敏，高效，快速和简便的分析方法具有重要意义。 本论文共分四部分，第一部分对生物活性肽的生理功能，应用，分析研究现状与进展作了详细综述，重点阐述了毛细管电泳在多肽分析中的应用。第二部分研究了脑啡肽类生物活性肽的毛细管电泳行为及分离分析方法，主要成果包括：(1) 基于紫外检测技术，建立了毛细管电泳分离分析十种脑啡肽类活性肽的分析方法，20分钟内十种脑啡肽得以完全分离，检测限为μM级，并应用于脑脊液样品的分析。(2) 基于激光诱导荧光检测技术，以荧光素异硫氰酸盐柱前衍生了八种脑啡肽类活性肽，成功实现了八种脑啡肽的胶束电动毛细管色谱分离，检测限达0.1nM级，并以CE-UV法考察了衍生反应的动力学，求得反应的速率常数。本部分工作将为神经生理学与药理学提供理论基础和实验方法。 论文第三部分研究了毛细管电泳激光诱导荧光技术以及在线富集技术在肌肽类生物活性肽分离分析中的应用，主要成果：(1) 以荧光生成试剂3-(4-羰基苯甲酰基)-喹啉-2-羰醛柱前衍生了肌肽、鹅肌肽和高肌肽，建立了CE-LIF分离检测体系，20分钟内三种肌肽类生物活性肽得以基线分离，检测限达nM级，已应用于人体脑脊液样品中高肌肽和动物肌肉样品中肌肽和鹅肌肽的分析。(2) 应用三种在线富集技术，即大体积进样反向压力排除基体，大体积进样EOF排除基体和场放大进样技术对肌肽类生物活性肽进行在线富集方法研究，使检测灵敏度提高了两个数量级以上，拓宽了CE-UV法在痕量分析中的应用。本部分工作将为临床检验领域提供重要的分析手段并为生物样品中痕量组分的分析提供灵敏和简便的方法。 论文第四部分以毛细管电泳-紫外检测法用于酪氨酸及其重要衍生物的分析研究以及在氧化型和还原型谷胱甘肽分析中的应用，主要成果：(1) 对酪氨酸及其重要衍生物共七种组分的毛细管电泳行为进行了详细研究，检测限达μM级，20分钟内七种组分得以基线分离。用电化学手段研究了对羟基苯丙酮酸与添加剂β-环糊精的相互作用，并研究了对羟基苯丙酮酸的两个同分异构体烯醇式和酮式之间转化的动力学过程．求出转化反应的速率常数。(2) 通过研究氧化型和还原型谷胱甘肽的电迁移行为，建立了CZE-UV检测体系，并应用于果蔬中谷胱甘肽含量的测定。
论文目录:
中文摘要
Abstract(英文摘要)
目录
主要缩略词表
第一部分 引言
第一章 绪论
1．1 生物活性多肽
1．2 生物活性肽的主要分析方法
1．2．1 免疫法分析
1．2．2 光学分析法
1．2．3 电化学及电化学发光分析
1．2．4 核磁共振波谱分析
1．2．5 分离分析方法
1．3 毛细管电泳在生物活性肽的分离分析中的应用
1．3．1 肽的电迁移特性
1．3．2 基于CE的生物活性肽的分离分析方法
1．3．3 应用
1．4 结语
1．5 本论文主要研究内容
参考文献
第二部分 脑啡肽类生物活性肽的毛细管电泳行为及其分离分析研究
第二章 毛细管电泳紫外检测用于十种脑啡肽的分离分析
2．1 引言
2．2 实验部分
2．2．1 仪器
2．2．2 试剂
2．2．3 样品制备和预处理
2．2．4 分离条件
2．3 结果与讨论
2．3．1 CZE分离条件的优化
2．3．2 重现性，线性关系，检测限及分离效率
2．3．3 脑脊液样品分析
2．4 结论
参考文献
第三章 脑啡肽的胶束电动毛细管色谱-激光诱导荧光检测研究
3．1 引言
3．2 实验部分
3．2．1 试剂
3．2．2 仪器与分离条件
3．2．3 衍生化
3．2．4 衍生反应动力学
3．3 结果与讨论
3．3．1 衍生反应条件的优化
3．3．2 毛细管电泳分离条件的优化
3．4 结论
参考文献
第三部分 肌肽类生物活性肽的毛细管电泳激光诱导荧光检测和在线富集方法研究
第四章 肌肽类生物活性肽的毛细管电泳-激光诱导荧光检测研究
4．1 引言
4．2 实验部分
4．2．1 仪器
4．2．2 试剂
4．2．3 人体脑脊液样品
4．2．4 分离条件
4．2．5 样品前处理
4．2．6 衍生
4．2．7 定量分析
4．3 结果与讨论
4．3．1 衍生反应条件的优化
4．3．2 毛细管电泳分离条件的优化
4．3．3 重现性实验
4．3．4 线性关系，检测限和分离效率
4．3．5 脑脊液样品中高肌肽含量的测定
4．3．6 动物肌肉样品中肌肽和鹅肌肽的测定
4．4 结论
参考文献
第五章 肌肽类生物活性肽的毛细管电泳在线富集技术研究
5．1 引言
5．2 实验部分
5．2．1 仪器与试剂
5．2．2 CZE
5．2．3 大体积进样反向压力排除基体
5．2．4 大体积进样EOF排除基体
5．2．5 场放大样品进样技术
5．3 结果与讨论
5．3．1 大体积进样基体排除堆积原理
5．3．2 柱头电堆积富集原理
5．3．3 CZE分离条件的优化
5．3．4 大体积进样反向压力排除基体
5．3．5 大体积进样EOF排除基体
5．3．6 场放大样品进样技术
5．3．7 不同富集方法结果比较
5．4 结论
参考文献
第四部分 毛细管电泳紫外检测技术用于酪氨酸及其重要衍生物的分析以及在还原型和氧化型谷胱甘肽分析中的应用
第六章 酪氨酸及其某些重要衍生物的毛细管电泳行为研究
6．1 引言
6．2 实验部分
6．2．1 仪器与试剂
6．2．2 标准溶液与电泳条件
6．2．3 对羟基苯丙酮酸烯醇和酮式互变异构过程动力学
6．2．4 对羟基苯丙酮酸(pHPP)和β-环糊精相互作用的电化学研究
6．3 结果与讨论
6．3．1 毛细管电泳分离条件的优化
6．3．2 重现性，线性关系与检测限
6．3．3 对羟基苯丙酮酸烯醇式和酮式互变异构动力学的研究
6．3．4 pHPP与β-CD相互作用的电化学研究
6．4 结论
参考文献
第七章 还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽的毛细管电泳分离检测
7．1 引言
7．2 实验部分
7．2．1 仪器与试剂
7．2．2 样品制备
7．2．3 电泳条件及工作曲线绘制
7．3 结果与讨论
7．3．1 毛细管电泳条件的优化
7．3．2 重现性，线性和检测限
7．3．3 样品预处理
7．3．4 方法的准确度与精密度
7．4 结论
参考文献
结论
致谢
攻读博士学位期间发表的学术论文
发布时间: 2005-03-30
参考文献
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