卵巢癌c-Fos的表达及其与MAPK信号通路关系的研究

论文摘要

目的:研究c-Fos蛋白在人卵巢癌细胞和组织中的表达及其与丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases, MAPKs）信号通路关系的研究。方法:采用MaxVisionTM免疫组织化学法研究c-Fos蛋白和磷酸化细胞外调节激酶1/2（phosphated extracellular-signal regulated kinase 1/2, p-ERK1/2）蛋白在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织、上皮性卵巢癌组织中的表达,用MTT比色法检测PD98059对卵巢癌细胞株HO-8910活性的影响,用流式细胞仪检测PD98059对HO-8910细胞周期的变化,用MaxVisionTM免疫细胞化学法研究c-Fos蛋白的表达,用western blot检测细胞内c-Fos蛋白及p-ERK1/2蛋白的表达。结果:c-Fos蛋白及p-ERK1/2蛋白在上皮性卵巢癌组织中过度表达,与正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织相比差异十分显著,并且c-Fos蛋白和p-ERK1/2蛋白的表达量与分化程度呈负相关（rs= -0.445, P<0.01; rs=-0.389, P <0.05 respectively）,与临床分期呈正相关（ rs=0.492, P<0.01; rs=0.521, P <0.01 respectively）,与淋巴结转移呈正相关（rs=0.338, P <0.05; rs=0.343, P <0.05 respectively）,与年龄、组织学类型等无关。并且卵巢癌中c-Fos蛋白表达与p-ERK1/2蛋白表达呈正相关（rs=0.409, P<0.01）。与对照组相比,150μmol/L和200μmol/L PD98059组可显著降低人卵巢癌细胞株HO-8910的活性（P<0.01）;PD98059呈浓度依赖性抑制细胞p-ERK1/2蛋白的表达及抑制细胞进入S期（P<0.01）;PD98059还能抑制细胞内c-Fos蛋白的表达。结论:ERK1/2信号通路可能通过c-Fos蛋白而促进卵巢癌的发生。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 组织材料和细胞株
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.2 方法
• 2.2.1 HE染色法
• TM 免疫组织化学法'>2.2.2 MaxVision^TM免疫组织化学法
• 2.2.2.1 步骤
• 2.2.2.2 结果判定
• 2.2.3 细胞培养液的配制
• 2.2.4 四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法
• 2.2.5 流式细胞仪分析
• TM 免疫细胞化学法'>2.2.6 MaxVision^TM免疫细胞化学法
• 2.2.7 Western blot 检测蛋白表达情况
• 2.2.7.1 总蛋白质的提取
• 2.2.7.2 液体的配制
• 2.2.7.3 蛋白标准曲线的绘制
• 2.2.7.4 Western blot操作步骤
• 2.2.7.5 Western blot结果分析
• 2.2.8 统计处理
• 第三章 结果
• TM免疫组织化学法检测卵巢组织内p-ERK1/2蛋白和c-Fos蛋白的表达情况'>3.1 MaxVision^TM免疫组织化学法检测卵巢组织内p-ERK1/2蛋白和c-Fos蛋白的表达情况
• 3.1.1 正常、良性和恶性卵巢组织内p-ERK1/2 蛋白和 c-Fos 蛋白的表达情况
• 3.1.2 c-Fos 蛋白的表达与上皮性卵巢癌临床病理特征的关系
• 3.1.3 p-ERK1/2 蛋白的表达与上皮性卵巢癌临床病理特征的关系
• 3.1.4 p-ERK1/2 蛋白与c-Fos 蛋白相关性分析
• 3.2 PD98059 对卵巢癌细胞HO-8910 内p-ERK1/2 的影响
• 3.3 PD98059 对卵巢癌细胞HO-8910 活性的影响
• 3.4 PD98059 对卵巢癌细胞HO-8910 细胞周期的影响
• 3.5 免疫细胞化学检测人卵巢癌细胞HO-8910 内c-Fos 蛋白的表达
• 3.6 PD98059 对卵巢癌细胞HO-8910 内c-Fos 蛋白表达的影响
• 第四章 讨论
• 4.1 免疫组织化学观察正常、良性和恶性卵巢组织内p-ERK1/2 蛋白和 c-Fos蛋白的表达
• 4.2 PD98059 对卵巢癌细胞HO-8910 活性的影响
• 4.3 PD98059 对卵巢癌细胞HO-8910 细胞周期的影响
• 4.4 PD98059对卵巢癌细胞HO-8910内c-Fos蛋白表达的影响
• 第五章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 攻读学位期间的研究成果