论文摘要
第一部分静电纺丝技术构建P3/4HB无纺支架及其对细胞生物学行为的影响目的:运用静电纺丝技术构建P3/4HB无纺支架,探讨支架拓扑结构对肌成纤维细胞生长的影响。方法:采用静电纺丝技术制备具有不同纤维直径、孔径的微米和亚微米级P3/4HB无纺支架,接种大鼠肌成纤维细胞,体外培养1周后行扫描电镜观察,沉淀法及MTT法分别检测各支架上的细胞黏附及增殖情况。结果:大鼠肌成纤维细胞在直径为1.24μm,孔径为38.3μm的微米级电纺支架上8小时的黏附率为50.37%,体外培养7天后细胞增殖数为3.54×105个/ml,与直径为0.58μm的亚微米支架上细胞增殖无明显差异,但后者细胞黏附率仅为43.30%,且限制了细胞在支架上的内向性生长,直径为57.8μm的微米支架细胞增殖数均较前二种支架低。结论:电纺支架的纤维直径和孔径等拓扑结构对肌成纤维细胞的生长具有重要的调节作用,微米电纺支架是一种适合肌成纤维细胞生长的理想三维多孔支架。第二部分氧等离子体表面改性P3/4HB无纺支架及其对细胞粘附性的影响目的:研究氧等离子体表面改性对P3/4HB无纺支架的作用。方法:氧等离子体改性P3/4HB无纺支架,改性的效能通过检测接触角及X射线光电子能谱分析进行结构表征,接种大鼠肌成纤维细胞,检测细胞黏附率以进行功能表征,并检测改性前后支架最大应力变化。结果:等离子体改性后的P3/4HB无纺支架表面氧含量增加了12.1%,C-O（C-OH）峰、COOR（COOH）峰分别增加0.2%、6.2%,接触角下降了44°,而最大应力无明显变化,改性后支架细胞黏附率较预处理组为高。结论:氧等离子体处理P3/4HB支架,可在支架表面引入-OH、-COOH等活性基团,改善材料亲水性,提高细胞黏附力,并为进一步共价接枝生物活性单体创造了条件。第三部分Ⅰ胶原蛋白化学接枝P3/4HB体外构建组织工程复合支架目的:构建Ⅰ型胶原蛋白-P3/4HB复合支架,并探讨其对细胞生长的影响。方法:氧等离子体改性P3/4HB无纺支架,引入活性基团,通过化学接枝技术,将Ⅰ型胶原蛋白接枝在P3/4HB无纺支架表面,采用X射线光电子能谱分析及茚三酮法定性、定量检测接枝效果;体外接种大鼠肌成纤维细胞,MTT法检测复合支架的细胞增殖情况以进行功能表征。结果:电子能谱分析结果显示,接枝后支架表面出现酰胺基的谱峰;复合支架在磷酸盐缓冲液中浸洗48h后,胶原涂层含量无明显变化;与对照组比较,肌成纤维细胞在复合支架上增殖较多。结论:通过化学缩合反应,可有效制备Ⅰ型胶原蛋白-P3/4HB复合支架,接枝的胶原涂层具有稳定的生物学效应,可显著促进细胞增殖。
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标签：组织工程论文; 静电纺丝论文; 细胞黏附论文; 细胞增殖论文; 等离子体论文; 表面改性论文; 胶原蛋白论文; 接枝论文;