论文摘要
背景和目的:卵巢癌的致死率在妇科恶性肿瘤中最高,这与卵巢癌容易出现早期腹腔播散转移以及耐药有关。因此,在做好早期筛查的情况下研究者也在寻找新的方法以更有效的治疗卵巢癌。目前化疗仍是卵巢癌治疗的重要手段,静脉以及腹腔联合应用顺铂和紫杉醇的联合化疗为卵巢癌的一线化疗方案,但鉴于其副作用较大研究者仍希望找出更安全有效的治疗方法。超声波已广泛应用于疾病的诊断,而随着技术水平的提高超声治疗也得到了快速的发展,近年低强度聚焦超声在基础研究方面受到了学者的高度关注,研究证实低强度聚焦超声对多种化疗药物的细胞毒性有增效作用。本文主要研究小剂量顺铂和紫杉醇联合低强度聚焦超声对卵巢癌细胞HO-8910及其高转株HO-8910PM的体外转移能力的影响,以探讨声学化疗对肿瘤转移的影响。方法:（1）确定对HO-8910和HO-8910PM的临界致死超声剂量。研究临界超声处理后两细胞克隆形成能力和细胞的生长情况,以观察超声对细胞的远期作用,观察超声作用后的细胞超微结构和细胞悬液温度变化来分析超声对细胞作用的可能机理。（2）研究不同浓度的顺铂和紫杉醇处理时细胞生存率的情况,选出一组临界致死浓度,然后用筛选好的三因素（DDP、Taxol、US）的剂量分别组合成Control、US、DDP、DDP +US、Taxol、Taxol+US、DDP+Taxol、DDP+ Taxol+US共八组来处理两细胞以观察各因素对细胞的杀伤率,确定转移实验的细胞接种量。（3）转移实验（细胞的粘附、运动和侵袭实验）研究Control、US、DDP、DDP+US、Taxol、Taxol+US、DDP+Taxol、DDP+ Taxol+US等组细胞转移能力,以分析超声以及超声联合顺铂和紫杉醇对卵巢癌细胞体外转移能力的影响。结果:（1）无明显的超声临界致死剂量,因此选择一个超声对细胞作用较小（杀伤率约10%）的剂量（HO-8910PM需要US 10s,HO-8910需要US 5s）用于之后的实验;在细胞克隆和细胞生长曲线的实验中HO-8910PM经10 s US以及HO-8910经5 s US作用后的细胞和对照组无显著差异;接受超声作用后的细胞可见其部分线粒体有肿胀和破裂的表现;在室温下超声作用10 s时细胞悬液温度升高为2°C,随着温度的升高每增加一度所需的超声辐照时间明显增长,在介质水温度为29°C的情况下其升高的上限为38°C。（2）单独应用药物时两细胞对两药物都敏感,在增加药物浓度时细胞的生存率都呈下降趋势,两药物对两细胞的作用相当,在DDP为0.5μg/ml以及Taxol为6μg/ml时对细胞的杀伤率约10 %,其为继续研究所用的药物剂量;联合选定剂量的三因素作用于两细胞时发现仅DDP+Taxol+US组作用后活细胞数减少（P<0.05）,余处理组减少不明显（P>0.05）。（3） HO-8910PM,在细胞粘附实验中US可以起到增强DDP、Taxol、DDP+Taxol三种处理因素对肿瘤细胞粘附能力的抑制（P<0.05）,在细胞运动和侵袭实验中US也可以部分增强DDP、Taxol、DDP+Taxol三种处理因素对肿瘤细胞运动和侵袭能力的抑制;HO-8910细胞在其它处理因素相同时接受US组较不接受US组的细胞粘附力差（P<0.05）,而在细胞运动和侵袭实验中都没有细胞穿膜;DDP和Taxol的联用对卵巢癌细胞的杀伤和转移的抑制较明显。结论:低强度超声对细胞的杀伤作用不是因为细胞温度的升高而引起,而主要是由空化作用引起;超声可以明显增强DDP+Taxol对卵巢癌细胞的体外杀伤作用;US不增加肿瘤细胞的转移几率;DDP和Taxol的联用对卵巢癌细胞的杀伤和转移有明显抑制;超声有增强顺铂和紫杉醇抑制卵巢癌细胞体外转移的能力。