论文摘要
近年来,组织工程技术迅速崛起并不断发展,为牙周重建提供了全新的方法和思路,不仅在牙周治疗中意义重大,还可能在完善种植体—骨界面之间的生物仿生研究中有极其重要的影响。聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)作为一种生物相容性良好的人工合成生物材料,在软骨、骨和韧带组织工程的临床应用中显示出巨大的优势和应用潜力。本研究即应用组织工程技术原理,选用具有三维立体结构的聚羟基乙酸(PGA)作为人牙周韧带细胞黏附生长的支架,观察免疫缺陷动物体内新生组织的形成,探讨PGA支架应用于牙周组织工程的可能,为组织工程化牙周膜的实现奠定基础。 1.材料和方法: 取临床因正畸治疗而拔除的双尖牙,常规二维培养人牙周韧带细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)。取传代至第四代的细胞,消化离心制成高密度细胞悬液,多次沉淀法接种于预处理好的聚羟基乙酸(PGA)无纺网三维支架上,体外共培养7天后种植到裸鼠背部皮下,分别于1、2、3、4周取材进行大体观察及HE染色、Masson’s染色,Ⅰ型胶原免疫组织化学染色,定量及定性分析新生胶原,并观察新生血管的生成。 2.结果和结论: PDLCs与PGA无纺网共培养物体内植入术后,裸鼠行动活跃,体温饮食正常。取材结果显示随植入时间增加,PGA不断降解,PDLCs继续大量增殖,2周即可见胶原纤维生成,Ⅰ型胶原表达阳性。与细胞空白侧的对照切片进行对比定量分析的结果表明胶原来源于人牙周韧带细胞。此外新生组织中可见毛细血管大量生成,其数目在2周时即可达到基本稳定水平。进一步证明PGA无纺网支架与人牙周膜韧带细胞(PDLCs)有良好的生物相容性,在体内环境中能够有利于新生胶原及血管的形成。
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