论文摘要
本研究以与就巢性状关系密切的PRL基因为候选基因，通过设计的7对引物对溆浦白鹅PRL基因编码区序列进行克隆测序；运用PCR-SSCP手段分别对7对引物所得片段进行多态性分析；探寻PRL基因编码区序列与产蛋量性状的相关程度，并检测基因突变位点。PCR-SSCP分析结果表明，试验群体PRL基因第1、2、3、5外显子在所检测位点上不存在SNP，所检测到的等位基因在群体中已固定。在外显子4中发现一处SNP位点G／A，分析结果表明未引起氨基酸序列改变，为沉默突变。野生型等位基因（A）频率为0.8837，突变型等位基因（B）频率为0.1163；群体中检测到两种基因型，AA基因型频率为0.7647，BB基因型频率为0，AB基因型频率为0.2326。在内含子2中发现的SNP位点为T／C突变，并得到了两个基因型，其中C基因频率为0.907，D的基因频率为0.093；CC基因型频率为0.814，CD基因型频率为0.186，DD基因型频率为0。对试验群体中这两个SNP位点分别进行卡方检验，结果表明其基因型分布与理论比例差异不显著（P＞0.05），均处于Hardy-Weinberg平衡状态。经SPSS软件对PRL基因SNP与溆浦白鹅产蛋量性状的相关进行统计分析，结果表明不同基因型对产蛋量性状影响不显著（P＜0.05）。将溆浦白鹅PRL基因编码区序列与其他禽类比较，其中溆浦白鹅与皖西白鹅、农安籽鹅、莱茵鹅和马岗鹅等同源性分别为99.7％、99.7％、99.6％、98.8％；与北京鸭同源性为98.4％；与家鸡同源性为92.0％。经氨基酸序列分析表明，溆浦白鹅与皖西白鹅、莱茵鹅分别在第69位的氨基酸（L／F）和第56位氨基酸（H／R）有变化，但亲水性、极性以及电荷都没有发生变化，只是分子量略有变化，此变化在第1个a螺旋位置；与马岗鹅比较有三个氨基酸突变位点，首先在第6位氨基酸有个A／D的突变，其在信号肽序列上发生了氨基酸性质上的改变，其次，在第105位氨基酸有个D／H的突变，其突变位点在第4个a螺旋位置，其亲水性、极性以及电荷都没有发生变化，只是分子量略有变化，再者，在第205位氨基酸有个R／H的突变。这些突变对于PRL保守的分泌和运输方式可能是必须的，但是是否影响其功能还有待于进一步研究。通过生物信息学分析结果显示溆浦白鹅PRL基因内含子2突变位点T／C颠换可能导致此处增加了个SRY因子并可能导致Tst-1因子改变为Nkx-2因子。利用密码子使用频率库对溆浦白鹅PRL基因外显子4发生的G／A突变位点进行分析，发现密码子CUG变为CUA，两者均编码亮氨酸，但是前者的使用用频率是后者的的近6倍。因此，外显子4发生的突变可能影响蛋白合成效率，从而可能引起PRL量的差异。