克氏原螯虾对饲料中蛋白质和能蛋比需求的研究

论文摘要

一、实验测定了两种规格(27.0±2.0、12.0±2.0g)野生克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的肌肉生化成分、消化酶和免疫酶活性等。结果表明:大规格虾的肌肉能量以及除肌肉外其它部分的能量均高于小规格虾,肌肉中天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸的含量均高于小规格虾;肝胰脏和肠道内蛋白酶、淀粉酶活力随pH值的增大均呈现先上升后下降的变化规律,两种规格虾肠道中蛋白酶和淀粉酶以及小规格虾肝胰脏中淀粉酶的最适pH均为7.2,而小规格虾肝胰脏中蛋白酶最适pH则为7.6;大规格虾血清中血蓝蛋白的含量高于小规格虾,而血清和肝胰脏中超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶的活性则均低于小规格虾。二、试验以野生克氏原螯虾肌肉生化成分为依据,配置5种不同蛋白梯度、等能的半精制实验饲料,蛋白质水平分别为27、30、33、36和39%,饲养克氏原螯虾(8.41±1.12g)60天,研究饲料蛋白质水平对克氏原螯虾生长指标、生化成分、消化酶、免疫酶活性以及溶菌酶和HSP70基因mRNA的表达量的影响。1、蛋白水平27%、33%和39%三组成活率最低,显著低于30%和36%组;相对增重率和相对增长率均随着蛋白质水平的增加具有显著增大趋势,而蛋白水平从33%到36%,相对增重率是没有显著性差异;蛋白水平从36%到39%,相对增长率没有显著性差异(P<0.05)。27%组的饲料系数是2.08,30%组的饲料系数为1.80,两者均显著高于其它三组(P<0.05)。33%组的Lys和Arg的含量显著高于27%和39%两组(P<0.05),其它氨基酸的含量均没有显著差异(P>0.05)。2、蛋白水平为30、36和39%时,肝胰脏纤维素酶的活性最低,蛋白为33%时,肝胰脏的纤维素酶活性最高(P<0.05);蛋白水平为30%时,肝胰脏蛋白酶活性显著高于其它几组,而蛋白水平为36和39%为最低(P<0.05);随着蛋白质水平增加,肝胰脏蛋白酶活性呈现明显的升高趋势,36和39%时为最高,两水平没有显著性差异(P>0.05);肠道中的纤维素酶,淀粉酶和蛋白酶的活性都是随着蛋白水平增加出现先增后降的趋势,三种酶分别在蛋白水平为30%、30%和36%达到最高峰(P<0.05)。蛋白质水平影响克氏原螯虾生长与肝胰脏和肠道蛋白酶活性具有极显著正相关性,相关系数分别为0.669和0.936。3、随着饲料蛋白质水平的增高,肝胰脏SOD、NOS和血清NOS均呈现先降低后升高的趋势,当蛋白质水平达到33%时,酶活均达到最低;肝胰脏和血清溶菌酶活性以及血清中血蓝蛋白的含量呈现先升后降趋势;血清SOD呈现下降的趋势;蛋白质水平影响克氏原螯虾肌肉精氨酸组成与血清和肝胰脏NOS活性具有显著负相关性,相关系数分别为0.863和0.762。4、33%组肝胰脏和肌肉中溶菌酶mRNA基因表达量均显著性高于其它两组(27%和39%);溶菌酶mRNA在肝胰脏的表达量均显著性高于肌肉;27%组克氏原螯虾肝胰脏和肌肉中的HPS70基因的表达量高于其它两组(33%和39%),且在肝胰脏的表达量均显著性高于肌肉。综上所述,在本试验条件下,克氏原螯虾对饲料中蛋白质的需求量为33%~36%。三、试验以野生克氏原螯虾肌肉生化成分为依据,配置5种不同能蛋比水平的等蛋白的半精制实验饲料,饲料蛋白水平为35%,水平分别为32、34、36、38和40MJ/kg,饲养克氏原螯虾(8.41±1.12g)60天,研究饲料能蛋比(E/P)水平对克氏原螯虾生长指标、生化成分、消化酶、免疫酶活性以及能量分配和溶菌酶、HSP70基因mRNA的表达量的影响。1、成活率、相对增重率和相对增长率均是随着能蛋比水平的升高呈现先升高后降低的趋势,均是在36 MJ/kg时呈现最高水平,显著高于其它几组(P<0.05),而饲料系数则是在36 MJ/kg时显著低于其它几组。不同饲料能蛋比水平对克氏原螯虾肌肉中的水分、蛋白质和灰分的含量没有显著性差异(P>0.05);随着能蛋比水平上升,肌肉中脂肪的含量出现逐渐上升的趋势。36 MJ/kg组的Met和Arg的含量显著高于32 MJ/kg和40 MJ/kg两组(P<0.05)。2、随着能蛋比水平升高,克氏原螯虾体内的肝胰脏纤维素酶、淀粉酶与蛋白酶和肠道纤维素酶活均呈现先上升后下降的趋势,分别为36、36、36和34 MJ/kg达到最高水平;肠道中淀粉酶活性呈现先降低后上升的趋势,分别在36 MJ/kg和40 MJ/kg呈现最低值和最高值(P<0.05);各组克氏原螯虾肠道蛋白酶活没有显著性差异(P>0.05)。3、随着饲料中能蛋比水平的上升,肝胰脏溶菌酶、NOS和血清中SOD活性以及血蓝蛋白含量呈现先上升后下降的趋势;肝胰脏SOD活性呈现下降趋势; 34 MJ/kg和36MJ/kg两组血清NOS显著高于其它三组。4、随着饲料中能蛋比水平上升,克氏原螯虾摄入的能量呈现先升高后降低的趋势,36 MJ/kg和38MJ/kg时摄入能达到了最高值,显著高于其它几组(P<0.05),分别为52.63和51.19KJ;G/C和F/C呈现先升高后降低的趋势;而R/C、U/C和E/C则呈现先降低后升高的趋势。5、40MJ/kg组肝胰脏和肌肉中溶菌酶、HSP70mRNA基因表达量均显著性高于其它两组(32MJ/kg和36MJ/kg)(P<0.05),且肝胰脏均显著性高于肌肉中的。综上所述,在本实验条件下,克氏原螯虾对饲料中能蛋比的需求量为34~36MJ/kg。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 1 克氏原螯虾的生物学特性和养殖前景
• 1.1 克氏原螯虾的生物学特性
• 1.2 克氏原螯虾的养殖情况
• 2 虾类蛋白质和生物能量的研究进展
• 2.1 蛋白质的生理功能
• 2.2 虾类蛋白质需求量
• 2.3 虾类生物能量的研究概况
• 2.3.1 虾类的能量收支方程
• 2.3.2 虾类的能量收支平衡的建立
• 2.4 蛋白质和能量对虾体消化酶的影响
• 2.5 饲料蛋白质水平对虾体消化酶的影响
• 2.6 能量水平对虾体消化酶的影响
• 2.7 饲料蛋白质水平对虾体免疫功能的影响
• 3. 溶菌酶
• 4. HSP70
• 5. 本研究的目的和意义
• 第一部分 野生克氏原螯虾的肌肉生化成分、消化酶活性和免疫酶活性研究
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 肠道和肝胰脏消化酶活性测定
• 1.2.2 肌肉常规营养成分测定
• 1.2.3 免疫酶活性测定
• 1.3 数据处理
• 2 结果
• 2.1 肌肉生化成分
• 2.2 消化酶
• 2.3 免疫酶
• 3 讨论
• 3.1 肌肉品质
• 3.2 消化酶
• 3.3 免疫酶
• 第二部分 克氏原螯虾对蛋白质需求量的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 实验饲料
• 1.2 实验用虾来源及驯养
• 1.3 实验用虾的饲养及其管理
• 1.4 样品分析
• 生长性能指标测定
• 饲料和肌肉营养成分测定
• 消化酶的分析方法
• 酶活力的测定
• 免疫酶活力的测定
• 1.5 数据统计
• 2 结果
• 2.1 饲料蛋白水平对克氏原螯虾生长和饲料利用的影响
• 2.2 饲料蛋白水平对克氏原螯虾消化酶活性的影响
• 2.3 生长与肝胰脏和肠道蛋白酶活性相关性分析
• 2.4 饲料蛋白水平对克氏原螯虾肌肉成分组成的影响
• 2.5 饲料蛋白水平对克氏原螯虾肌肉的氨基酸含量的影响
• 2.6 饲料蛋白水平对克氏原螯虾免疫酶活性的影响
• 2.7 肌肉中精氨酸与肝胰脏和血清中NOS 活性的相关性分析
• 3 讨论
• 3.1 饲料蛋白水平对克氏原螯虾生长和饲料利用的影响
• 3.2 饲料蛋白水平对克氏原螯虾肌肉营养成分的影响
• 3.3 饲料蛋白水平对克氏原螯虾肝胰脏和肠道消化酶活性的影响
• 3.5 饲料蛋白水平对克氏原螯虾免疫酶活性的影响
• 第三部分 克氏原螯虾对能量蛋白比需求量的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 实验饲料
• 1.2 实验用虾来源及驯养
• 1.3 实验用虾的饲养及其管理
• 1.4 样品分析
• 生长性能指标测定
• 饲料和肌肉营养成分测定
• 消化酶的分析方法
• 酶活力的测定
• 免疫酶活力的测定
• 能量收支
• 1.5 数据统计
• 2 结果
• 2.1 不同饲料能蛋比水平对克氏原螯虾生长和饲料利用的影响
• 2.2 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾消化酶活性的影响
• 2.3 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾肌肉成分组成的影响
• 2.4 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾肌肉的氨基酸含量的影响
• 2.5 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾免疫酶活性的影响
• 2.6 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾能量收支的影响
• 3 讨论
• 3.1 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾生长和饲料利用的影响
• 3.2 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾肌肉营养成分的影响
• 3.3 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾肝胰脏和肠道消化酶活性的影响
• 3.4 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾免疫酶活性的影响
• 3.5 饲料能蛋比水平对克氏原螯虾能量收支的影响
• 第四部分 饲料能蛋比和蛋白质水平对克氏原螯虾溶菌酶及HSP70 基因mRNA 表达的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 实验用虾来源及驯养
• 1.2 样品分析
• 1.3 荧光定量表达RT-PCR
• 1.4 溶菌酶活性和蛋白含量测定
• 1.5 统计分析
• 2 结果
• 2.1 不同蛋白水平、能蛋比水平对克氏原螯虾肌肉和肝胰脏溶菌酶基因mRNA 表达的影响
• 2.2 蛋白水平、能蛋比水平对克氏原螯虾肝胰脏溶菌酶蛋白质表达的影响
• 2.3 不同蛋白水平、能蛋比水平对克氏原螯虾肌肉和肝胰脏HSP70 基因表达的影响
• 3 讨论
• 3.1 同一能蛋比或蛋白质水平肝胰脏和肌肉中溶菌酶mRNA 的表达量
• 3.2 不同蛋白水平、能蛋比水平对克氏原螯虾肌肉和肝胰脏溶菌酶基因表达的影响
• 3.3 不同蛋白水平、能蛋比水平对克氏原螯虾肌肉和肝胰脏HSP70 基因表达的影响
• 小结
• 致谢
• 在读期间发表的文章
• 参考文献