论文摘要
目的通过检测结直肠腺癌、结肠腺瘤和正常结肠上皮细胞中瘦素（Leptin），NF-κB（p65），磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）及象征凋亡的蛋白质Caspase-3的表达，探讨Leptin在结直肠腺癌发生过程中所起作用，与细胞凋亡的相关性及其与NF-κB通路、PI-3K传导途径的关系，旨在进一步研究结直肠腺癌的发生机制，为临床治疗结直肠腺癌寻找新的基因治疗途径及提供相关理论依据。方法采用免疫组化SP法检测结直肠腺癌、结肠腺瘤和正常结肠上皮细胞中上述四种蛋白的表达，分析其相关性及与临床病理参数的关系。结果1．瘦素（Leptin）在结直肠腺癌的表达高于结肠腺瘤；高中分化结直肠腺癌中瘦素的表达高于正常结肠组，二者均较低分化结直肠腺癌高表达，差异具有显著性（P均＜0.01）。瘦素在不同部位结肠癌（以横结肠中心为界分为左半结肠和右半结肠，左半结肠包括结肠脾曲、降结肠、乙状结肠与直肠；右半结肠包括盲肠、升结肠和结肠肝曲）的表达无显著性差异，且其表达与癌细胞在肠壁浸润深度以及有无淋巴结转移均无明显相关性（p均＞0.05）。2．NF-κB（p65）在结直肠腺癌中的表达高于结肠腺瘤，正常结肠组表达高于结肠腺瘤，高分化结直肠腺癌高于正常结肠组同时二者均高于低分化结直肠腺癌，差异有显著性（P均＜0.05）。NF-κB的表达阳性率与肿瘤发生部位，癌细胞浸润深度以及有无淋巴结转移均无明显相关性（p均＞0.05）。3．磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）在正常结肠组，结肠腺瘤与结直肠腺癌中表达呈依次下降趋势，高中分化结直肠腺癌表达高于低分化结直肠腺癌（p均＜0.01）。其表达阳性率与癌细胞在肠壁浸润深度有关，浸润至浆膜外者其表达明显高于浸润至浆膜层者，差异有显著性（p=0.048），但与肿瘤发生部位以及有无淋巴结转移无明显相关（p均＞0.05）。4．Caspase-3在正常结肠组中的表达高于其在结肠腺瘤与结直肠腺癌中的表达，高分化结直肠腺癌表达高于低分化结直肠腺癌，差异有显著性（P均＜0.05）。结肠腺瘤与结直肠腺癌之间表达无显著性差异，同时Caspase-3表达阳性率与肿瘤发生部位，癌细胞浸润深度以及有无淋巴结转移均无明显相关（p均＞0.05）。5．在整体数据中，Leptin与Caspase-3的表达呈现出相反的趋势，但并没有统计学上的相关关系（p＞0.05）；Leptin与NF-κB（p65）的表达呈明显正相关关系（r=0.643，p=0.000），与PI-3K的表达也呈正相关关系（r=0.443，p=0.000）。而在结直肠腺癌组中，Leptin、NF-κB（p65）、PI-3K与Caspase-3的表达均未表现出统计学上的相关性（p均＞0.05）；同时，Leptin与NF-κB（p65）以及PI-3K的表达也均呈正相关关系（p=0.000）。结论1．凋亡效应蛋白Caspase-3在结肠腺瘤和结直肠腺癌中的表达低于正常结肠组，提示Caspase-3在结直肠腺癌的癌前病变阶段即呈现表达降低，其失表达可能是结直肠腺癌发生过程中的早期事件，推测Caspase-3可作为结直肠腺癌发生早期的一个检测指标；进一步说明结肠腺瘤与结直肠腺癌中细胞的凋亡少于正常结肠上皮，细胞凋亡的减少或抑制促进了结肠腺瘤与结直肠腺癌的发生。2．NF-κB（p65）作为凋亡抑制剂之一参与了结直肠腺癌特别是高中分化结直肠腺癌的发生以及由结肠腺瘤恶变为癌的过程。3．PI-3K是结直肠腺癌细胞的凋亡抑制剂之一；检测结直肠腺癌中PI-3K的表达对于临床上预测病人的预后具有一定的参考价值。4．Leptin参与了结直肠腺癌特别是高中分化结直肠腺癌的发生以及由结肠腺瘤转变为癌的过程，其高表达促进了癌的发生。瘦素的表达与癌细胞浸润深度以及有无淋巴结转移无明显相关，提示瘦素似乎不参与结直肠腺癌的演进过程。5．Leptin作为凋亡抑制剂之一在结直肠腺癌特别是高中分化结直肠腺癌的发生过程中发挥作用，其抑制结直肠腺癌细胞凋亡的作用是通过NF-κB和PI-3K信号传导途径实现的，并且这种作用与NF-κB信号传导途径的关系更为密切。6．Leptin，NF-κB（p65）和PI-3K在高中分化结直肠腺癌中均较低分化结直肠腺癌高表达，提示这三者可能与结直肠腺癌的生物学行为有一定的关系。7．综上所述，本实验表明瘦素可以作为结直肠腺癌临床诊断的实验性检测指标之一，同时可为临床以拮抗瘦素作为治疗结直肠腺癌的一种辅助性手段提供了理论依据。