蛇葡萄素钠体内、外协同卡铂抗小鼠肺癌Lewis细胞的作用及其机理研究

论文摘要

目的:研究AMP-Na单用及与卡铂联合用药对小鼠肺癌Lewis细胞的体内、外抗肿瘤作用,并探讨其作用机制,为AMP-Na进入临床试验提供实验依据。方法:1.应用MTT比色法测定AMP-Na单用及与卡铂联合用药对小鼠肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用。2.使用流式细胞仪（FCM）检测Lewis细胞凋亡和凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达。3.建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,观察AMP-Na单用及与卡铂联合用药对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用。结果:1.体外实验中,AMP-Na单用在一定浓度范围内对小鼠肺癌Lewis细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用,其IC50为63.1μg/ml;6.25、12.5、25、50μg/ml的AMP-Na与卡铂3.12～25μg/ml联合用药对卡铂抑制Lewis细胞的增殖作用具有协同效应,CDI＜1。2.FCM分析显示,单用AMP-Na 12.5、25、50、100μg/ml处理细胞48h后,凋亡率分别为3.91%±4.58%、4.77%±1.59%、3.80%±0.15%、13.37%±5.76%,与阴性对照组（2.66%±2.52%）比较,虽有增高,但无显著性差异（P＞0.05）;AMP-Na12.5、25、50、100μg/ml分别与卡铂25μg/ml联合应用,处理细胞48h后,其凋亡率分别为20.00%±3.54%、33.85%±0.21%、34.13%±3.91%、26.57%±3.48%,与卡铂单用组（7.55%±3.56%）比较,AMP-Na25、50、100μg/ml与卡铂25μg/ml联合应用时,凋亡率显著增高（P＜0.01）。3.AMP-Na 12.5、25、50、100μg/ml单用及与卡铂25μg/ml联合应用处理细胞48h后,Bax的表达升高,Bcl-2的表达降低（P＜0.01）,使Bcl-2/Bax比率降低。4.AMP-Na25、50、100μg/ml处理细胞12h后,与阴性对照组比较,Caspase-3的表达均明显增高（P＜0.05）;AMP-Na 12.5、25、50、100μg/ml分别加卡铂12.5μg/ml处理细胞12h后,与卡铂组比较,Caspase-3的表达均明显增高（P＜0.01）。5.体内实验中,AMP-Na单用各剂量对小鼠肺癌Lewis细胞移植性肿瘤均无明显抑制作用;AMP-Na 12.5、25、50、100μg/ml与卡铂联合应用对Lewis小鼠移植瘤具有显著的抑制作用（P＜0.01）。结论:1.体外实验中,AMP-Na单用在一定的浓度范围内抑制Lewis细胞增殖,具有浓度依赖性;AMP-Na与卡铂合用可以增强卡铂的活性,有协同抑制作用。2.流式细胞术研究显示,AMP-Na 25、50、100μg/ml协同增强卡铂25μg/ml诱导Lewis细胞凋亡的作用。3.AMP-Na单用或AMP-Na与卡铂联合用药诱导Lewis细胞凋亡的途径与降低Bcl-2/Bax比率有关。4.其诱导细胞凋亡的机理之一可能是通过激活细胞内的Caspase-3,从而促进凋亡的发生。5.体内实验证明:AMP-Na单独用药无或仅有较弱的抗肿瘤作用;而联合用药时明显增强卡铂抑制小鼠Lewis肺癌生长的作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究背景
• 立题依据
• 第1部分 蛇葡萄素钠的体外抗肿瘤作用及其机制
• 一 材料
• 二 方法
• 三 结果
• 第2部分 蛇葡萄素钠的体内抗肿瘤作用
• 一 材料
• 二 方法
• 三 结果
• 第3部分 讨论
• 第4部分 结论
• 参考文献
• 附录一：缩略词表
• 附录二：实验数据
• 附录三：Annexin V/PI双染色法分析图
• 附录四：流式检测Caspase-3的表达分析图
• 附录五：流式检测Bax的表达分析图
• 附录六：流式检测Bcl-2的表达分析图
• 附录七：体内实验图
• 在校期间研究成果
• 致谢