王敏:米曲霉乳糖酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达论文

王敏:米曲霉乳糖酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达论文

本文主要研究内容

作者王敏,席志文,黄琳娜,惠丰立(2019)在《米曲霉乳糖酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达》一文中研究指出:为获得高活性的乳糖酶制剂,根据米曲霉乳糖酶基因序列以及宿主细胞乳酸克鲁维酵母GG799密码子的偏爱性,对米曲霉乳糖酶基因进行优化。将已优化的米曲霉乳糖酶lacA基因片段插入到乳酸克鲁维酵母GG799表达载体pKLAC1中,构建重组载体p KLAC1-lacA,用电脉冲法将SacⅡ酶线性化的重组质粒转入乳酸克鲁维酵母GG799中。经过5 mmol/L酵母碳基础培养基(yeast carbon base,YCB)活性筛选,全细胞聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定,最后获得了一株多拷贝整合的基因工程菌株lacA-1。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)和薄层层析分析(thin-layer chromatography,TLC),该重组菌株可胞外分泌乳糖酶,并具有生物活性。摇瓶发酵培养120 h,酶活力最高达到120.65 U/mL。本研究成功地将米曲霉乳糖酶基因在乳酸克鲁维酵母GG799中表达,获得的重组菌株lacA-1可胞外分泌的乳糖酶并有较高的乳糖酶活性,试验结果为利用乳酸克鲁维酵母GG799表达系统规模化生产乳糖酶奠定基础。

Abstract

wei huo de gao huo xing de ru tang mei zhi ji ,gen ju mi qu mei ru tang mei ji yin xu lie yi ji su zhu xi bao ru suan ke lu wei jiao mu GG799mi ma zi de pian ai xing ,dui mi qu mei ru tang mei ji yin jin hang you hua 。jiang yi you hua de mi qu mei ru tang mei lacAji yin pian duan cha ru dao ru suan ke lu wei jiao mu GG799biao da zai ti pKLAC1zhong ,gou jian chong zu zai ti p KLAC1-lacA,yong dian mai chong fa jiang SacⅡmei xian xing hua de chong zu zhi li zhuai ru ru suan ke lu wei jiao mu GG799zhong 。jing guo 5 mmol/Ljiao mu tan ji chu pei yang ji (yeast carbon base,YCB)huo xing shai shua ,quan xi bao ju ge mei lian shi fan ying (polymerase chain reaction,PCR)jian ding ,zui hou huo de le yi zhu duo kao bei zheng ge de ji yin gong cheng jun zhu lacA-1。jing shi er wan ji liu suan na -ju bing xi xian an ning jiao dian yong (sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)he bao ceng ceng xi fen xi (thin-layer chromatography,TLC),gai chong zu jun zhu ke bao wai fen bi ru tang mei ,bing ju you sheng wu huo xing 。yao ping fa jiao pei yang 120 h,mei huo li zui gao da dao 120.65 U/mL。ben yan jiu cheng gong de jiang mi qu mei ru tang mei ji yin zai ru suan ke lu wei jiao mu GG799zhong biao da ,huo de de chong zu jun zhu lacA-1ke bao wai fen bi de ru tang mei bing you jiao gao de ru tang mei huo xing ,shi yan jie guo wei li yong ru suan ke lu wei jiao mu GG799biao da ji tong gui mo hua sheng chan ru tang mei dian ding ji chu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自食品研究与开发的王敏,席志文,黄琳娜,惠丰立,发表于刊物食品研究与开发2019年07期论文,是一篇关于乳糖酶论文,乳酸克鲁维酵母论文,分泌表达论文,米曲霉论文,表达载体论文,食品研究与开发2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自食品研究与开发2019年07期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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