论文摘要
目的（1）研究影响腺样囊性癌（adenoid cystic carcinoma,ACC）患者预后的相关因素。（2）观察神经生长因子（nerve growth factor,NGF）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、增殖细胞核抗原标记物（Ki-67）在ACC组织的表达情况,并计数ACC组织中的微血管密度（MVD）,分析上述指标与ACC复发、侵袭、转移特性的相关性。（3）探讨生长因子抑制剂苏拉明（Suramin）抑制ACC细胞生长增殖的可行性。方法（1）回顾性分析1988年1月至2005年10月在广西医科大学附属口腔医院行手术治疗并经病理确诊的63例ACC患者临床资料,采用乘积极限法（Product limit method）估计各时点的生存率,并绘制Kaplan-Meier生存曲线,用Log-Rank检验法比较各组间的差异,采用Cox比例风险回归模型对影响ACC患者预后的多项因素进行分析。（2）以上述63例ACC患者术后病理组织为研究对象,按照患者不同的临床表现、TNM分期、病理类型等指标进行分组,采用免疫组化S-P法染色对NGF、VEGF、Ki-67表达指标进行检测,并通过CD34标记癌组织血管内皮细胞,计数ACC组织的微血管密度（MVD）。（3）MTT法检测苏拉明对腺样囊性癌ACC-2和ACC-M细胞生长的影响,采用蛋白质免疫印迹Western-Blot法检测NGF与VEGF在ACC细胞中的表达情况。通过酶联免疫检测仪（D5032型）分析MTT法检测结果,并绘制细胞生长抑制曲线;通过Gel Doc2000电泳图像系统分析Western-Blot蛋白电泳结果,分析结果采用灰度值表示,统计分析采用组间t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。结果（1）63例ACC患者术后3、5、10年的无瘤生存率分别为77.64%、68.31%、39.26%,总生存率分别为65.73%、57.17%、38.92%。Cox比例风险回归模型多因素分析结果显示:TNM分期、病理类型、神经侵袭、手术方式、放＼化疗、局部复发及远处转移是影响ACC患者预后的重要因素。（2）免疫组化结果发现NGF、VEGF、Ki-67在ACC大部分组织中均有不同程度的表达,并发现NGF在沿神经周围分布的肿瘤细胞染色强度明显高于远离神经者;VEGF在有神经侵袭组、实性型组、术后复发组的表达强度高于无神经侵袭组、腺样一管状型组、术后无复发组;Ki-67在实性型组及术后复发组的表达高于腺样-管状型组及术后无复发组;MVD在实性型组的计数值高于腺样-管状型组。（3）MTT检测显示ACC细胞经苏拉明作用后其生长受到明显抑制,抑制强度呈药物浓度依赖性;Western-Blot结果显示NGF与VEGF在ACC细胞的表达下降,表达量与药物浓度密切相关,随浓度增加而减少,与空白组相比表达水平降低。结论（1）TNM分期、病理类型、神经侵袭、局部复发及远处转移是影响ACC患者预后的危险因素,能缩短术后生存时间;手术加放/化疗是保护因素,说明综合治疗具有重要的临床意义,是延长ACC患者术后生存时间的主要因素;（2）NGF、VEGF、Ki-67在ACC组织中表达增高与其预后密切相关,可能在ACC复发、侵袭、转移的发展过程中起重要作用,介导或促进了ACC肿瘤细胞的复发、侵袭、转移过程;（3）苏拉明可抑制生长因子在ACC细胞中的表达,从而抑制ACC细胞的生长增殖,干扰ACC复发、侵袭、转移过程的发生。