甲醛遗传毒性与氧化损伤研究

论文摘要

甲醛是一种常见的装修型化学性室内空气污染物,同时也是一种全球性的环境污染物。它具有污染来源广、时间长、水平高、毒性种类多等特点,因而已成为目前我国环境卫生领域研究的热点和难点。甲醛暴露对人体健康的影响主要涉及：呼吸道和眼部的刺激作用、神经行为改变、生殖毒性、致敏作用和免疫毒性、氧化损伤、遗传毒性和癌症等诸多方面。本文主要研究甲醛的氧化毒性和遗传毒性,以及说明其分子机制,这对全面和系统的了解甲醛毒性具有十分重要的意义,并为室内空气质量的改善提供更科学的依据。本研究以大鼠肝细胞为研究对象,通过检测8-羟基脱氧鸟苷含量来探讨其遗传毒性,检测丙二醛含量来研究其氧化毒性。研究结果如下：1甲醛致遗传毒性作用为了探讨外源性化合物暴露致内脏细胞DNA氧化损伤程度的定量检测方法,以8-羟基脱氧鸟苷为分子生物标志物,以甲醛为模式外源性化合物,应用大鼠肝细胞悬液进行体外染毒实验研究。实验设置甲醛染毒的终浓度分别为0、5、15、45μmol/L,在大鼠肝细胞悬液染毒1h后,检测肝细胞悬液中的8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）研究结果显示,随着甲醛浓度升高,大鼠肝细胞中8-OHdG呈升高趋势（F=59.55,p<0.01）,高浓度组（45/μmol/L） 8-OHdG含量具有显著性（p〈0.01）,中浓度组（15μmol/L）的这种差别也具有显著性（p<0.01）,低浓度组（5μmol/L）的这种差异没有显著性（p>0.05）。因此,8-OHdG不但可以用于血液和尿液样品的检测,而且采用本项研究摸索出的前处理方法可以很好地定量测定内脏细胞DNA氧化损伤的程度。2甲醛致氧化损伤效应以大鼠肝脏细胞为研究材料,测定肝脏细胞中MDA的含量,检测甲醛对小鼠肝细胞的氧化损伤效应。结果显示：随着甲醛染毒浓度的上升,大鼠肝脏细胞MDA含量也随之上升（F=75.82,p〈0.01）,并且与对照组相比,小鼠肝脏细胞MDA含量依次升高,而且这种升高在FA染毒浓度为15μmol/L时就出现显著性差异（P<0.05）；高浓度组（45μmol/L） MDA含量与对照组的差异具极显著性（p<0.01）。证明高浓度甲醛引起肝细胞膜脂质的严重损伤。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 一、文献综述
• 1 环境污染概述
• 2 室内空气污染概况
• 3 典型室内空气污染物甲醛概述
• 3.1 甲醛的理化性质及其工业制备
• 3.2 甲醛的用途
• 3.3 甲醛的污染状况
• 3.4 甲醛的污染来源
• 3.5 甲醛污染的主要特点
• 4 甲醛的体内毒理代谢
• 5 甲醛的毒性效应
• 5.1 眼部和气道刺激作用
• 5.2 神经毒性
• 5.3 免疫毒性与致敏作用
• 5.4 生殖毒性
• 5.5 致癌毒性作用
• 5.6 氧化毒性
• 5.7 遗传毒性
• 6 甲醛与8-羟基脱氧鸟苷
• 6.1 8-羟基脱氧鸟苷的命名与生成
• 6.2 8-羟基脱氧鸟苷的生物学特性
• 6.3 甲醛可能致8-羟基脱氧鸟苷生成证据
• 6.4 8-羟基脱氧鸟苷的检测方法
• 7 实验目的与意义
• 二、材料与方法
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验试剂
• 1.3 实验仪器
• 1.4 实验溶液配制
• 2 实验方法
• 2.1 大鼠肝细胞悬液制备
• 2.2 离体细胞活力检测
• 2.3 染毒方案
• 2.4 8-羟基脱氧鸟苷含量的测定
• 2.5 MDA含量的测定
• 2.6 实验数据统计学分析
• 三、实验结果
• 1 离体细胞存活率检测
• 2 大鼠肝细胞悬液中8-羟基脱氧鸟苷含量的变化
• 2.1 8-羟基脱氧鸟苷浓度标准曲线的制作
• 2.2 不同浓度甲醛处理组肝细胞悬液中8-OHdG含量的变化
• 3 大鼠肝细胞悬液中MDA含量的变化
• 四、讨论
• 1 实验材料的选择
• 1.1 实验动物Wistar品系大鼠的应用
• 1.2 大鼠肝细胞的应用
• 2 8-羟基脱氧鸟苷生物标志物的选择
• 2.1 影响8-OHdG生成的因素
• 2.2 8-OHdG的代谢特性与标志物意义
• 2.3 8-OHdG的生物标志物应用
• 3 用ELISA法测定离体肝细胞的8-羟基脱氧鸟苷含量
• 3.1 ELISA法实验原理及分类
• 3.2 ELISA法测定肝细胞中8-OHdG含量的模型建立
• 3.3 甲醛对肝细胞中8-OHdG含量的影响
• 4 甲醛遗传毒性机理的探讨
• 5 甲醛的脂质过氧化作用
• 5.1 甲醛与活性氧
• 5.2 甲醛致脂质过氧化机理
• 5.3 甲醛对肝细胞中MDA含量的影响
• 6 下一步工作计划
• 五、结论
• 六、参考文献
• 附录一 主要英文缩写词
• 附录二 硕士在读期间学术成果
• 致谢