Bt水稻对蜘蛛生长发育和繁殖的初步研究

论文摘要

转基因抗虫作物的生态安全性问题一直受到各国政府和人民的高度重视。本文以Bt水稻和水稻害虫主要捕食性天敌-拟环纹豹蛛为研究对象,探讨Bt水稻所表达的Bt蛋白在Bt水稻-稻飞虱-拟环纹豹蛛这一食物链中的变化规律。明确Bt蛋白对第三营养级的拟环纹豹蛛生长,发育和繁殖的影响。主要研究结果如下：1.运用Elisa检测技术,发现Cry1Ab蛋白沿Bt水稻-稻飞虱-拟环纹豹蛛这一食物链传递,并能产生生物富集效应。在稻飞虱体内Cry1Ab蛋白随其取食时间的延长而增加,至第7天达峰值,其富集系数达24.38,随后其含量逐渐降低。2.通过测定拟环纹豹蛛幼蛛生长和发育指标,包括蜘蛛发育历期、各龄期体重、捕食量、存活率、各器官发育等数据,从发育历期上得出,实验组为73.21天长于对照组的67.23天。得出Bt蛋白对拟环纹豹蛛的发育历期有滞后作用,使实验组的蜘蛛发育历期时间明显高于对照组,且实验组蜘蛛后龄期体重均显著小于对照组。3.幼蛛成熟后,进行雌雄配对,研究Bt蛋白对蜘蛛繁殖的影响,结果表明Bt蛋白对蜘蛛产卵前期时间,产卵袋数和卵粒数以及产卵率上均无显著影响。4.提取拟环纹豹蛛体内血液,测量蜘蛛血液生化指标并通过流式细胞术和钙离子流动等技术分析血细胞凋亡和钙离子流动变化。所有测量结果与对照比较得出Bt蛋白对幼蛛和成蛛血液无显著影响。综上,本实验说明：Bt水稻所表达的Bt蛋白能够在能够通过食物链传递,并能在次级消费者体内富集。Bt蛋白在蜘蛛摄食后,虽然在试验期内蜘蛛的健康未受到不利影响,但是自身发育历期时间明显延长。这可能是Bt蛋白对蜘蛛相关蜕皮激素调节产生了作用。由此认为：Bt蛋白对蜘蛛体内激素调节作用的影响需进一步深入研究。

论文目录

• 摘要
• abstract
• 第一章 文献综述及前言
• 1 转Bt基因作物的研究现状
• 2 转Bt作物对靶标生物的防治研究
• 3 转Bt作物对非靶标生物的防治研究
• 4 研究目的及意义
• 第二章 Bt蛋白沿食物链传递积累
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 供试水稻
• 1.1.2 供试虫源
• 1.1.3 供试蜘蛛
• 1.4 蜘蛛体内Cry1Ab蛋白提取与测定
• 1.5 蜘蛛体内可溶性蛋白测定
• 1.6 数据分析
• 2. 结果与分析
• 2.1 稻飞虱体内Cry1Ab蛋白含量测定
• 2.2 蜘蛛体内Cry1Ab蛋白含量测定
• 3. 讨论
• 第三章 Bt蛋白对拟环纹豹蛛生长发育的影响
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 供试水稻
• 1.1.2 供试虫源
• 1.1.3 供试蜘蛛
• 1.2 研究方法
• 1.3 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 Bt蛋白对幼蛛各龄期取食量的影响
• 2.2 Bt蛋白对幼蛛平均发育历期的影响
• 2.3 Bt蛋白对幼蛛器官发育的影响
• 2.4 Bt蛋白对幼蛛各龄期存活率的影响
• 2.5 Bt蛋白对幼蛛体重变化的影响
• 3 讨论
• 第四章 Bt蛋白对拟环纹豹蛛成蛛繁殖的影响
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 供试水稻
• 1.1.2 供试虫源
• 1.1.3 供试蜘蛛
• 1.2 研究方法
• 1.3 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 Bt蛋白对成蛛生理指标的影响
• 2.2 Bt蛋白对成蛛繁殖的影响
• 3 讨论
• 第五章 Bt蛋白对拟环纹豹蛛血淋巴及血细胞的影响
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 供试水稻
• 1.1.2 供试虫源
• 1.1.3 供试蜘蛛处理
• 1.1.4 仪器与试剂
• 1.2 研究方法
• 1.2.1 血淋巴取样
• 1.2.2 血淋巴糖含量测定
• 1.2.3 血淋巴可溶性蛋白含量测定
• 1.2.4 血淋巴可溶性脂肪含量测定
• 1.2.5 血淋巴中能量值计算
• 1.2.6 血细胞凋亡检测
• 1.2.7 血细胞钙离子检测
• 1.3 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 Bt蛋白对蜘蛛血淋巴可溶性蛋白、总糖以及脂肪含量的影响
• 2.2 血淋巴中能量值计算
• 2.3 Bt蛋白对蜘蛛血细胞凋亡的影响
• 2.4 Bt蛋白对蜘蛛血钙离子的影响
• 3 讨论
• 第六章 结论、创新点与下一阶段工作设想
• 1 结论
• 2 创新性
• 3 下一阶段工作设想
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介