水稻茎叶特异表达基因启动子的筛选及分析

水稻茎叶特异表达基因启动子的筛选及分析

论文摘要

本研究在前期对水稻茎叶优势表达基因OsZF153和OsW8513启动子缺失功能分析的基础上,进一步探究这两个启动子的功能:一是对前期一系列缺失的OsZF153启动子转基因水稻植株验证,并构建一个3’端缺失长度为1407bp启动子的表达载体pCxgus-P153E和往5’端推100bp的启动子表达载体pCxgus-P153m;二是对前期缺失的一系列OsW8513启动子转基因植株验证,并构建两个表达载体pCxgus-P8513G和pCxgus-8513E。以上4个载体通过农杆菌介导转化日本晴水稻胚愈伤组织。对苗期、分蘖期、成熟期的转基因水稻植株的根、茎、叶、花、颖壳和种子各个器官进行GUS活性检测。通过生物信息学方法,在数据库筛选可能茎叶特异表达的启动子,然后用RT-PCR方法验证基因表达模式。对理想的候选sl2基因启动子和sl5基因启动子进行生物信息学分析,预测其主要的顺式作用元件,推测茎叶特异表达基因启动子可能具有的顺式作用元件。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 中文文摘
  • 目录
  • 绪论
  • 第一章 植物启动子的研究现状
  • 1 真核生物基因启动子的一般特点
  • 1.1 核心启动子元件
  • 1.1.1 TATA框
  • 1.1.2 起始子
  • 1.2 上游元件
  • 2 植物基因启动子的分类
  • 2.1 组成型启动子
  • 2.2 诱导型启动子
  • 2.3 组织特异型启动子
  • 2.4 茎叶特异性表达启动子
  • 3 启动子的克隆方法
  • 3.1 利用PCR技术克隆启动子
  • 3.2 利用启动子探针质粒载体筛选启动子
  • 3.3 利用启动子捕获系筛选启动子
  • 4 启动子功能和结构的研究策略
  • 5 报告基因研究进展
  • 5.1 β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)
  • 5.2 氯霉素乙酰转移酶基因(cat)
  • 5.3 荧光素酶基因
  • 5.4 绿色荧光蛋白
  • 6 本研究的技术路线
  • 第二章 水稻茎叶特异性表达启动子OsZF153P和OsW8513P的功能验证
  • 1 前言
  • 2 材料与方法
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 主要试剂、质粒和菌株
  • 2.3 主要仪器
  • 2.4 引物
  • 2.5 实验方法
  • 3 结果与分析
  • 4 新的缺失载体的构建及转化
  • 第三章 水稻茎叶特异基因启动子的筛选及表达模式分析
  • 1 前言
  • 2 材料与方法
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 主要试剂
  • 2.3 主要仪器
  • 2.4 RT-PCR引物
  • 2.5 实验方法
  • 3 结果与分析
  • 3.1 水稻茎叶特异基因启动子数据收集
  • 3.2 候选基因表达分析
  • 3.3 候选启动子序列生物信息学分析
  • 4 讨论
  • 附录1 缩略词及英汉对照表
  • 附录2
  • 附录3 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
  • 附录4 GUS染色液的配制
  • 附录5 TSS法制备感受态细菌
  • 附录6 启动子序列测序比对结果
  • 附录7 农杆菌介导水稻转化
  • 参考文献
  • 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果
  • 致谢
  • 个人简历
  • 相关论文文献

    • [1].节水灌溉对水稻茎生长状况的影响[J]. 安徽农学通报(上半月刊) 2009(23)
    • [2].基于高光谱成像和主成分分析的水稻茎叶分割[J]. 激光生物学报 2015(01)
    • [3].水稻茎部内生细菌及根际细菌与水稻品种特性的相关性[J]. 热带作物学报 2010(06)
    • [4].水稻茎叶特异性启动子研究进展[J]. 现代农业科技 2012(17)
    • [5].硒对水稻吸收积累和转运锰、铁、磷和硒的影响[J]. 环境科学 2013(10)
    • [6].灌浆期喷施叶面富硒剂对水稻茎、籽粒富硒及氮磷钾吸收的影响[J]. 江苏农业科学 2015(10)
    • [7].硅对水稻体内铅化学形态的影响[J]. 农业科技与装备 2014(04)
    • [8].砷-硒交互作用对水稻吸收转运砷和硒的影响[J]. 环境化学 2013(06)
    • [9].钢渣对水稻吸收Cd的影响[J]. 土壤通报 2010(02)
    • [10].外源钙对两种价态锑胁迫下水稻幼苗吸收积累锑和钙的影响[J]. 生态毒理学报 2015(03)
    • [11].不同磷肥对水稻铅积累的影响及其机理[J]. 环境科学学报 2015(01)
    • [12].如何防治水稻蚜虫[J]. 现代农业 2011(06)
    • [13].一个水稻茎叶优势表达锌指基因启动子的克隆及功能分析[J]. 福建农业学报 2009(01)
    • [14].水稻钻心虫防治技术要点分析[J]. 农业与技术 2016(20)
    • [15].石灰氮对镉污染土壤中镉生物有效性的影响[J]. 生态环境学报 2011(10)
    • [16].水稻后期倒伏的成因与对策[J]. 湖南农业 2008(09)
    • [17].外源亚精胺对水稻吸收积累镉砷的影响[J]. 农业环境科学学报 2020(10)
    • [18].水稻机械化收获技术[J]. 吉林农业 2008(06)
    • [19].活性硅肥在水稻生产中的应用[J]. 农村科技 2008(06)
    • [20].水分管理模式对水稻吸收累积镉的影响及其作用机理[J]. 应用生态学报 2010(04)
    • [21].湖南两种母质发育土壤的稻米镉积累差异[J]. 土壤通报 2018(01)
    • [22].不同有机肥对土壤镉锌生物有效性的影响[J]. 应用生态学报 2015(03)
    • [23].乳熟中期水稻茎中水溶性膳食纤维提取工艺研究[J]. 黑龙江八一农垦大学学报 2020(02)
    • [24].不同类型土壤栽培条件下外施硒对水稻含硒量的影响[J]. 农业科技通讯 2013(06)
    • [25].一种优化的大螟人工饲料[J]. 中国生物防治学报 2020(05)
    • [26].水稻茎、叶的营养含量及留茬高度对稻草营养品质的影响[J]. 草业学报 2012(01)
    • [27].不同土培条件下荧蒽在水稻和小麦中的分布特征[J]. 农业环境科学学报 2012(08)
    • [28].田间渗漏强度对水稻生长及产量的影响[J]. 安徽农业科学 2019(21)
    • [29].遗传发育所等在水稻种子大小决定研究中取得进展[J]. 中国科学院院刊 2015(05)
    • [30].长期不同施肥土壤中残留五氯酚在水稻中的富集特征[J]. 中国环境科学 2008(11)

    标签:;  ;  ;  

    水稻茎叶特异表达基因启动子的筛选及分析
    下载Doc文档

    猜你喜欢