RBP4遗传多态性对中国2型糖尿病患者罗格列酮疗效的影响

论文摘要

目的:分析中国汉族人群视黄醇结合蛋白4(RBP 4基因-803（G/A）和-179（T/G）多态性分布特征,探讨SNP-803（G/A）和SNP-179（T/G）的遗传多态性在2型糖尿病发病机制中的作用。观察中国汉族2型糖尿病人群中视黄醇结合蛋白4基因多态性对罗格列酮降糖疗效的影响,为临床实施个体化治疗提供依据。方法:选择245例2型糖尿病患者及122例健康对照者。糖尿病的诊断标准依据1999年WHO专家评估报告的糖尿病分型及诊断标准。基因组DNA采用常规酚氯提取—乙醇沉淀法进行;应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（Polymerase ChainReaction-Restriction fragment Length Polymorphism,PCR-RFLP）方法进行RBP4 SNP-803及SNP-179的基因分型。随机选择部分样品应用直接测序法验证PCR-RFLP结果。而后,从已经完成基因分型的2型糖尿病患者中,根据不同的基因型共选取42名患者,每天早饭时口服罗格列酮4mg,连续服药12周。应用酶氧化法测定血糖、放射免疫法测定胰岛素、微柱法测定糖化血红蛋白等反映降糖效应的指标。单倍型频率采用phase软件计算。应用两样本T检验、卡方检验和非参数检验进行统计学分析。结果:中国健康汉人视黄醇结合蛋白4（RBP 4）基因-803（G/A）和-179（T/G）多态性发生频率分别为11.89%与13.11%,在2型糖尿病人群中其多态性发生频率分别为15.91%与16.53%。等位基因频率均符合Hardy-Weinberg平衡。比较健康人群与2型糖尿病患者之间两位点的等位基因与基因型频率均未发现显著性差异。近一步分析发现-803（G/A）和-179（T/G）存在紧密连锁不平衡（|D′|=0.688,r2=0.17）,但未发现与糖尿病相关的单倍体。分析不同基因型的2型糖尿病患者的临床指标时,发现携带SNP-803野生型（G-G）的患者的胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白（LDL-c）明显低于突变型患者（GA+AA）（P＜0.05）。然而,携带SNP-179野生型（TT）的患者表现为腰臀比（waist-hip ratio）、空腹血糖（FPG）和空腹胰岛素（FINS）水平明显低于突变型患者（TG+GG）（P＜0.05）。罗格列酮使用12周后,SNP-803 GG型患者FPG（p=0.03）,FINS（p=0.01）和HOMA-IR（p=0.04）的下降值明显高于GA+AA型;而SNP-179 TT型患者表现为HbAlc（p=0.03）的下降值明显低于TG+GG型。结论:RBP 4基因-803（G/A）和-179（T/G）在中国健康人群和2型糖尿病病人中的分布频率不同。SNP-803GG等位基因者对罗格列酮反应较好,说明RBP 4基因变异可能对罗格列酮的疗效产生一定影响。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语简表
• 第一部分
• 第一章 前言
• 第二章 材料和方法
• 2.1 实验对象
• 2.2 实验材料
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 临床实验方案
• 2.3.2 DNA抽提
• 2.3.3 DNA的纯度和定量检测
• 2.3.4 PCR-RFLP方法进行基因分型
• 2.3.5 PCR产物直接测序验证
• 2.4 统计分析
• 第三章 结果
• 3.1 2型糖尿病患者与健康人群临床指标的比较
• 3.2 RBP4-803（G/A）与-179（T/G）等位基因在中国汉族2型糖尿病患者及健康对照人群中的分布特征
• 3.3 RBP4-803（G/A）与-179（T/G）等位基因与中国汉族2型糖尿病患者各项临床指标的相关性
• 3.4 RBP4-803（G/A）与-179（T/G）基因多态性对中国汉族2型糖尿病患者罗格列酮疗效的影响
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 第六章 参考文献
• 第二部分 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要成果