论文题目: 人骨髓间充质干细胞分化潜能的探讨
论文类型: 博士论文
论文专业: 细胞生物学
作者: 陶欣荣
导师: 胡以平
关键词: 间充质干细胞,人骨髓,细胞系,克隆,细胞分化,细胞移植
文献来源: 第二军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: 人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)是骨髓中的一类与造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)不同的,具有向骨、软骨、脂肪、肌肉等多种组织细胞分化能力的成体干细胞,它在体外可以大量增殖,并具有克隆形成的能力。它就是人们很早就知道的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)。由于其具有多向分化的潜能,在体外又较容易培养扩增,加之具有潜在的细胞治疗价值,故引起了生物学界和医学界的关注。 然而,相对于HSCs来说,人们对MSCs生物学特性的认识要滞后得多,就连其表型特征和分化潜能的认识也尚不一致。造成这种情况的主要原因可能有:1)个体发育的不同阶段,MSCs的表型和功能有差异;2)骨髓中存在不同分化等级的MSCs;3)骨髓中不同空间位置的MSCs存在差异;4)不同实验室分离MSCs的方法不同,分离后体外培养的条件也不一样,以致所获得的MSCs也不同;5)用于研究MSCs分化潜能的体外诱导和体内移植的体系不一致。因此,MSCs迄今尚无公认的、高度特异性的分子标记,也没有较为标准的分离和培养方法。Friedenste AJ(1970)和Gronthos S(2003)等人的研究发现体外培养的单个骨髓基质细胞贴壁生长后可以形成克隆,称为集落形成成纤维样细胞(clonogenic precursors,或colony-forming fibroblastic units,CFU-F),一般所说的骨髓间充质干细胞很可能就是其中的某种或某些类型的细胞群体。 基于这样一个研究背景,本课题试图直接从人骨髓中分离较为原始的骨髓间充质干细胞,以期对MSCs的基本生物学特性能够有一个比较全面的认识。本文的目的在于:1)建立克隆化的人骨髓间充质干细胞系,并建立适合其生长和增殖的体外培养条件;2)鉴定它的基本生物学特性;3)研究其向外胚层神经细胞和内胚层肝脏细胞分化的潜能。 本实验以年龄为17y-65y的正常人骨髓为材料,利用hMSCs贴壁生长和具集落形成能力的特点,得到了多个克隆化的细胞系。对其中的一个可稳定传代的细胞系(hMSCs-2002-3)的基本生物学特性进行了系统的研究,探讨了骨髓hMSCs在体内和体外的分化潜能,以及其在损伤肝和神经系统中的植入和分化命运。所获得的主要结果如下: (1)hMSCs-2002-3具有间充质干细胞基本的生物学特性。选取骨髓细胞原代培养物
论文目录:
缩略词表
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分：人骨髓间充质干细胞系的建立及其基本生物学特性的研究
实验材料
实验方法
结果
讨论
参考文献
第二部分：人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究
材料与方法
结果
讨论
参考文献
第三部分：人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的实验研究
材料与方法
结果
讨论
参考文献
研究小结
综述：骨髓间充质干细胞多向分化潜能的研究进展
致谢
附录1：博士期间发表和形成的文章
附录2：逆转录病毒载体pLNCG C1图
发布时间: 2005-07-19
参考文献
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