导读:本文包含了肺修复论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:骨髓基质细胞,内毒素,肺损伤,肺修复
肺修复论文文献综述
汪薇[1]（2006）在《实验性急性肺损伤肺修复策略与生命支持的研究》一文中研究指出前言急性肺损伤(ALI)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是多种原因引起的急性呼吸衰竭，是危及各个年龄段的临床危重症，在儿科重症监护病房(PICU)中病死率很高。近年来随着肺保护性通气策略的应用，国外ARDS的病死率有较大幅度的下降，但仍有30-40％的ARDS患者预后不良。研究发现，在ARDS早期就存在纤维母细胞增生和胶原合成，表明炎症损伤与失常的修复过程是同时进行的。如果能有效干预阻断肺内炎症反应，促进肺组织上皮细胞继续遵循发育规律实现良性修复性增殖，避免胶原沉积、肺纤维化的重塑性增殖，通过结构与功能重建，必将改善ARDS预后。利用干细胞移植来修复受损组织是近年来的研究热点，多项研究发现骨髓来源的干细胞能迁移至肺，在某种特定环境下通过横向分化、细胞融合等机制，生成肺泡上皮细胞、血管内皮细胞，可能减轻肺炎症损伤，修复受损肺结构。ARDS最重要治疗手段为机械通气，但是机械通气相关性肺损伤可进一步加剧肺上皮细胞、血管内皮损伤。严重的炎症反应使肺泡上皮修复性增殖过程紊乱，重塑性增殖加剧，导致胶原沉积、肺纤维化和治疗失败。当常规方法对这类患者进行治疗病情无改善时，体外膜肺(ECMO)技术可作为ARDS的最终治疗手段，它能提供有效氧合和气体交换作为生命支持，并通过缓和呼吸机通气及氧疗对肺部的潜在医源性伤害，从而最低限度地干预肺，使肺得到休息，从而完成功能上的改善和病理上的修复。综上所述，我们从骨髓基质细胞移植和ECMO两个促进肺修复的技术方面进行研究：小鼠肺部炎症损伤时进行骨髓基质细胞移植，促进肺泡上皮修复性增殖；油酸诱导幼猪严重ARDS时，利用ECMO进行生命支持，以期调动机体自身修复能力，实现肺保护。第一部分小鼠骨髓基质细胞向肺泡上皮细胞分化的实验研究背景骨髓干细胞移植修复肺损伤是近年来的研究热点。已有研究证实，骨髓干细胞移植后定植于受损肺，能向肺泡上皮细胞、血管内皮细胞等分化，减轻炎症反应，修复肺部结构破坏，有望成为治疗ALI／ARDS的重要手段。骨髓基质细胞(BMSCs)易于分离培养，具有较强的自我更新和多向分化潜能，且取材方便，是肺损伤理想的细胞治疗种子细胞和基因治疗载体。本研究将BMSCs移植入致死剂量全身照射(TBI)小鼠体内，观察在合并内毒素(LPS)诱导肺部炎症损伤的情况下供体来源的BMSCs向肺泡上皮细胞分化的状况，为肺损伤修复探索新的方法。目的1．体外分离培养BMSCs并鉴定其生物学性状。2．建立LPS诱导肺部炎症损伤模型和BMSCs移植造血重建模型。3．观察BMSCs移植后能否向肺部迁移、分化成肺泡上皮细胞，及细胞移植效率，供体来源细胞是否参与了受损肺泡上皮的修复。方法1．利用全骨髓贴壁法培养BMSCs，行CD34、CD59和CD90.1免疫细胞荧光染色以分析其生物学特性，诱导其向成骨细胞、神经元分化以确定多向分化潜能。2．气道内滴入LPS诱导肺部炎症损伤模型，检测肺泡灌洗液中总蛋白(TP)、WBC计数和肺病理形态。3．致死剂量TBI后移植BMSCs，检测移植后外周血常规、骨髓有核细胞计数、肺、肝、脾病理形态变化，以确定有无造血重建。4．将绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠BMSCs向TBI小鼠移植，7天、14天后进行GFP和肺泡上皮标记物CK5&8免疫荧光双标染色，并用流式细胞仪检测受体小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)GFP阳性率，和肺组织SP-A、SP-C、AQP5 mRNA表达。结果1．全骨髓贴壁分离培养BMSCs有良好的增殖能力，CD34表达阴性，经体外定向向成骨细胞分化，AKP表达增强，茜素红染色阳性；向神经元分化后MAP-2免疫细胞荧光染色阳性。2．气道内滴入LPS后第1天，肺泡灌洗液TP和WBC计数达高峰，伴显着的肺炎症损伤病理改变，以后TP和WBC逐渐下降，肺病理损害逐渐减轻。3．TBI后外周血和骨髓有核细胞在7天内降至最低点，未移植组小鼠在10天全部死于造血衰竭，移植BMSCs小鼠生存率为60-70％，外周血WBC、Pt、Hb和骨髓有核细胞计数逐渐回升。TBI后第3天有肺部轻度病理改变，合并LPS诱导肺炎症损伤时病变更重，但随后病变逐渐减轻，至第28天基本无病理改变。4．TBI和合并肺炎症损伤的TBI小鼠以GFP阳性BMSCs移植后第14天，免疫荧光双标染色检测到GFP和CK5&8双染阳性细胞，AECⅡGFP阳性率高于对照组，合并肺炎症损伤的TBI小鼠SP-C mRNA表达增加。结论用全骨髓贴壁法成功分离培养小鼠BMSCs，所培养细胞具有多向分化能力。建立LPS诱导小鼠肺炎症损伤模型和TBI后BMSCs移植造血重建模型，在移植后第14天，约10％AECⅡ来源于供体细胞，参与肺泡上皮的修复。当合并LPS诱导的肺部炎症损伤时，供体来源细胞向肺泡上皮细胞的分化有增加的趋势。第二部分体外膜肺救治油酸致急性呼吸窘迫综合征的实验研究背景ARDS是危及各个年龄层的危重疾病，我国小儿ARDS病死率高达62.9％，有必要探索新的治疗策略。ECMO作为一项新的生命支持技术，它的本质是一种改良的人工心肺机，对严重呼吸循环功能衰竭的患者提供较长时间的生命支持，当常规方法治疗ARDS均无改善时，ECMO可作为最终的救治手段。尽管在国外ECMO已临床应用叁十余年，但我国尚处于起步阶段，应用ECMO治疗小儿呼吸衰竭尚无临床报道，动物实验的研究资料也很有限。本实验拟建立油酸诱导ARDS模型，探讨ECMO救治幼年动物ARDS的有效性和安全性，为临床应用提供实验基础。目的1．建立ECMO在健康和油酸诱导ARDS幼猪稳定转流模型。2．从呼吸力学、气体交换、血流动力学、重要脏器病理形态、脑氧合和灌注、炎症反应和内源性一氧化氮产生等方面，探讨ECMO的安全性和救治幼猪ARDS的有效性。方法21头5-6周龄、9-14kg幼猪经镇静麻醉后给予气管插管、常规机械通气，稳定30分钟后应用油酸经中心静脉诱导产生ARDS模型。分离右股动脉和左颈外静脉，分别置Picco动脉导管和漂浮导管，监测血流动力学；分离右颈外静脉和右股静脉，分别置静脉导管，作为ECMO转流的引血端和回血端。将动物随机分为4组：CON组(n=5)，单纯机械通气24小时；ECMO组(n=6)，以ECMO转流24小时后停转观察6小时；ARDS组(n=5)，油酸诱导ARDS后单纯机械通气治疗；AEC组(n=5)：油酸诱导ARDS后以机械通气和ECMO治疗24小时，再停转观察6小时。在基础状态(Base)、成模时(0h)、以后每小时监测呼吸力学、气体交换、血流动力学指标，实验结束后留取肺泡灌洗液检测总蛋白(TP)、磷脂含量、磷脂表面张力，检测肺组织湿干重比(W／D)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、炎症因子(TNFα，IL-1β，IL-6，IL-8)mRNA表达，取肺、肝、肠、肾、大脑海马送检病理形态，检测肺组织和心肌组织细胞凋亡，以近红外光谱仪(NIRS)监测脑氧合和脑灌注。为评价ECMO对内源性一氧化氮(NO)产生的影响，检测肺泡灌洗液和血清不同时点NO_2~-／NO_3~-含量，肺组织总一氧化氮合酶(tNOS)活性，诱生型和内皮型一氧化氮合酶(iNOS，eNOS)mRNA表达和肺组织内分布。结果1．ARDS模型的建立：油酸注射后4-6小时内可诱导出ARDS模型，成模时PaO_2／FiO_2＜200mmHg，动态顺应性(Cdyn)较基础状态下降50％以上。病理表现为弥漫性炎性细胞浸润、肺水肿及严重肺泡萎陷、出血等病理表现。2．生存率：至实验结束CON组和ECMO组全部存活，AEC组1只动物在转流22h死亡，ARDS组动物于成模后14-24h之间死亡。3．ECMO系统管理：ECMO转流期间血流量70-80ml／kg，全程维持活化凝血时间(ACT)180-220s，SvO_2 68-75％之间。4．血流动力学：随着实验时间的延长，ECMO组心输出量(CO)有上升趋势，外周血管阻力(SVR)呈下降趋势；与ARDS组比较，AEC组平均动脉压(MABP)、CO、SVR均有一定的程度的改善。5．呼吸力学：各组Cdyn均下降，ECMO组16h、24h和Post点与Base比较差异有统计学意义(P＜0.01)。在0h点，ARDS组和AEC组Vd／Vt与Base比较显着增高(P＜0.05)，以后ARDS组Vd／Vt进一步升高，而AEC组有下降趋势。AEC组PaCO_2在0h点较Base显着升高(P＜0.01)，但ECMO转流后PaCO_2下降至正常范围，与同时点CON组比较差异无显着性意义。6．气体交换：ARDS组和AEC组成模后P／F显着下降，随后ARDS组P／F进一步下降，而AEC组在ECMO启动后P／F比值升高。CON组和ECMO组P／F随着实验时间延长，均有下降趋势。ARDS组和AEC组肺泡-动脉氧分压差(A-aDO_2)、氧合指数(OI)、通气指数(Ⅵ)、肺内分流(Qs／Qt)变化趋势与P／F值相反，即随着ECMO启动，AEC组各指标均有一定程度的下降。ECMO组DO_2在各时点均有高于其他组的趋势。7．血常规及血液生化：成模后ARDS组和AEC组WBC均有下降趋势。随着转流时间的延长，ECMO组和AEC组Hb和Hct均有下降趋势，但组内及组间比较差异均无统计学意义。生化指标各组内及组间均无显着差异。8．磷脂含量及表面张力：与CON组比较，ARDS组和AEC组总磷脂(TPL)下降，最小表面张力升高，差异有统计学意义(P＜0.01)。ECMO组与CON组比较，TPL、DSPC／TPL和表面张力差异均无统计学意义。9．炎症损伤：与CON组比较，ARDS组和AEC组TP升高，DSPC／TP下降，W／D和MPO增高，IL-6和IL-8 mRNA表达增加，差异有统计学意义(P＜0.01)。AEC组与ARDS组比较，各指标差异均无统计学意义。ECMO组与CON组比较，除DSPC／TP外，其余指标无均统计学意义。10．病理形态：与CON组比较，ECMO组肺、心、肝、肠、肾、大脑海马均有轻度病理损伤；与ARDS组比较，AEC组肺、肠病理损伤减轻，心、肝、肾、大脑海马病理变化相似。11．脑氧合和灌注：各组组内及组间比较，以NIRS监测脑氧合和脑灌注均无统计学差异。12．内源性NO：转流启动后，ECMO组和AEC组NO_2~-／NO_3~-含量下降，ECMO组肺组织eNOS mRNA表达低于其他叁组，eNOS蛋白表达减少。结论成功复制油酸诱导幼猪ARDS模型，建立健康幼猪和ARDS幼猪ECMO稳定转流模型。ECMO转流24小时对健康和ARDS幼猪血流动力学状态、脑氧合和脑灌注无显着影响，能改善ARDS幼猪呼吸力学、氧合、气体交换、血流动力学状态，减轻肺、肠病理损伤，提高生存率，并未加重肝、肾、脑病理损伤。但ECMO激活健康幼猪全身炎症反应，引起肺、肝、肠、肾、脑轻度病理损伤。ECMO转流后肺组织eNOS表达下降，内源性NO产生减少。(本文来源于《复旦大学》期刊2006-10-18）
崔光彬[2]（2001）在《博莱霉素诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖活性的改变及其对肺修复功能影响的实验研究》一文中研究指出目的：ATⅡ是肺泡上皮的干细胞，参与肺生长发育、损伤修复过程。大量研究表明ATⅡ与肺纤维化关系密切，且在纤维化过程中具有重要作用。近年来，尤其在生理和病理情况下与肺的非呼吸功能颇为被人关注。本实验通过对建立BLM致大鼠肺纤维化模型和BLM处理体外培养的ATⅡ，观察BLM肺损伤大鼠肺组织中ATⅡ的形态结构、增殖活性的变化以及PS定性、定量分析的方法，研究BLM肺损伤早期ATⅡ增殖活性变化规律及对损伤的肺泡上皮细胞修复功能的影响，为探讨ATⅡ在肺间质纤维化发生中的地位和作用提供实验依据。方法：BLM气管内滴注（4mg.ml~(-1)，5mg.kg~(-1)）制作大鼠肺损伤模型分为3、7、14、28d组，对照组在同样条件下气管内注入相同数量的生理盐水，方法同实验组。分别行肺组织标本钌红电镜组织化学染色、利用高效液相色谱（HPLC）法、分光光度计法分别测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中PL及其组分和蛋白质，流式细胞仪测定BLM处理的体外培养的ATⅡ细胞增殖周期，并作对照分析。结果：（1）对照组PS层呈连续、均匀一致内衬于肺泡腔的电子致密带。ATⅡ结构完整、清晰。实验组各组均可见PS层丧失连续、均匀绒状结构，脱落入肺泡腔或聚集成块现象或散落于肺泡腔内，其中以3d组较为明显。钌红阳性表面层的厚度与对照组比较，3d组较厚，且染色深，7、14d组 ＄·f4L44＋ttk4 一 无明显差别，28 d组较淡薄。BALF的PS中 PL总量均趋向于增加。PL组 分中磷脂酞甘油（PG）含量3d组升高，7、14、28 d组降低。磷脂酞肌醇 （PI）含量变化则与此相反。PG／PI比值在3 d组升高，7、14、28 d组降 低。注药后7、14、28 d组P＊们降低（＜oWX 与对照组比较有显着性差 异。（2）3、7 d组可见 AT 11变性坏死，甚至崩解，胞质内容物脱落入肺泡 腔，以 3 d组较明显。3 d组 AT 11板层小体体积数目减少，板层小体部分 或完全空泡化，板层不规则且变薄，并可见肺泡腔散在脱落的板层小体。7d 组板层小体开始数目增多，体积增大，以 14、28 d组较为显着，并可见部 分巨大板层小体。AT 11增生各组均可见，以 7 d组较明显。板层小体 3 d 组数量减少，并呈空泡状。7 d组开始增多，以 14、28 d组较为明显。（3） 3、7d组基底膜水肿、裸露，甚至断裂，使血管腔和肺泡腔相通或直接暴 露于肺泡腔内，并有炎性细胞和间隔中的成纤维细胞等渗出到肺泡腔内。 14、28 d组也可见断裂基底膜被沉着的细胞外基质（ECM）、纤维素样物 质包埋于其中，14 d组可见有 AT 11转化为 ATI，并逐渐伸展、粘附于裸 露基底膜。（4）PS中蛋白质的含量，3 d组明显增高以后逐渐下降，28 d 组接近对照组。u）BLM处理的AT 11 GJG；期比例第id明显下降，第2 d 开始逐渐上升，第sd接近对照组水平。死亡细胞（包括凋亡细胞）第id 开始增多，第Zd出现高峰，然后逐渐减少，但第sd仍未达到对照组水平。 结论：（）BLM肺损伤早期可导致 AT 11细胞的结构及功能的改变，降低 AT 11细胞的修复能力。（2）BLM肺损伤早期 AT 11具有一定的增殖、分化 修复能力，且逐渐增强。（3）PS中磷脂及其组分，尤其 PG和与肺损伤及 肺纤维化严重程度相关。（4）蛋白质含量与肺泡炎症程度呈正相关，可作 为肺损伤早期损伤和炎症的敏感指标。(本文来源于《第四军医大学》期刊2001-05-01）
马怡红[3]（1991）在《上皮在肺修复中的作用》一文中研究指出在损伤肺的修复中,氧气只对Ⅱ型细胞的分裂增生起阻碍作用,而不影响其它细胞.细胞动力学分析发现高氧推迟上皮增生而促进成纤维细胞过度生长.用BHT 致小鼠广泛肺损伤,在其上皮修复阶段置于(本文来源于《国外医学.呼吸系统分册》期刊1991年04期）
Rinaldo,JE,Rogers,RM,高诚[4]（1983）在《成人呼吸窘迫综合征:肺损伤及肺修复观念的改变》一文中研究指出成人呼吸窘迫综合征(ARDS)系非心原性肺水肿引起的急性呼吸衰竭,乃是休克、败血症、战伤、车祸、病毒性呼吸道感染,以及许多其它损害的一种复杂结局。并且尽管给予先进的支持疗法,但仍有半数病例终归死亡。ARDS现代观念的进展早期学者认为,本病的发生机理与新生儿呼吸窘迫综合征及心源性肺水肿相似。Petty等推测,ARDS可能起因于表面活性物质合成(本文来源于《国外医学.呼吸系统分册》期刊1983年01期）
肺修复论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的：ATⅡ是肺泡上皮的干细胞，参与肺生长发育、损伤修复过程。大量研究表明ATⅡ与肺纤维化关系密切，且在纤维化过程中具有重要作用。近年来，尤其在生理和病理情况下与肺的非呼吸功能颇为被人关注。本实验通过对建立BLM致大鼠肺纤维化模型和BLM处理体外培养的ATⅡ，观察BLM肺损伤大鼠肺组织中ATⅡ的形态结构、增殖活性的变化以及PS定性、定量分析的方法，研究BLM肺损伤早期ATⅡ增殖活性变化规律及对损伤的肺泡上皮细胞修复功能的影响，为探讨ATⅡ在肺间质纤维化发生中的地位和作用提供实验依据。方法：BLM气管内滴注（4mg.ml~(-1)，5mg.kg~(-1)）制作大鼠肺损伤模型分为3、7、14、28d组，对照组在同样条件下气管内注入相同数量的生理盐水，方法同实验组。分别行肺组织标本钌红电镜组织化学染色、利用高效液相色谱（HPLC）法、分光光度计法分别测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中PL及其组分和蛋白质，流式细胞仪测定BLM处理的体外培养的ATⅡ细胞增殖周期，并作对照分析。结果：（1）对照组PS层呈连续、均匀一致内衬于肺泡腔的电子致密带。ATⅡ结构完整、清晰。实验组各组均可见PS层丧失连续、均匀绒状结构，脱落入肺泡腔或聚集成块现象或散落于肺泡腔内，其中以3d组较为明显。钌红阳性表面层的厚度与对照组比较，3d组较厚，且染色深，7、14d组 ＄·f4L44＋ttk4 一 无明显差别，28 d组较淡薄。BALF的PS中 PL总量均趋向于增加。PL组 分中磷脂酞甘油（PG）含量3d组升高，7、14、28 d组降低。磷脂酞肌醇 （PI）含量变化则与此相反。PG／PI比值在3 d组升高，7、14、28 d组降 低。注药后7、14、28 d组P＊们降低（＜oWX 与对照组比较有显着性差 异。（2）3、7 d组可见 AT 11变性坏死，甚至崩解，胞质内容物脱落入肺泡 腔，以 3 d组较明显。3 d组 AT 11板层小体体积数目减少，板层小体部分 或完全空泡化，板层不规则且变薄，并可见肺泡腔散在脱落的板层小体。7d 组板层小体开始数目增多，体积增大，以 14、28 d组较为显着，并可见部 分巨大板层小体。AT 11增生各组均可见，以 7 d组较明显。板层小体 3 d 组数量减少，并呈空泡状。7 d组开始增多，以 14、28 d组较为明显。（3） 3、7d组基底膜水肿、裸露，甚至断裂，使血管腔和肺泡腔相通或直接暴 露于肺泡腔内，并有炎性细胞和间隔中的成纤维细胞等渗出到肺泡腔内。 14、28 d组也可见断裂基底膜被沉着的细胞外基质（ECM）、纤维素样物 质包埋于其中，14 d组可见有 AT 11转化为 ATI，并逐渐伸展、粘附于裸 露基底膜。（4）PS中蛋白质的含量，3 d组明显增高以后逐渐下降，28 d 组接近对照组。u）BLM处理的AT 11 GJG；期比例第id明显下降，第2 d 开始逐渐上升，第sd接近对照组水平。死亡细胞（包括凋亡细胞）第id 开始增多，第Zd出现高峰，然后逐渐减少，但第sd仍未达到对照组水平。 结论：（）BLM肺损伤早期可导致 AT 11细胞的结构及功能的改变，降低 AT 11细胞的修复能力。（2）BLM肺损伤早期 AT 11具有一定的增殖、分化 修复能力，且逐渐增强。（3）PS中磷脂及其组分，尤其 PG和与肺损伤及 肺纤维化严重程度相关。（4）蛋白质含量与肺泡炎症程度呈正相关，可作 为肺损伤早期损伤和炎症的敏感指标。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肺修复论文参考文献
[1].汪薇.实验性急性肺损伤肺修复策略与生命支持的研究[D].复旦大学.2006
[2].崔光彬.博莱霉素诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖活性的改变及其对肺修复功能影响的实验研究[D].第四军医大学.2001
[3].马怡红.上皮在肺修复中的作用[J].国外医学.呼吸系统分册.1991
[4].Rinaldo,JE,Rogers,RM,高诚.成人呼吸窘迫综合征:肺损伤及肺修复观念的改变[J].国外医学.呼吸系统分册.1983