乳腺癌与甲状腺疾病的关系及乳腺钠碘转运体功能调控的研究

论文摘要

研究背景与目的乳腺癌是严害威胁妇女心身健康的恶性肿瘤,在女性恶性肿瘤中其发病率和死亡率均居前列。在我国一些大城市中乳腺癌的发病率逐年递增,已跃居女性恶性肿瘤的首位。乳腺与甲状腺同属于垂体激素的靶器官,内分泌功能的变化与腺体疾病的发生发展有着密切的关系,乳腺组织的细胞癌变后仍具有激素受体功能,其原来所依赖的激素仍然调节着肿瘤细胞的生长。甲状腺激素在正常乳腺的发育和分化过程中起着促进作用。甲状腺激素可直接调控机体的生长和细胞的增殖,其含量的不足或过量均可改变垂体前叶和靶器官激素及化学致癌因子的代谢,因此认为乳腺癌的病程演进可能会受到甲状腺激素含量高低不同的影响。甲状腺激素对乳腺癌的作用仍不明,有可能既是肿瘤细胞形成的促进因子,也是对抗肿瘤细胞形成和生长的保护因子。研究发现促甲状腺激素受体和甲状腺激素受体在乳腺组织中有表达,反过来雌激素也影响着甲状腺的发育、生理及病理过程。本研究探讨甲状腺疾病与乳腺癌之间的相关性,了解甲状腺疾病对乳腺癌患者预后的影响。根据国家中医药管理局颁布的《中医病症疗效标准》ZY/T001.2-94将乳腺癌分为3型：肝郁痰凝证、冲任失调证、正虚毒炽证。而甲状腺疾病则属于中医“瘿病”范畴,瘿病的发生主要与情志内伤、饮食及水土失宜有关。在致病因素作用下,肝郁不舒,脾失健运,脏腑失调,经络阻滞,导致气滞、血瘀、痰凝结于颈部而发病。此外,其发病与肝肾不足、六淫外感也有一定关系。常见证候有肝气郁结、肝郁脾虚、肝肾阴虚、肝阳上亢等。甲状腺疾病和乳腺癌的发生均与肝、脾、肾三脏有密切关系,可见两者的病因病机在中医理论的角度也存在相关性。本研究通过调查伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者和甲状腺正常的乳腺癌患者的临床症状及症状分级量化值,探讨伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者的证型分布情况,了解甲状腺疾病是否影响乳腺癌患者的中医证型分布。钠碘转运体（Na+/I-Symporter, NIS）是一种糖化膜蛋白,即“碘泵”,其功能主要是借助于钠/钾交换而产生的细胞内外钠离子浓度梯度来转运血液内活性碘进入细胞,使胞内碘含量浓聚为血浆的20-100倍。NIS浓聚碘是甲状腺激素生物合成、诊断甲状腺核素显像以及甲亢、甲状腺肿瘤放射性碘治疗的基础。已经证实哺乳期的乳腺导管细胞上表达NIS并能浓聚碘,研究发现约85%的ER阳性乳腺癌及其转移组织细胞表面存在大量NIS,可主动将血液中的碘转运到乳腺癌组织,使其碘浓聚远高于正常组织,并发现87%的浸润性乳腺癌和83%的导管内癌表达NIS,而正常乳腺组织无NIS表达,但乳腺癌组织摄碘能力并没因为NIS表达的增加而增加。用放射性碘治疗恶性肿瘤的是肿瘤综合治疗的方法之一,而放射性碘发挥杀伤肿瘤细胞效应的基础是肿瘤细胞必须具有摄碘能力,但乳腺癌组织摄取碘的能力较低,使放射性碘治疗难以发挥效应。研究发现催乳激素、雌激素、cAMP刺激物、维甲酸类,糖皮质激素通过增加NIS基因表达以增强乳腺癌细胞的碘摄取。昆布（Thallus japonica）是大叶藻科植物大叶藻的全草,俗称“海带”,具有软坚散结、利水泄热等功效,昆布是一种含碘量很高的海藻,碘对维持甲状腺与乳腺组织细胞的正常功能具有重要作用。昆布中含有很多活性成分,它的大部分活性成分与它的多糖成分关系密切,目前对昆布多糖的研究越来越受到重视。昆布多糖是一种β-1,3葡聚糖的聚合物,可以通过激活巨噬细胞,产生细胞毒性作用,抑制肿瘤细胞增殖而杀伤肿瘤细胞；也可以通过抑制肿瘤血管生成而抑制肿瘤生长。本课题主要研究昆布多糖对乳腺癌细胞（MCF-7） NIS基因和蛋白表达的影响,并探讨其与细胞摄碘功能之间的关系。第一部分乳腺癌与甲状腺疾病关系的临床研究目的调查乳腺癌患者中甲状腺疾病的发病率,通过与对照组中甲状腺疾病的发病率比较,初探乳腺癌与甲状腺疾病之间的关系；初步了解甲状腺疾病对乳腺癌患者预后的影响。方法采用临床非随机对照研究的方法,选取我院可手术乳腺癌患者100例作为乳腺癌组,选取体检中心体检者100例作为对照组,分别接受甲状腺彩超、甲状腺抗体2项（TPOAb、TgAb）及甲功5项（TT3、TT4、FT3、FT4、TSH）检查,分别统计两组患者的TT3、TT4、FT3、FT4、TSH值,TPOAb及TgAb阳性率,甲状腺左右叶体积,甲状腺疾病的发病率。分别统计伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者及甲状腺正常的乳腺癌患者的病理及生物学特征。分别统计两组患者的年龄、月经状况、体重指数（BMI）等基线特征。结果乳腺癌组和对照组的甲状腺左右叶体积大小比较,差异无统计学意义（P>0.05）；两组患者甲状腺疾病的总发病率分别为62%和38%,差异有统计学意义（P<0.05）；两组患者之间的TT3、TT4、FT3、FT4、TSH值比较,差异均无统计学意义（P>0.05）；两组患者之间的甲状腺单发结节、甲状腺腺瘤、甲状腺囊腺瘤、甲状腺囊肿、桥本氏甲状腺炎、甲亢、甲减、亚临床甲亢、亚临床甲减的发病率比较,差异均无统计学意义（P>0.05）；与对照组相比较,乳腺癌组的甲状腺多发结节、结节性甲状腺肿的发病率高,差异有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较,乳腺癌组的TPOAb和TgAb性的发病率高,差异有统计学意义（P<0.05）；与甲状腺正常的乳腺癌患者相比较,伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者的Her-2阳性的表达率高,Ki-67>30%的增殖率增高,差异均有统计学意义（P<0.05）；两组的区域淋巴结、组织学分级、病理分期、脉管癌栓、雌激素受体、孕激素受体等病理特征比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。两组患者的年龄、月经状况、BMI等基线特征比较,差异均无统计学意义（P>0.05）；结论乳腺癌组的甲状腺疾病总发病率高于对照组；乳腺癌患者的甲状腺多发结节、结节性甲状腺肿的发病率较高,提示乳腺癌患者多伴发甲状腺病理形态方面的改变；乳腺癌组TPOAb及TgAb阝日性率高,提示乳腺癌与自身免疫性甲状腺疾病可能相关；伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者Her-2阳性的表达率较高,Ki-67增殖率较高,提示可能预后较差；而两组的区域淋巴结、组织学分级、病理分期、脉管癌栓、雌激素受体、孕激素受体等病理特征比较,差异均无统计学意义。尚需进一步随访明确甲状腺疾病对乳腺癌患者预后的影响。第二部分伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者中医证型分布研究目的探讨同时伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者中医证型的分布情况,并进一步比较伴发甲状腺疾病组和甲状腺正常组的乳腺癌中医证型的差异,初探甲状腺疾病是否影响乳腺癌中医证型的分布。方法乳腺癌患者入院时填写症状调查表,分别统计伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者及甲状腺正常的乳腺癌患者的中医证型分布情况及症状分级量化值。结果伴随甲状腺疾病的乳腺癌组中,肝郁脾虚证占50%,其次是肾阴虚（19.35%）、血瘀证（16.13%）、肾阳虚（14.52%）。甲状腺正常的乳腺癌组中,肝郁脾虚证占57.89%,其次是血瘀证（21.05%）、肾阴虚（10.53%）、肾阳虚（10.53%）。两组之间的各证型分布,差异均无统计学意义（P>0.05）。两组乳腺癌患者各中医证型的症状分级量化值比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论甲状腺疾病对乳腺癌患者的中医证型分布无明显影响。两组患者的症状分级量化值比较,无明显差异。第三部分昆布多糖对乳腺癌MCF-7细胞钠碘转运体的基因和蛋白表达及摄碘率的影响目的探讨掌状昆布提取物昆布多糖对乳腺癌细胞株MCF-7钠碘转运体（NIS）基因、蛋白表达和摄碘功能的影响,为昆布多糖辅助同位素早期诊断和治疗乳腺癌提供理论依据。方法对乳腺癌细胞株（MCF-7）进行培养,分别给予不同浓度的昆布多糖（0,10ug/mL, 50ug/mL,100ug/mL,200ug/mL）,分别孵育24小时、48小时及72小时。采用Real-timePCR法、Western blot法检测细胞中NIS的mRNA和蛋白表达,并用125I测定细胞的摄碘能力。结果不同浓度的昆布多糖刺激乳腺癌细胞（MCF-7） 24h后,NISmRNA和蛋白的表达与空白对照组比较均增加,差异有统计学意义（P<0.05）,并与刺激浓度呈正比,各组间比较中,除100ug/ml组和200ug/ml组之间无明显差异（P>0.05）,余组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）；不同浓度的昆布多糖刺激乳腺癌细胞（MCF-7） 48h后,NISmRNA和蛋白的表达与空白对照组比较均增加,差异有统计学意义（P<0.05）,且与刺激浓度呈正比,各组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）；不同浓度的昆布多糖刺激乳腺癌细胞（MCF-7） 72h后,NISmRNA和蛋白的表达与空白对照组比较均增加,差异有统计学意义（P<0.05）,提示与刺激浓度呈正比,各组间比较中,除100ug/ml组和200ug/ml组之间无明显差异（P>0.05）,余组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。不同浓度的昆布多糖刺激MCF-7细胞48h后,与空白对照组比较,10ug/ml组的摄碘率无明显增加,差异无统计学意义（P>0.05）,随着浓度增加,摄碘率却显示明显增加,差异均有统计学意义（P<0.05）,提示与刺激浓度成正比。余组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论不同浓度的昆布多糖刺激乳腺癌细胞（MCF-7）,使NISmRNA和蛋白的表达均增加,且与刺激浓度呈正比。昆布多糖可能通过调节乳腺癌细胞NIS基因和蛋白的表达而改善细胞摄碘能力。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 文献研究
• 1 现代医学对甲状腺疾病与乳腺癌关系的研究
• 1.1 钠碘转运体与乳腺癌的关系
• 1.2 甲状腺激素与乳腺癌的关系
• 1.3 甲状腺功能亢进与乳腺癌的关系
• 1.4 甲状腺功能减退与乳腺癌的关系
• 1.5 自身免疫性甲状腺疾病与乳腺癌的关系
• 1.6 单纯甲状腺肿大与乳腺癌的关系
• 1.7 甲状腺癌与乳腺癌的关系
• 1.8 小结
• 2 中药昆布的文献研究
• 2.1 中药昆布治疗瘿病的文献研究
• 2.2 中药昆布治疗乳腺疾病的文献研究
• 2.3 昆布多糖的抗肿瘤作用研究
• 3 中医对乳腺癌的认识
• 3.1 中医对乳腺癌病因病机的认识
• 3.2 中医对乳腺癌的辨证分型
• 4 中医对甲状腺疾病的认识
• 第一部分 乳腺癌与甲状腺疾病关系的临床研究
• 1 研究目的
• 2 资料及方法
• 2.1 研究对象
• 2.2 诊断标准
• 2.3 纳入标准
• 2.4 排除标准
• 2.5 样本含量的估算
• 2.6 检测指标及检测方法
• 2.7 统计学方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第二部分 伴随甲状腺疾病的乳腺癌患者中医证型分布研究
• 1 研究目的
• 2 资料及方法
• 2.1 研究对象
• 2.2 诊断标准
• 2.3 纳入标准、排除标准
• 2.4 研究方法
• 2.5 统计学方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第三部分 昆布多糖对MCF-7细胞钠碘转运体的基因和蛋白表达及摄碘率的影响
• 1 研究目的
• 2 材料及方法
• 2.1 材料
• 2.2 Real-time PCR法
• 2.3 Western Blot分析
• 2.4 细胞摄碘率的检测
• 2.5 统计学方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 结语
• 参考文献
• 研究生在学期间发表论文情况
• 附录
• 附录一
• 附录二
• 附录三
• 附录四
• 致谢