论文摘要
目的通过高血压脑出血肝阳化风证、高血压病肝阳上亢证及健康人对照组外周血单个核细胞的双向凝胶电泳图谱的建立,鉴定并分析差异表达的蛋白质,并在蛋白质表达图谱研究的基础上,比较不同证中谷胱甘肽S-转移酶omega 1（GSTO1）量的表达,以探讨同病异证相关证高血压病肝阳上亢证与高血压脑出血肝阳化风证证本质内涵。方法用淋巴细胞分离液分离出高血压脑出血肝阳化风证组、高血压病肝阳上亢证组及健康人对照组外周血单个核细胞,采用二维凝胶电泳分离三组总蛋白质,获得差异表达蛋白质,制备蛋白质组表达图谱,PDQuest软件分析,并通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）和数据库对差异表达的蛋白质分析鉴定。采用逆转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）法检测正常组,肝阳上亢证组,肝阳化风证组GSTO1基因表达水平。结果1.各组PBMCs总蛋白2-DE图谱的建立及相同和差异蛋白质的识别:建立了高血压病肝阳上亢证,高血压脑出血肝阳化风证及健康对照外周血单个核细胞蛋白质表达图谱;高血压脑出血肝阳化风证与高血压病肝阳上亢证比较有6个相同表达的蛋白质,鉴定出6个共6种蛋白质。18个差异表达蛋白质,鉴定出16个共16种蛋白质。鉴定出的蛋白质根据其功能涉及细胞骨架蛋白、代谢酶类、细胞信号转导蛋白、抗氧化蛋白、血液蛋白等。2..差异蛋白验证结果:RT-PCR法证实GSTO1在三组的表达水平与2-DE结果一致:与正常组相比,肝阳上亢证与肝阳化风证差异蛋白GSTO1表达量均明显增加（p＜0.05）,肝阳上亢证组与肝阳化风证组比较,后者GSTO1表达量又明显高于肝阳上亢证组（p＜0.05）。结论1.初步建立了高血压病肝阳上亢证,高血压脑出血肝阳化风证及健康对照外周血单个核细胞蛋白质表达图谱。2.高血压病肝阳上亢证与高血压脑出血肝阳化风证具有相同及差异表达的蛋白质,提示同病相关证有相同的物质基础,但同病异证虽属同一病,不同阶段（不同证型）也有不同的本质内涵。3.GSTO1的RT-PCR验证结果与2-DE结果一致:肝阳上亢证与肝阳化风证均有GSTO1表达,且表达量具有显著差异性,提示“肝阳上亢证”与其相关证“肝阳化风证”具有相同的物质基础;而肝阳上亢证与肝阳化风证为同一疾病不同阶段（不同证型）,两者GSTO1表达量的显著差异,提示两证也有不同的本质内涵。为“肝阳化风证”证本质的深入研究奠定了基础。
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