骆驼蓬茎叶中两种生物碱提取分离工艺及相关生物碱纯化研究

论文摘要

骆驼蓬属于蒺藜科骆驼蓬属植物,是蒺藜科中最为原始的种群,为西北地区的维吾尔族、哈萨克族、蒙古族等少数民族沿用已久的药物,主要用于治疗咳嗽气喘、风湿痹痛、无名肿毒、皮肤瘙痒等症,全株皆可药用。目前,国内外学者在骆驼蓬的化学成分及其生物活性方面做了大量的研究,得到了许多具有活性的化合物。然而,这些研究主要集中在种子的研究,对茎叶的研究很少,大量的骆驼蓬茎叶资源没有得到合理的开发利用。并且,骆驼蓬茎叶中喹唑啉类生物碱含量较高,这类生物碱具有很好的药用活性,例如：修复受损神经、治疗糖尿病、扩张血管等。因此,研究骆驼蓬茎叶中的主要生物碱成分（鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱）的提取分离纯化工艺是十分必要的。本论文重点研究了骆驼蓬茎叶中鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱的提取、分离纯化工艺及相关生物碱成分的分离纯化,主要研究内容和成果如下：1.骆驼蓬茎叶中鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱超声提取工艺研究以骆驼蓬茎叶为原料、鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱得率为指标,在单因素试验的基础上,通过正交试验优化提取工艺参数。研究了乙醇浓度、提取时间、提取温度、料液比、提取次数对鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱得率的影响。实验结果表明,乙醇的影响达显著水平,提取时间和提取温度则无显著影响。经优化后的提取工艺参数为：温度40℃、时间30min、料液比1：16、乙醇浓度60%、提取次数3次。在此工艺下鸭嘴花碱得率为0.43+0.01mg·g-1,鸭嘴花酮碱得率为1.52±0.05 mg·g-1。2.大孔吸附树脂对鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱的富集分离工艺研究采用静态吸附试验模型,以鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱的吸附率和解吸率为指标,从LSD001、LSA-40、D101三种大孔树脂中筛选出D101大孔吸附树脂为纯化鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱的树脂。分别从样品pH值、浓度、上样流速、上样量、吸附时间、乙醇洗脱剂浓度、乙醇pH值、洗脱速度、乙醇流量等方面优化了D101树脂对鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱的吸附和洗脱工艺条件。得到最佳的吸附条件是：上样溶液pH为9、样品浓度为0.6 g·mL-1、上样液体积与树脂重量比为22：1、上样速度为2 BV-h-1、吸附时间为8 h；最佳洗脱条件为：鸭嘴花碱,pH 5的30%乙醇作为洗脱剂、洗脱流速为3 BV-h-1、洗脱剂用量为6 BV；鸭嘴花酮碱,pH5的50%乙醇作为洗脱剂、洗脱流速为2 BV·h-1、洗脱剂用量为5 BV。在最佳纯化工艺条件下鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱的转移率都达到了70%以上,并且富集后鸭嘴花碱的浓度增加了70多倍,鸭嘴花酮碱的浓度增加了近40倍,工艺稳定可靠。3.骆驼蓬茎叶中生物碱类化学成分的分离纯化研究利用大孔树脂柱层析、硅胶柱层析、薄层制备、重结晶等分离纯化技术从骆驼蓬茎叶的乙醇提取物中得到6个化合物。采用混合熔点法和标准品对照等方法确定6个化合物分别为：鸭嘴花碱（Ⅰ）,脱氧鸭嘴花碱（Ⅱ）,去氢骆驼蓬碱（Ⅲ）,骆驼蓬碱（Ⅳ）,鸭嘴花酮碱（Ⅴ）和脱氧鸭嘴花酮碱（Ⅵ）。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 前言
• 1.2 骆驼蓬化学成分研究进展
• 1.2.1 生物碱类化合物
• 1.2.2 黄酮类化合物
• 1.2.3 三萜类化合物
• 1.2.4 其它成分
• 1.3 鸭嘴花酮碱及其类似物的研究进展
• 1.3.1 鸭嘴花酮碱的生源途径及其类似物的结构
• 1.3.2 鸭嘴花酮碱及其类似物的资源分布
• 1.3.3 药理学和毒理学研究
• 1.3.4 鸭嘴花酮碱及骆驼宁碱A全合成
• 1.4 立题依据和研究目的
• 第二章 超声提取工艺研究
• 2.1 前言
• 2.2 材料与试剂
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 仪器与试剂
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 鸭嘴花碱和鸭嘴花酮碱含量测定
• 2.3.2 提取溶剂的选择
• 2.3.3 单因素试验
• 2.3.4 正交试验
• 2.3.5 验证试验
• 2.4 结果与分析
• 2.4.1 不同提取溶剂的选择
• 2.4.2 单因素试验
• 2.4.3 正交试验结果
• 2.4.4 最佳工艺条件验证
• 2.5 结论与讨论
• 2.5.1 最佳提取条件
• 2.5.2 提取因子对生物碱提取的影响
• 2.5.3 该工艺的优点
• 第三章 大孔树脂富集分离工艺研究
• 3.1 前言
• 3.2 材料与试剂
• 3.2.1 样品的制备
• 3.2.2 仪器和试剂
• 3.3 试验方法
• 3.3.1 生物碱的测定方法
• 3.3.2 各种参数的计算方法
• 3.3.3 大孔吸附树脂预处理
• 3.3.4 大孔树脂的静态筛选试验
• 3.3.5 D101型大孔吸附树脂富集分离两种生物碱的工艺优化
• 3.3.6 验证试验
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 大孔树脂静态吸附试验结果
• 3.4.2 D101型大孔树脂分离两种生物碱的吸附条件优化
• 3.4.3 D101型大孔树脂纯化两种生物碱的洗脱条件优化
• 3.4.4 最佳工艺验证试验
• 3.5 结论与讨论
• 3.5.1 最佳工艺条件
• 3.5.2 工艺特点
• 第四章 生物碱成分的分离纯化与鉴定
• 4.1 前言
• 4.2 材料和试剂
• 4.2.1 材料
• 4.2.2 试剂
• 4.2.3 仪器
• 4.3 试验方法
• 4.3.1 化合物Ⅰ～Ⅳ的分离
• 4.3.2 化合物Ⅴ和Ⅵ的分离
• 4.4 结果与分析
• 4.4.1 化合物纯度检测及定性鉴定实验
• 4.4.2 化合物结构解析
• 4.5 结论与讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介