论文摘要
兴奋性突触突触后亲离子型谷氨酸受体主要是由AMPA(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate,AMPA)受体和N-甲基-D-门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体组成,二者协同完成兴奋性突触的传递和介导复杂的生理功能。神经元上存在“静默突触”(silent synapse),即那些对突触前谷氨酸释放无反应的只含NMDA受体而缺少AMPA受体的突触。静默突触的活化是突触可塑性的细胞机制之一。NMDA受体通道是由NR1、NR2和/或NR3亚单位组成,AMPA受体主要有GuR1、GluR2、GluR3、GluR4四个亚单位。一般认为AMPA受体与NMDA受体的共定位是有活性的兴奋性突触存在的形态学证据。为了研究神经元发育过程中,活性突触的形成过程,我们采用重组DNA转染、活细胞表面受体双重染色方法,研究了含NR2B亚单位的NMDA受体(下文简称NR2B-NMDAR)分别与含GluR1亚单位的AMPA受体(下文简称GluR1-AMPAR)及含GluR2亚单位的AMPA受体(下文简称GluR2-AMPAR)在不同发育阶段的培养海马神经元树突上的表面表达及共定位。 在本研究中我们以FLAG-NR2B、GFP-GluR1、GFP-GluR2及CFP-Actin的表达载体共转染原代培养5d的大鼠海马神经元,分别用抗FLAG单克隆抗体和山羊抗鼠二抗-Cy3(红色荧光)、抗GFP多克隆抗体和山羊抗兔二抗-Alex488(绿色荧光)作活细胞双重
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